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大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒
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2024-09-18 08:00 206閱讀次數(shù)
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大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒
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大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒
- 大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠MIF單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的MIF與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠MIF,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,MIF濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中MIF濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):2ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿標(biāo)本測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液作1:20稀釋(取10ul,加標(biāo)本稀釋液190ul,稀釋20倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成4000pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液200ul。在**管中加入4000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)MIF含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的MIF檢測(cè)濃度小于16pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠MIF。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒
- 大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-18 08:00
專利
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大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)說明書
- www.biokanu.com大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清,細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)水平。用純化的大鼠MIF抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF),再與HRP標(biāo)記的巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:90μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為60μg/L,40μg/L,20μg/L,10μg/L,5μg/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。注意事項(xiàng):試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測(cè)范圍:3μg/L-80μg/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒
- 人巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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人巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒
- 人巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2014-08-21 00:00
課件
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大黃魚巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒批發(fā)
- 大黃魚巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒批發(fā)[詳細(xì)]
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2015-03-13 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人MIF單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的MIF與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人MIF,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,MIF濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中MIF濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請(qǐng)先做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)MIF含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的MIF檢測(cè)濃度小于16pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人MIF。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)因子(MIF)檢測(cè)試劑盒
- 大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)因子(MIF)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2014-09-29 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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人巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)檢測(cè)試劑盒
- 人巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 01:21
課件
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小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子,MIF ELISA Kit 說明書
- 小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書實(shí)驗(yàn)?zāi)康模罕驹噭┖袃H供科學(xué)研究使用,用于測(cè)定小鼠血清,細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)含量。實(shí)驗(yàn)原理:應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)水平。用純化的MIF抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF),再與HRP標(biāo)記的巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:90μg/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請(qǐng)避光保存。嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號(hào)組分不得混用,如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%檢測(cè)范圍:3μg/L-80μg/L試劑盒保存:2-8℃有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-15 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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測(cè)定標(biāo)本中大鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)水平
- 本公司為國內(nèi)權(quán)威試劑盒供應(yīng)商之一,質(zhì)量保證。專業(yè)供應(yīng)Elisa試劑盒,品質(zhì)保證,價(jià)格優(yōu)惠,可免費(fèi)提供代測(cè)服務(wù),歡迎咨詢:13671597285,021-60723333公司Elisa試劑盒主頁:http://www.shgrsw.com計(jì)算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA檢測(cè)試劑盒組成及配置說明
