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組胺說(shuō)明書(shū),組胺產(chǎn)品資料
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本文由 上海金穗生物科技有限公司 整理匯編
2018-10-08 10:00 455閱讀次數(shù)
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CAS號(hào):56-92-8中文名稱(chēng):組胺其他中文名稱(chēng):組胺雙鹽酸鹽;二鹽酸組胺;二鹽酸-1H-咪唑-4-乙胺;2-(4-咪唑基)乙胺;二鹽酸-β-氨乙基甘惡啉;二鹽酸組織胺英文名稱(chēng):Histaminedihydrochloride其他英文名稱(chēng):2-(4-Imidazolyl)ethylaminedihydrochloride;2-(1H-Imidazol-4-yl)ethylaminedihydrochloride產(chǎn)品規(guī)格:BRwww.shjsbio.com
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組胺說(shuō)明書(shū),組胺產(chǎn)品資料
- CAS號(hào):56-92-8中文名稱(chēng):組胺其他中文名稱(chēng):組胺雙鹽酸鹽;二鹽酸組胺;二鹽酸-1H-咪唑-4-乙胺;2-(4-咪唑基)乙胺;二鹽酸-β-氨乙基甘惡啉;二鹽酸組織胺英文名稱(chēng):Histaminedihydrochloride其他英文名稱(chēng):2-(4-Imidazolyl)ethylaminedihydrochloride;2-(1H-Imidazol-4-yl)ethylaminedihydrochloride產(chǎn)品規(guī)格:BRwww.shjsbio.com[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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豬組胺(Histamine)說(shuō)明書(shū)
- 豬組胺(Histamine)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定豬血清,血漿及相關(guān)液體樣本中組胺(Histamine)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬組胺(Histamine)水平。用純化的豬組胺(Histamine)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入組胺(Histamine),再與HRP標(biāo)記的組胺抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的組胺(Histamine)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬組胺(Histamine)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書(shū)1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:18μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為12μg/L,8μg/L,4μg/L,2μg/L,1μg/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和15%檢測(cè)范圍:0.3μg/L-16μg/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-21 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人組胺(Histamine)說(shuō)明書(shū)
- 人組胺(Histamine)說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2024-10-08 05:30
課件
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組胺ELISA Kit使用說(shuō)明書(shū)
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4組胺ELISAKit使用說(shuō)明書(shū)(德國(guó)IBL:RE59221)1、應(yīng)用范圍此試劑盒可用于人血漿和尿液中組胺的體外定量檢測(cè)。深化此實(shí)驗(yàn)可用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液的研究。2、前言說(shuō)明組胺(β-咪唑乙胺)是人體中Z重要的介質(zhì),它主要存在于過(guò)敏反應(yīng)的起始階段(速發(fā)型過(guò)敏)。組胺是由組胺酸經(jīng)脫氨基作用產(chǎn)生的。組胺幾乎存在于機(jī)體的所有組織中,主要儲(chǔ)存于柱狀細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的異染性顆粒中。組胺通常都是以無(wú)活性的復(fù)合體性存在,只有當(dāng)需要的時(shí)候才會(huì)釋放。像其它的介質(zhì)一樣,組胺不僅能調(diào)節(jié)過(guò)敏反應(yīng)的各種臨床癥狀,也可以調(diào)節(jié)終止過(guò)敏反應(yīng)的一系列效應(yīng)。組胺在組織中的生物活性是通過(guò)三種受體來(lái)完成的,它們分別是H1,H2和H3受體。臨床檢測(cè)組胺的方法有:定量檢測(cè)各種速發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)中嗜堿性白細(xì)胞釋放組胺的量,也可以檢測(cè)過(guò)敏藥物ZL后各種體液(血漿,尿液,細(xì)胞培養(yǎng)上清)中組胺的量。3、實(shí)驗(yàn)原理此ELISA試劑盒利用的是競(jìng)爭(zhēng)法的原理。樣品中未知量的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合到包被在微孔中的抗體結(jié)合位點(diǎn)上。溫育后洗板以終止競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)。加入底物液后,溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與樣品中抗原的量成反比。樣品的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接獲取。4、儲(chǔ)存與穩(wěn)定性試劑盒必須在2-8℃的環(huán)境下運(yùn)輸和儲(chǔ)存,避免太陽(yáng)直射。樣品的儲(chǔ)存與穩(wěn)定性及試劑準(zhǔn)備將在相關(guān)章節(jié)中闡述。