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人Dickkopf related protein 1 (DKK-1)ELISA試劑盒說明書
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人Dickkopfrelatedprotein1(DKK-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人DKK-1單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的DKK-1與單抗結合,加入生物素化的抗人DKK-1,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,DKK-1濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中DKK-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。血清、血漿作1:2稀釋(取100ul,加標本稀釋液100ul,稀釋2倍)。細胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應DKK-1含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的DKK-1檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人DKK-1。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷!
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人Dickkopf related protein 1 (DKK-1)ELISA試劑盒說明書
- 人Dickkopfrelatedprotein1(DKK-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人DKK-1單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的DKK-1與單抗結合,加入生物素化的抗人DKK-1,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,DKK-1濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中DKK-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。血清、血漿作1:2稀釋(取100ul,加標本稀釋液100ul,稀釋2倍)。細胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應DKK-1含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的DKK-1檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人DKK-1。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒
- 人Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-22 22:29
安裝說明
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人Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒
- 人Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-29 16:11
操作手冊
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大鼠Dkk-1(Dkk-1)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠Dkk-1(Dkk-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和尿液生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠Dkk-1單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的Dkk-1與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠Dkk-1,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,Dkk-1濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中Dkk-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。所有標本測定前用標本稀釋液作1:20稀釋(取10ul,加標本稀釋液190ul,稀釋20倍)。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應Dkk-1含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Dkk-1檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠Dkk-1。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于10.6%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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DKK-1 ELISA試劑盒說明書
- Wnt通路YZ因子DKK-1檢測試劑盒背景介紹:DKK-1是影響成骨細胞成熟的WNT信號通道的拮抗劑。Dkk-1首先在人肝母細胞瘤和Wilms’瘤中,然后在肝腫瘤中被發(fā)現(xiàn)高表達。Dkk-1的高表達被證明可以成為多種腫瘤預后差的標志,如肝細胞癌、食道癌、骨肉瘤、肺癌、結腸癌、骨關節(jié)炎、骨質疏松癥、卵巢上皮癌和多發(fā)性瘤。DKK-1對腫瘤的骨轉移有促進作用,這與DKK-1能導致骨吸收,YZ骨形成的作用相一致。產(chǎn)品優(yōu)勢:用于人血清樣本檢測樣本量小,只需20ul檢測范圍寬夾心法檢測操作時間短參考文獻:TheroleofDickkopf-1inbonedevelopment,homeostasis,anddisease.PinzoneJJetal.,Blood,2009;113:517-525.ElevatedSerumDickopf-1LevelsIncreaseRiskofHipandVertebralFractureinOlderCaucasianWomen.ArasuAetal.,EndocrRev,2013;34:SAT-224.ComparativeEffectofZoledronicAcidVersusDenosumabonSerumSclerostinandDickkopf-1LevelsofNaivePostmenopausalWomenWithLowBoneMass:ARandomized,Head-to-HeadClinicalTrial.AnastasilakisADetal.,JClinEndocrinolMetab,2013;98:3206-3212.[詳細]
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2018-10-31 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人Dickkopf 1(DKK1)檢測試劑盒
- 人Dickkopf 1(DKK1)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-22 17:53
期刊論文
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人dickkopf(DKK1)ELISA試劑盒使用方法
- 使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中dickkopf(DKK1)含量。標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。40μg/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液20μg/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液10μg/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液5μg/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液2.5μg/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。[詳細]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人Dickkopf相關蛋白1(DKK1)檢測試劑盒
