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上海凱朗生化培養(yǎng)箱在多管發(fā)酵法注意事項(xiàng)

本文由 上海凱朗儀器設(shè)備廠 整理匯編

2018-10-01 10:00 1081閱讀次數(shù)

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上海凱朗生化培養(yǎng)箱在多管發(fā)酵法注意事項(xiàng)1.加氯水樣的處理經(jīng)氯處理消毒過(guò)的水樣,水中含有一定量的余氯,使大腸菌群處于受損或受YZ狀態(tài),在采集水樣時(shí)應(yīng)提前在采樣瓶中加硫代硫酸鈉,硫代硫酸鈉可以脫氯,使受損的細(xì)菌得以復(fù)蘇與修復(fù),從而避免出現(xiàn)計(jì)數(shù)結(jié)果偏低甚至假陰性的現(xiàn)象。此外余氯對(duì)濾膜法培養(yǎng)的細(xì)菌其YZ作用尤為明顯,所以抽濾時(shí)應(yīng)對(duì)水樣進(jìn)行大量無(wú)菌水稀釋?zhuān)詼p少余氯的殘留。2.培養(yǎng)溫度的要求總大腸菌群中的細(xì)菌除生活在腸道中外,在自然環(huán)境中的水與土壤中也經(jīng)常存在,但此等在自然環(huán)境中生活的大腸菌群培養(yǎng)的Z合適溫度為25℃左右,如在37℃培養(yǎng)則仍可生長(zhǎng),但如將培養(yǎng)溫度再升高至44.5℃,則不再生長(zhǎng),而直接來(lái)自糞便的大腸菌群細(xì)菌,習(xí)慣于37℃左右生長(zhǎng),如將培養(yǎng)溫度升高至44.5℃仍可繼續(xù)生長(zhǎng)。因此,可用提高培養(yǎng)溫度的方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)分,兩種方法也都基于此理。將接種好的樣品或裝有濾膜的培養(yǎng)基放入生化培養(yǎng)箱時(shí),箱內(nèi)溫度一定要達(dá)到所要求的溫度(44.5±0.5℃)時(shí),方可放入。如用恒溫水浴箱時(shí),其水面要高于接種物面,放濾膜的培養(yǎng)皿要沉到水浴箱底部。3.培養(yǎng)物質(zhì)的制備與保存⑴.多管發(fā)酵法所使用的培養(yǎng)液在分裝于各發(fā)酵管中后,應(yīng)將發(fā)酵管盡快放于高壓蒸汽滅菌器中,在115℃滅菌20min(注意:這個(gè)溫度也應(yīng)控制好,既達(dá)到滅菌的作用,還要防止培養(yǎng)物質(zhì)分解流失),然后貯存于冰箱或暗處備用。⑵.濾膜法所采用的M-FC培養(yǎng)基多使用外購(gòu)的成品,培養(yǎng)基中苯胺藍(lán)的純度和質(zhì)量往往影響菌落的顏色,因此,無(wú)菌包裝的成套培養(yǎng)基在使用前,**先接種典型糞大腸菌,以觀察對(duì)比菌落的顏色,來(lái)鑒定其穩(wěn)定性。4.樣品的保存采樣用的容器使用前應(yīng)蓋好瓶蓋,用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好,置干燥箱160℃-170℃干熱滅菌2h,或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min。采樣后水樣的正確保存也很重要,如保存不當(dāng)可使樣品中的大腸菌群細(xì)菌死亡或在一定條件下再生長(zhǎng),這些都將影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。檢測(cè)室接到水樣后,應(yīng)立即檢測(cè),如因故不能檢測(cè)時(shí),應(yīng)立即將樣品置于冰箱內(nèi)(2℃-10℃)并于2小時(shí)內(nèi)檢測(cè)。5.結(jié)果統(tǒng)計(jì)⑴.多管發(fā)酵法的結(jié)果是根據(jù)不同接種量的發(fā)酵管所出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果的數(shù)目,從MPN表中查得相應(yīng)的MPN指數(shù),來(lái)計(jì)算每升水中糞大腸菌群細(xì)菌的MPN值。MPN是“MostProbableNumber”的縮寫(xiě),指Zda可能數(shù),它是根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)理論,估計(jì)水體中的菌群密度和衛(wèi)生質(zhì)量的一種方法,所以準(zhǔn)確判斷不同接種量發(fā)酵管的陽(yáng)性數(shù)是非常重要的,否則將導(dǎo)致較大偏差。⑵.濾膜法的結(jié)果是計(jì)數(shù)濾膜上呈藍(lán)或藍(lán)綠色的菌落,來(lái)計(jì)算出每升水樣中的糞大腸菌群數(shù)。所以為便于計(jì)數(shù),減少誤差,理想的水樣體積是一片濾膜上生長(zhǎng)20-60個(gè)糞大腸菌群菌落。上海凱朗儀器設(shè)備廠專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)鼓風(fēng)干燥箱、真空干燥箱、馬弗爐、生化培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、試驗(yàn)箱、恒溫?fù)u床、水槽、水浴鍋等實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。

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