如果將包被板密封并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下時(shí),試劑在有效期內(nèi)穩(wěn)定。5、樣品的采集與儲(chǔ)存血漿(EDTA,肝素)按照靜脈穿刺的常規(guī)注意事項(xiàng)采集樣品,血液樣品自采集到實(shí)驗(yàn)時(shí)都必須保證其化學(xué)完整性。不要使用明顯溶血、黃疸和脂血樣品。混濁的樣品應(yīng)當(dāng)在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前離心以除去所有的顆粒性物質(zhì)。儲(chǔ)存2-8℃≤-20℃≤-70℃避免太陽(yáng)直射,避免反復(fù)凍融。穩(wěn)定性5小時(shí)3個(gè)月2年尿液實(shí)驗(yàn)必須使用自然產(chǎn)生的尿液,也可使用24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生的尿液。收集病人24小時(shí)內(nèi)產(chǎn)生的尿液,并混合于含10-15ml6NHCl防腐劑的容器中。為了計(jì)算結(jié)果,請(qǐng)確定尿液的總體積。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前請(qǐng)先將樣品離心。自然的尿液酸化尿液避免太陽(yáng)直射,避免反復(fù)凍融。儲(chǔ)存2-8℃2-8℃≤-20℃穩(wěn)定性8小時(shí)3天6個(gè)月細(xì)胞培養(yǎng)上清使用細(xì)胞培養(yǎng)上清作樣品,一般沒(méi)特殊注意事項(xiàng)細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)的組胺濃度可能稍微要高些。全血全血中組胺釋放量的檢測(cè)必須用肝素化全血,具體信息請(qǐng)見(jiàn)相應(yīng)的說(shuō)明書(shū)(RE95000)6、試劑盒成分注意:試劑盒有足夠做96份單孔檢測(cè)或48份雙孔檢測(cè)所需的試劑成分?jǐn)?shù)量標(biāo)記成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了羊抗兔抗血清。1×5mlANTISERUM組胺抗血清,藍(lán)色,即用,內(nèi)含:兔抗血清、Tris緩沖液和0.01%的硫柳汞1×75ulENZCONJCONC酶聯(lián)物,200倍濃縮,內(nèi)含辣根過(guò)氧酶標(biāo)記的組胺。7×0.4mlCALPA-GLYO血漿標(biāo)準(zhǔn)品A-G,凍干,用于血漿樣品的定標(biāo)。內(nèi)含:組胺、人血漿。具體濃度請(qǐng)見(jiàn)試劑瓶標(biāo)簽或質(zhì)控單。2×0.4mlCONTROLP1+2LYO血漿質(zhì)控1+2,凍干,內(nèi)含:組胺、人血清。具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見(jiàn)試劑瓶標(biāo)簽。1×2.0ml5×0.25mlCALU/CA-F尿液/細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)品A-F,0;2.7;8.1;24.3;73;219ng/ml,即用,用于尿液和細(xì)胞培養(yǎng)樣品的定標(biāo)。內(nèi)含:組胺和0.1M的HCl。2×0.25mlCONTROLU/C1+2尿液質(zhì)控1+2,即用,內(nèi)含:組胺、人尿液(酸化的)。具體濃度及可允許范圍請(qǐng)見(jiàn)試劑瓶標(biāo)簽。1×2.25mlACYLREAG酰化試劑,即用,內(nèi)含:DMF1×60mlASSAYBUFCONC檢測(cè)緩沖液,5倍濃縮,內(nèi)含Tris緩沖液、吐溫、BSA和0.05%的硫柳汞。1×50mlWASHBUFCONC洗滌液,20倍濃縮,內(nèi)含磷酸緩沖液、吐溫和0.1%的硫柳汞。1×10mlINDICATORBUF指示緩沖液,紫色,即用,內(nèi)含:Tris緩沖液、苯酚(pH<7.5時(shí)顏色會(huì)發(fā)生改變=和0.1%的硫柳汞。1×12mlTMBSUBSTMB底物液,即用,內(nèi)含TMB、緩沖液和穩(wěn)定劑。1×12mlTMBSTOPTMB終止液,即用,1M的H2SO4。3×FOIL粘性金屬板7、實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒不提供1)移液器,體積:10;20;50;100;1000ul2)試管(12×75mm)3)試管架4)振蕩器5)旋渦混合器(500rpm)6)帶儲(chǔ)器的8道移液器7)洗滌瓶,自動(dòng)或半自動(dòng)洗板機(jī)8)酶標(biāo)儀(參考波長(zhǎng):600-650nm)9)蒸餾水或去離子水10)吸水紙、取樣吸頭和計(jì)時(shí)器8、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備說(shuō)明注意96人份的試劑盒可分成三份分別進(jìn)行檢測(cè),下述體積為檢測(cè)32人份時(shí)所需要的體積。8.1凍干或濃縮成分的準(zhǔn)備稀釋/溶解成分稀釋劑比例備注儲(chǔ)存穩(wěn)定性20ml檢測(cè)緩沖液100ml蒸餾水1:52-8℃2周15ml洗滌液300ml蒸餾水1:2018-25℃將晶體溶解掉2-8℃4周血漿標(biāo)準(zhǔn)品0.4ml蒸餾水靜置15min,混合時(shí)無(wú)泡沫-20℃1個(gè)月血漿質(zhì)控品0.4ml蒸餾水靜置15min,混合時(shí)無(wú)泡沫-20℃1個(gè)月10ul(*)酶聯(lián)物2ml檢測(cè)緩沖液1:200臨時(shí)配置,只能使用一次18-25℃30分鐘(*)在稀釋前,確保塞子內(nèi)無(wú)殘留液體.8.2樣品的稀釋樣品中組胺濃度高于Z高標(biāo)準(zhǔn)品的樣品,應(yīng)當(dāng)在?;坝孟鄳?yīng)的稀釋液稀釋,尿液樣品用0.1M的HCl,血漿樣品用樣品稀釋液(Cat.no.KEHP711),試劑盒內(nèi)未提供。8.3樣品的?;迷嚬軠?zhǔn)備樣品注意不能血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線確定酰化尿液或細(xì)胞培養(yǎng)樣品中組胺的濃度,也不能用U/C標(biāo)準(zhǔn)曲線確定?;獫{樣品中組胺的濃度.8.3.1血漿1將血漿標(biāo)準(zhǔn)品、血漿質(zhì)控品和病人樣品分別100ul加入到相應(yīng)的試管中。2在每一試管中加入100ul指示緩沖液,旋渦混合。3在每一試管中加入20ul?;噭?,加入酰化試劑后立即旋渦混合。4將試管蓋好,室溫(18-25℃)溫育30分鐘。5在每一試管中加入750ul已稀釋好的檢測(cè)緩沖液,旋渦混合。8.3.2尿液,細(xì)胞培養(yǎng)上清1將U/C標(biāo)準(zhǔn)品、尿液質(zhì)控品和病人尿液或細(xì)胞培養(yǎng)上清分別50ul加入到相應(yīng)的試管中。2在每一試管中加入50ul指示緩沖液,旋渦混合。如果指示劑變成無(wú)色,說(shuō)明溶液的pH值很低,樣品中含有很多酸性物質(zhì)。在這種情況下,再向試管中加入50ul指示緩沖液直至溶液略帶微紅。