- 人Dickkopf相關蛋白1(DKK1)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-22 20:02
實驗操作
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大鼠 Dickkopf 1抗體(DKK1 Ab)ELISA檢測試劑盒
- www.biokanu.com本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷大鼠Dickkopf1抗體(DKK1Ab)ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠Dickkopf1抗原的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠Dickkopf1抗體(DKK1Ab)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。3.細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品酶標儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱操作注意事項試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。預處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品(48ng/mL)0.6mL0.6mL按說明書進行稀釋標準品稀釋液6mL3mL無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無注:標準品用標準品稀釋液依次稀釋為:48、24、12、6、3、1.5ng/mL.試劑的準備20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設置標準品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;待測樣本孔先加樣本稀釋液40μL,再加待測樣本10μL;隨后標準品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。所有孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。結果判斷繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。試劑盒性能1.準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.9900。2.靈敏度:Zdi檢測濃度小于1.0ng/mL。3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4.重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于15%。5.貯藏:2-8℃,避光防潮保存。6.有效期:6個月免責聲明1.試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。2.嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠Dickkopf 1抗體(DKK1 Ab)ELISA檢測試劑盒
- www.biokanu.com本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷大鼠Dickkopf1抗體(DKK1Ab)ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠Dickkopf1抗原的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠Dickkopf1抗體(DKK1Ab)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。3.細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品酶標儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱操作注意事項試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。預處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品(48ng/mL)0.6mL0.6mL按說明書進行稀釋標準品稀釋液6mL3mL無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無注:標準品用標準品稀釋液依次稀釋為:48、24、12、6、3、1.5ng/mL.試劑的準備20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設置標準品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;待測樣本孔先加樣本稀釋液40μL,再加待測樣本10μL;隨后標準品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。所有孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。結果判斷繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。試劑盒性能1.準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.9900。2.靈敏度:Zdi檢測濃度小于1.0ng/mL。3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4.重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于15%。5.貯藏:2-8℃,避光防潮保存。6.有效期:6個月免責聲明1.試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。2.嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人 EphA2 Protein ELISA 檢測試劑盒內容
- 人EphA2ProteinELISA檢測試劑盒內容試驗原理:EphA2試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知EphA2濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將EphA2和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中EphA2的濃度呈比例關系。試劑盒內容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:800ug/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗EphA2抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。試劑的準備人EphA2ProteinELISA檢測試劑盒1.標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:800ug/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400ug/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液200ug/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液100ug/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液50ug/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液25ug/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0ug/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。人EphA2ProteinELISA檢測試劑盒人EphA2ProteinELISA檢測試劑盒[詳細]
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2018-09-28 10:00
產(chǎn)品樣冊
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Dickkopf相關蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒說明書