3在每一試管中加入10ul?;噭?,加入酰化試劑后立即旋渦混合。4將試管蓋好,室溫(18-25℃)溫育30分鐘。5在每一試管中加入2000ul已稀釋好的檢測(cè)緩沖液,旋渦混合。注意:酰化處理好的樣品可在2-8℃下存放一晚,-20℃環(huán)境下可存放2天。9、實(shí)驗(yàn)步驟1將?;幚磉^(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和病人樣品分別50ul加入到相應(yīng)的微孔中。2在每一微孔中加入50ul臨時(shí)配置好的酶聯(lián)物。3在每一微孔中加入50ul組胺抗血清。4蓋板,振蕩器(500rpm)上室溫溫育3小時(shí)。5移去粘性金屬板,棄取孔內(nèi)反應(yīng)物,每孔用250ul稀釋好的洗滌液洗板4次,吸水紙上拍干以除去殘余液體。6如果有條件的話(huà),可以用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液時(shí),每孔的時(shí)間間隔應(yīng)當(dāng)相同。使用主動(dòng)置換型移液器并避免氣泡產(chǎn)生。7在每一微孔中加入100ulTMB底物液。8血漿:振蕩器(500rpm)上室溫溫育40min。尿液/細(xì)胞培養(yǎng)上清:振蕩器(500rpm)上室溫溫育20min。9在每一微孔中加入100ulTMB終止液以終止底物反應(yīng)。輕輕振板使溶液混合均勻。10加終止液后15min內(nèi)450nm處讀取OD值。(參考波長(zhǎng):600-650nm)10、期望值實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能當(dāng)作任何ZL結(jié)果的**原因,疾病的判斷還應(yīng)當(dāng)與其它臨床觀察和診斷檢測(cè)相結(jié)合。以下結(jié)果為正常人群的正常值(5%-95%),建議每個(gè)實(shí)驗(yàn)室讀確定自己的正常值范圍:血漿尿液24小時(shí)尿液自然產(chǎn)生的尿液ng/mlug/dug/g肌酐酸0.2-1.05-568-53本譯文僅供參考,詳情請(qǐng)以原文為準(zhǔn)。ZGdu家總代理:深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司辦公地址:深圳市蛇口太子路18號(hào)海景廣場(chǎng)11C研發(fā)ZX:深圳市蛇口沿山路10號(hào)6層電話(huà):0755-26814430,26680196郵政編碼:51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2018-11-14 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人組胺(HIS)說(shuō)明書(shū).pdf
- 人組胺(HIS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T0.5μg/L-18μg/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中組胺(HIS)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人組胺(HIS)水平。用純化的人組胺(HIS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入組胺(HIS),再與HRP標(biāo)記的組胺(HIS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的組胺(HIS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人組胺(HIS)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(32μg/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。16μg/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液8μg/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液4μg/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2μg/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1μg/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2024-10-03 00:29
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人組胺(Histamine)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 人組胺(Histamine)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人Histamine單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的Histamine與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人Histamine,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測(cè)OD值,Histamine濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中Histamine濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1:5稀釋?zhuān)ㄈ?0ul,加標(biāo)本稀釋液80ul,稀釋5倍)。細(xì)胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測(cè)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋?zhuān)瑥牡谄吖苤形?00ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)Histamine含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Histamine檢測(cè)濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人Histamine。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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豬組胺(HIS)酶聯(lián)免疫分析說(shuō)明書(shū)
- 豬ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬組胺(HIS)水平。用純化的豬組胺(HIS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入組胺(HIS),再與HRP標(biāo)記的組胺(HIS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的組胺(HIS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬組胺(HIS)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(240ng/mL)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。120ng/mL5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60ng/mL4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30ng/mL3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液15ng/mL2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液7.5ng/mL1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測(cè)樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。豬ELISA試劑盒注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。豬ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠組胺(HIS)檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 小鼠組胺(HIS)檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)該試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物(HRPStreptavidinConjugate,HRP-SA)為基礎(chǔ),可用于檢測(cè)血液,細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性CD40抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的CD40一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后,用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合,Z后加入HRP-SA,形成抗原特異一抗生物素化二抗HRP-SA復(fù)合物,顯微鏡下觀察成像。小鼠組胺(HIS)檢測(cè)試劑盒試劑盒所含試劑:試劑A通透液:0.1%Triton-X10010mL(選用)試劑B封閉緩沖液(封閉用)20mL試劑C(原裝進(jìn)口分裝)已稀釋的即用型CD40一抗(2.5ml)試劑D(原裝進(jìn)口分裝)生物素化羊抗兔IgG1支(濃度1.5mg/mL,稀釋比為1:300~1:500)50μL+抗體稀釋液20ml試劑EHRP-SA復(fù)合物1支(濃度1μM,稀釋比1:50~1:200)100μL試劑FDAB顯色液5ml用戶(hù)自備試劑:1.10mMTBS(pH7.2~7.4)三羥基氨基甲烷1.21g氯化鈉7.6g加蒸餾水800mL,濃鹽酸調(diào)pH值至7.2~7.4,Z后定容至1000mLTBS-T:TBS+Tween20(0.05%體積比)2.抗原修復(fù)液(依檢測(cè)抗原不同而選擇不同的修復(fù)液)10mMpH6.0檸檬酸緩沖液檸檬酸0.38g檸檬酸三鈉2.45g加蒸餾水900mL,濃鹽酸調(diào)pH值至6.0,Z后定容至1000mL或:0.5MEDTA修復(fù)液(pH8.0)EDTA2H2O186.1g加蒸餾水700mL,用10mMNaOH調(diào)pH值至8.0,Z后定容至1000Ml3.緩沖甘油封固劑10mL4.Tween205mL石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟(建議方案):石蠟包埋組織切片3~4μm厚度1.烤片:將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1hr;2.脫蠟:切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10min;3.水化:切片經(jīng)下行酒精水化,無(wú)水乙醇5min,95%乙醇2次(每次2min),85%乙醇2min;75%乙醇2min,自來(lái)水沖洗,ddH2O洗2×2min;4.抗原修復(fù):根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓、微波(溫度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,室溫自然冷卻,自來(lái)水沖洗,ddH2O洗2×2min,TBS洗滌(2×2min)(具體修法見(jiàn)附1)*注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第5步封閉。5.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育30min;6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2hr或4℃;7.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);8.封閉:滴加試劑B,37℃濕盒孵育10min;9.加二抗:滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30min;10.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min);11.封閉:滴加試劑Tween20,37℃濕盒孵育封閉20min;12.加HRP-SA:滴加用試劑C稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20nM),37℃濕盒中孵育30min;13.洗滌:TBS-T洗滌(3×5min),TBS洗滌(2×5min);14.顯色:應(yīng)用DAB溶液(試劑F)顯色;15.復(fù)染:自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,脫水,透明;16.封片:待組織標(biāo)本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;17.觀察成像:顯微鏡下觀察成像。小鼠組胺(HIS)檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):1.修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,自來(lái)水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。2.緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過(guò)的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用。3.若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部。4.封片前一定要換用TBS充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween20,否則會(huì)影響結(jié)果觀察。5.如須復(fù)染細(xì)胞核,則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。附1:抗原修法常用抗原修復(fù)液:檸檬酸緩沖液(0.01MpH6.0)、EDTA抗原修復(fù)液(pH8.0或9.0)等等。一、酶消化修復(fù)法酶消化修復(fù)切片脫蠟水化處理,TBS沖洗,在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,37℃孵育20~30min后TBS沖洗即可。二、微波抗原修復(fù)法微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔或繼續(xù)微波10~15min,取出微波盒冷卻至室溫后,自來(lái)水沖洗,取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異,須自行調(diào)整。三、直接高壓抗原修復(fù)法取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,將組織切片置于耐高溫切片架上,修復(fù)液沸騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min即可脫離熱源,自然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。四、隔水式高壓抗原修復(fù)法不銹鋼高壓鍋中加自來(lái)水加熱至沸騰,微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時(shí)4~8min即可關(guān)閉熱源,自然冷卻至室溫后自來(lái)水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。[詳細(xì)]
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2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組胺51-45-6質(zhì)檢報(bào)告
- 組胺CAS號(hào):51-45-6組胺C5H9N3=111.15英文名稱(chēng):Histamine;2-(4-Imidazolyl)ethylamine其他名稱(chēng):組胺/2-咪唑基乙胺/組織胺/β-氨乙基咪唑/β-氨乙基甘啉/1H-咪唑-4-乙胺級(jí)別:BR含量:≥98.0%性狀:白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末,空氣敏感。有吸濕性。在日光下易變質(zhì),易溶于水、乙醇和熱氯仿,微溶于乙mi。沸點(diǎn)209~210℃(2.40kPA)。組胺為組胺酶和咪唑-N-甲基轉(zhuǎn)羧酶所滅活用途:生化研究。內(nèi)源性H1和H2組胺受體激動(dòng)劑;H1激活并使Ca2+移動(dòng);H2激活并刺激神經(jīng)元中腺苷酸環(huán)化酶(adenylatecyclase)活性;激活NO合成酶保存:2~8℃,避光[詳細(xì)]
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2018-09-25 10:08
產(chǎn)品樣冊(cè)
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豚鼠組胺(Histamine)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 豚鼠組胺(Histamine)ELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豚鼠組胺(Histamine)水平。用純化的豚鼠組胺(Histamine)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入組胺(Histamine)),再與HRP標(biāo)記的組胺(Histamine)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的組胺(Histamine)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豚鼠組胺(Histamine)濃度。豚鼠組胺(Histamine)ELISA檢測(cè)試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(48μg/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。24μg/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12μg/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6μg/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3μg/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5μg/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。豚鼠組胺(Histamine)ELISA檢測(cè)試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2019-01-02 10:00
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2011-05-24 00:00
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2013-07-25 00:00
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安裝說(shuō)明
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2014-08-20 00:00
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2015-03-17 00:00
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2014-09-29 00:00
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2016-07-07 00:00
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