- Dickkopf相關蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本:體液Dickkopf相關蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒說明書試驗原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系。Dickkopf相關蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒說明書自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。Dickkopf相關蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒說明書操作注意事項1.試劑應按標簽儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。Dickkopf相關蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。Dickkopf相關蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒說明書操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結果。Dickkopf相關蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒說明書性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。Dickkopf相關蛋白4(DKK4)ELISA試劑盒說明書結果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlNT-4兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子4規(guī)格:48T/96-3兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3規(guī)格:48T/96TNSE兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶規(guī)格:48T/96TNGF兔子神經(jīng)生長因子規(guī)格:48T/96TGFAP兔子神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白規(guī)格:48T/96TPGE2兔子前列腺素E2規(guī)格:48T/96TPGE1兔子前列腺素E1規(guī)格:48T/96TGIP兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽規(guī)格:48T/96TCORT兔子皮質酮/腎上腺酮規(guī)格:48T/96TCortisol兔子皮質醇規(guī)格:48T/96TFⅡ兔子凝血因子Ⅱ規(guī)格:48T/96TTR兔子凝血酶受體規(guī)格:48T/96TBNP兔子腦鈉素/腦鈉尿肽規(guī)格:48T/96TES兔子內皮抑素規(guī)格:48T/96TeNOS-3兔子內皮型一氧化氮合成酶3規(guī)格:48T/96TET-1兔子內皮素1規(guī)格:48T/96TET-1兔子內皮素1規(guī)格:48T/96TIgM兔子免疫球蛋白M規(guī)格:48T/96TIgG兔子免疫球蛋白G規(guī)格:48T/96TIgE兔子免疫球蛋白E規(guī)格:48T/96TIgA兔子免疫球蛋白A規(guī)格:48T/96TSam兔子可溶性粘附分子規(guī)格:48T/96TsVCAM-1兔子可溶性血管細胞粘附分子1規(guī)格:48T/96TsEPCR兔子可溶性血管內皮細胞蛋白C受體規(guī)格:48T/96TsICAM-1兔子可溶性細胞間粘附分子1規(guī)格:48T/96TsCD40L兔子可溶性白細胞分化抗原40配體規(guī)格:48T/96TsP-selectin兔子可溶性P選擇素規(guī)格:48T/96TsE-selectin兔子可溶性E選擇素規(guī)格:48T/96TANGA兔子抗中性粒細胞顆??贵w規(guī)格:48T/96TMIP-5兔子巨噬細胞炎性蛋白5規(guī)格:48T/96TMIP-1α/CCL3兔子巨噬細胞炎性蛋白1α規(guī)格:48T/96TCollagenaseII兔子膠原酶II規(guī)格:48T/96TCollagenaseI兔子膠原酶I規(guī)格:48T/96TbFGF兔子堿性成纖維細胞生長因子規(guī)格:48T/96TT4兔子甲狀腺素規(guī)格:48T/96TTIMP-1兔子基質金屬蛋白酶YZ因子1規(guī)格:48T/96TMMP-9兔子基質金屬蛋白酶9規(guī)格:48T/96TMMP-5兔子基質金屬蛋白酶5規(guī)格:48T/96TMMP-4兔子基質金屬蛋白酶4規(guī)格:48T/96TMMP-3兔子基質金屬蛋白酶3規(guī)格:48T/96TCr兔子骨膠原交聯(lián)規(guī)格:48T/96TT兔子睪酮規(guī)格:48T/96THGF兔子肝細胞生長因子規(guī)格:48T/96TTE兔子端粒酶規(guī)格:48T/96TCETP兔子膽固醇酯轉移蛋白規(guī)格:48T/96TMCP-1/CCL2/MCAF兔子單核細胞趨化蛋白1規(guī)格:48T/96TPRL兔子催乳素規(guī)格:48T/96TPRL兔子催乳素規(guī)格:48T/96TACTH兔子促腎上腺皮質激素規(guī)格:48T/96TFSH兔子促卵泡素規(guī)格:48T/96TTSH兔子促甲狀腺素規(guī)格:48T/96TLH兔子促黃體激素規(guī)格:48T/96TLH兔子促黃體激素規(guī)格:48T/96TE2兔子雌二醇規(guī)格:48T/96TiFABP兔子腸脂肪酸結合蛋白規(guī)格:48T/96TC3a兔子補體片斷3a規(guī)格:48T/96TC4兔子補體蛋白4規(guī)格:48T/96TEGF兔子表皮生長因子規(guī)格:48T/96TLIFR兔子白血病YZ因子受體規(guī)格:48T/96TLTB4兔子白三烯B4規(guī)格:48T/96TIL-4兔子白介素4規(guī)格:48T/96TIL-3兔子白介素3規(guī)格:48T/96TIL-2兔子白介素2規(guī)格:48T/96TIL-1sRⅠ兔子白介素1可溶性受體I規(guī)格:48T/96TIL-1β兔子白介素1β規(guī)格:48T/96TIL-10兔子白介素10規(guī)格:48T/96TIL-1兔子白介素1規(guī)格:48T/96TIFN-γ兔子γ干擾素規(guī)格:48T/96Tβ-TG兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白規(guī)格:48T/96TIFN-α兔子α干擾素規(guī)格:48T/96TS-100兔子S100蛋白規(guī)格:48T/96TS-100B兔子S100B蛋白規(guī)格:48T/96TE-Selectin/CD62E兔子E選擇素規(guī)格:48T/96TD2D兔子D二聚體規(guī)格:48T/96TCRP兔子C反應蛋白規(guī)格:48T/96TBcl-2兔子B細胞淋巴瘤因子2規(guī)格:48T/96TPⅢNP兔子Ⅲ型前膠原肽規(guī)格:48T/96TPⅢNT兔子Ⅲ型前膠原氨基端肽規(guī)格:48T/96TColⅢ兔子Ⅲ型膠原規(guī)格:48T/96TColⅡ兔子Ⅱ型膠原規(guī)格:48T/96TPⅠCP兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽規(guī)格:48T/96TColⅠ兔子Ⅰ型膠原規(guī)格:48T/96TTGFβ2兔轉化生長因子β2規(guī)格:48T/96TMHCⅡ/RLAⅡ兔主要組織相容性復合體Ⅱ類規(guī)格:48T/96TMHCⅠ/RLAⅠ兔主要組織相容性復合體Ⅰ類規(guī)格:48T/96TLp-α兔脂蛋白α規(guī)格:48T/96TApo-E兔載脂蛋白E規(guī)格:48T/96Tapo-B100兔載脂蛋白B100規(guī)格:48T/96Tapo-A1兔載脂蛋白A1規(guī)格:48T/96TiNOS兔誘導型一氧化氮合成酶規(guī)格:48T/96TOSM兔抑瘤素M規(guī)格:48T/96TAChRab兔乙酰膽堿受體抗體規(guī)格:48T/96TACh兔乙酰膽堿規(guī)格:48T/96TNOS兔一氧化氮合成酶規(guī)格:48T/96TOLAb兔氧化低密度脂蛋白抗體規(guī)格:48T/96TFbg兔血纖蛋白原規(guī)格:48T/96TTXB2兔血栓素B2規(guī)格:48T/96TCH50兔血清總補體規(guī)格:48T/96TNO兔血清一氧化氮規(guī)格:48T/96TGMP-140兔血漿α顆粒膜蛋白規(guī)格:48T/96TVWF兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子規(guī)格:48T/96TANG-2兔血管生成素2規(guī)格:48T/96TVCAM-1/CD106兔血管內皮細胞粘附分子1規(guī)格:48T/96TVEGF兔血管內皮細胞生長因子規(guī)格:48T/96TANG-Ⅱ兔血管緊張素Ⅱ規(guī)格:48T/96TcTnT兔心肌特異性肌鈣蛋白T規(guī)格:48T/96TcTn-Ⅰ兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格:48T/96TTAFI兔纖溶YZ因子規(guī)格:48T/96TPAP兔纖溶酶抗纖溶酶復合物規(guī)格:48T/96TGHbA1c兔糖化血紅蛋白A1c規(guī)格:48T/96TRenin兔腎素規(guī)格:48T/96TPEDF兔色素上皮衍生因子規(guī)格:48T/96TLF/LTF兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白規(guī)格:48T/96TLZM兔溶菌酶規(guī)格:48T/96THSP-90兔熱休克蛋白90規(guī)格:48T/96THSP-70兔熱休克蛋白70規(guī)格:48T/96THSP-40兔熱休克蛋白40規(guī)格:48T/96THSP-20兔熱休克蛋白20規(guī)格:48T/96TNA兔去甲腎上腺素規(guī)格:48T/96TF1+2兔凝血酶原片段F1+2規(guī)格:48T/96TPLAUR/uPAR兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體規(guī)格:48T/96TuPA兔尿激酶型纖溶酶原激活物規(guī)格:48T/96TeNOS兔內皮型一氧化氮合成酶規(guī)格:48T/96TLFA-3/CD58兔淋巴細胞功能相關抗原3規(guī)格:48T/96TsFAS/Apo-1兔可溶性凋亡相關因子規(guī)格:48T/96TGP兔抗糖蛋白抗體規(guī)格:48T/96TASMA兔抗平滑肌抗體規(guī)格:48T/96TABAb兔抗腦組織抗體規(guī)格:48T/96TAECA兔抗內皮細胞抗體規(guī)格:48T/96TAMA兔抗單核細胞抗體規(guī)格:48T/96TMMP-2兔基質金屬蛋白酶2/明膠酶A規(guī)格:48T/96TMMP-1兔基質金屬蛋白酶1規(guī)格:48T/96TTn-Ⅰ兔肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格:48T/96TcAMP兔環(huán)磷酸腺苷規(guī)格:48T/96TRANKL兔核因子κB受體活化因子配基規(guī)格:48T/96TPPAR-γ兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ規(guī)格:48T/96TOPN兔骨橋素規(guī)格:48T/96TLebtospira兔鉤端螺旋體IgG規(guī)格:48T/96TCA兔兒茶酚胺規(guī)格:48T/96Ths-CRP兔超敏C反應蛋白規(guī)格:48T/96TC3兔補體蛋白3規(guī)格:48T/96TPY兔吡啶交聯(lián)物規(guī)格:48T/96TCys-C兔半胱氨酸蛋白酶YZ劑/胱抑素C規(guī)格:48T/96TIL-17兔白介素17規(guī)格:48T/96TADR兔阿霉素規(guī)格:48T/96TAβ1-40兔β淀粉樣蛋白1-40規(guī)格:48T/96Tp53兔p53規(guī)格:48T/96TBAX兔Bcl-2相關X蛋白規(guī)格:48T/96T8-epi-PGF2α兔8-異構前列腺素規(guī)格:48T/96T6-keto-PGF1a兔6酮前列腺素F1a規(guī)格:48T/96TBT蘇云金芽孢桿菌蛋白規(guī)格:48T/96TDBA雙花扁豆凝集素規(guī)格:48T/96TCVF蛇毒因子規(guī)格:48T/96TMHC/OLA山羊主要組織相容性復合體規(guī)格:48T/96TTNF-α山羊腫瘤壞死因子α規(guī)格:48T/96TGHRP山羊生長激素釋放多肽規(guī)格:48T/96T山羊淋巴細胞因子ELISAKit,48T/96T山羊淋巴細胞因子ELISAKit,48T/96T規(guī)格:48T/96Tacetone山羊丙酮檢測規(guī)格:48T/96TIL-4山羊白介素4規(guī)格:48T/96TIL-2R山羊白介素2受體規(guī)格:48T/96TIL-2山羊白介素2規(guī)格:48T/96TIL-10山羊白介素10規(guī)格:48T/96TIFN-γ山羊γ干擾素規(guī)格:48T/96TTF人組織因子規(guī)格:48T/96Tt-PA人組織型纖溶酶原激活劑規(guī)格:48T/96TLTBP2人組織內轉化生長因子β結合蛋白2規(guī)格:48T/96TTPS人組織多肽特異性抗原規(guī)格:48T/96TTPA人組織多肽抗原規(guī)格:48T/96THD人組織蛋白去乙?;敢?guī)格:48T/96TCathAb人組織蛋白酶抗體規(guī)格:48T/96T[詳細]
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2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒說明書
- 人轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中人轉化生長因子β1(TGF-β1)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人轉化生長因子β1(TGF-β1)水平。用純化的人轉化生長因子β1(TGF-β1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入轉化生長因子β1(TGF-β1),再與HRP標記的轉化生長因子β1(TGF-β1)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉化生長因子β1(TGF-β1)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人轉化生長因子β1(TGF-β1)的含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:1800ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200ng/L,800ng/L,400ng/L,200ng/L,100ng/L)。加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍:50ng/L-1500ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2024-09-30 01:17
產(chǎn)品樣冊
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人白介素-1(IL-1)ELISA試劑盒說明書
- 人白介素-1b(IL-1b)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人IL-1b單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的IL-1b與單抗結合,加入生物素化的抗人IL-1b,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,IL-1b濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中IL-1b濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入2ml蒸餾水混勻,配成10ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入10ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品1000、500、250、125、62、31、15.6、0PG/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應IL-1b含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的IL-1b檢測濃度小于8pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人IL-1b。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于11%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。4.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人白介素-1(IL-1)ELISA試劑盒說明書
- 人白介素-1a(IL-1a)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人IL-1a單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的IL-1a與單抗結合,加入生物素化的抗人IL-1a,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,IL-1a濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中IL-1a濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成10ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入10ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0PG/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應IL-1a含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的IL-1a檢測濃度小于8pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人IL-1a。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人白介素-1(IL-1)ELISA試劑盒說明書
- 人白介素-1(IL-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人IL-1單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的IL-1與單抗結合,加入生物素化的抗人IL-1,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,IL-1濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中IL-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):10ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成10ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入10ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應IL-1含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的IL-1檢測濃度小于8pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人IL-1。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人缺氧誘導因子-1(HIF-1)ELISA試劑盒說明書
- 人缺氧誘導因子-1a(HIF-1a)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人HIF-1a單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的HIF-1a與單抗結合,加入生物素化的抗人HIF-1a,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,HIF-1a濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中HIF-1a濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):80ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請先做預實驗,以確定稀釋倍數(shù)。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成80ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入80ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0PG/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應HIF-1a含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的HIF-1a檢測濃度小于78pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人HIF-1a。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于11.6%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人內皮素-1(Endothelin-1)ELISA試劑盒說明書
- 人內皮素-1(Endothelin-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人Endothelin-1單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的Endothelin-1與單抗結合,加入生物素化的抗人Endothelin-1,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,Endothelin-1濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中Endothelin-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):4ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成4000pg/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入4000pg/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品400、200、100、50、25、12.5、6.25、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應Endothelin-1含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的Endothelin-1檢測濃度小于3pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人Endothelin-1。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒說明書
- 本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中人基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)水平。用純化的人基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12),再與HRP標記的羊抗人抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:3600pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為2400pg/ml,1600pg/ml,800pg/ml,400pg/ml,200pg/ml)。加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍:100pg/ml-3000pg/ml保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-07 14:16
產(chǎn)品樣冊
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人整合素1(CD29)ELISA試劑盒說明書
- 人整合素b1(CD29)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人CD29單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的CD29與單抗結合,加入生物素化的抗人CD29,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,CD29濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中CD29濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應CD29含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CD29檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人CD29。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2024-09-29 09:17
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