- 小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA檢測(cè)試劑盒組成及配置1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)2、標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為10ng/ml,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成10ng/ml,5ng/ml,2.5ng/ml,1.25ng/ml,0.625ng/ml,0.312ng/ml,0.156ng/ml,樣品稀釋液直接作為空白孔0ng/ml。如配制5ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)10ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。3、樣品稀釋液:1×20ml。4、檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。5、檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。6、檢測(cè)溶液A:1×120/瓶(1:100)。臨用前以檢測(cè)稀釋液A1:100稀釋(如:10檢測(cè)溶液A/990檢測(cè)稀釋液A),充分混勻,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。7、檢測(cè)溶液B:1×120/瓶(1:100)。臨用前以檢測(cè)稀釋液B1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。8、底物溶液:1×10ml/瓶。9、濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。10、終止液:1×10ml/瓶(2mol/LH2SO4)。11、覆膜:5張12、使用說明書:1份小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIF)ELISA檢測(cè)試劑盒說明1、由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對(duì)所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析,本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。2、Z終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān),請(qǐng)務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。3、在儲(chǔ)存及溫育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。4、試劑盒保存:請(qǐng)收到試劑盒后盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A和檢測(cè)溶液B保存于-20,其余試劑短期保存請(qǐng)置于4,長期保存則置于-20。開封后的酶標(biāo)板要密封加干燥劑后保存于-20,避免潮濕。5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。6、剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。7、有效期:6個(gè)月。8、本操作說明適用于48T試劑盒,但48T試劑盒所有試劑減半。[詳細(xì)]
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2024-09-28 07:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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豬巨噬細(xì)胞遷移YZ因子(糖基化YZ因子)(MIF)ELISA檢測(cè)試劑盒
- 豬巨噬細(xì)胞遷移YZ因子(糖基化YZ因子)(MIF)ELISA檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2015-06-30 00:00
專利
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96T人巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子ELISA檢測(cè)試劑盒
- 人巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子ELISA檢測(cè)試劑盒 本試劑僅供研究使用標(biāo)本:尿液試驗(yàn)原理: MIF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知MIF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將MIF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中MIF的濃度呈比例關(guān)系。 自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子ELISA檢測(cè)試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的MIF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的MIF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlPhospho-p56Dok2(Tyr351)磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體0.1mlPhospho-p56Dok2(Tyr299)磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體0.1mlPhospho-EEF2(Thr56)磷酸化真核翻譯延長因子2抗體0.1mlPhospho-EEF2k(Ser366)磷酸化真核延伸因子激酶2抗體0.1mlEpCAM/CD326(Epithelialcelladhesionmolecule)molecule)上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子抗體0.2mlE.coliO6(EscherichiacoliO6;EPECO6)抗大腸埃希桿菌O6抗體(腸致病性大腸桿菌O6)0.2mlE.coliO6(EscherichiacoliO6;EPECO6)抗大腸埃希桿菌O6抗體(腸致病性大腸桿菌O6)1.0mlE.coliDH-5α(EscherichiacoliDH-5α)抗DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體0.2mlE.coliDH-5α(EscherichiacoliDH-5α)抗DH6α大腸桿菌菌體蛋白抗體1.0mlE.coliO157;H7(EscherichiacoliO157:H7)抗大腸埃希氏菌O157抗體(腸出血性大腸埃希氏菌0.2mlE.coliO157;H7(EscherichiacoliO157:H7)抗大腸埃希氏菌O157抗體(腸出血性大腸埃希氏菌1.0mlEPEC/E.coli(enteropathogenicE.coli,EPEC)抗腸致病性大腸桿菌抗體0.2mlPhospho-EGFR(Thr669)磷酸化表皮生長因子受體抗體0.1mlE.coli/EPEC(enteropathogenicE.coli)抗普通大腸埃希菌菌體蛋白抗體0.2mlE.coli/EPEC(enteropathogenicE.coli)抗普通大腸埃希菌菌體蛋白抗體1.0mlE.coliO139(EscherichiacoliO139)抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139)0.2mlE.coliO139(EscherichiacoliO139)抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139)1.0mlEP3(ProstaglandinEreceptor3)前列腺素E受體3抗體0.2mlEphA1R(EphrinA1Receptor)抗EphA1-R受體抗體0.2mlEphA2R(EphrinA2Receptor)兔抗酪氨酸蛋白激酶A2受體抗體0.1mlPhospho-EGFR(Tyr1086)磷酸化表皮生長因子受體抗體0.1mlEphA4(Eph-relatedreceptortyrosinekinaseligand7)抗酪氨酸蛋白激酶A5抗體0.2mlEphA2R(EphrinA2Receptor)兔抗酪氨酸蛋白激酶A2受體抗體0.2ml[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大黃魚巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIFELISA 試劑盒使用品牌
- 大黃魚巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子(MIFELISA 試劑盒使用品牌[詳細(xì)]
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2015-04-03 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子在狼瘡性腎炎中的作用
- 巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子在狼瘡性腎炎中的作用[詳細(xì)]
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2011-11-08 00:00
其它
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巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子與炎癥性腸病的研究進(jìn)展
- 巨噬細(xì)胞移動(dòng)YZ因子與炎癥性腸病的研究進(jìn)展[詳細(xì)]
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2011-11-08 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠白血病YZ因子(LIF)ELISA試劑盒
- 大鼠白血病YZ因子(LIF)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-11 00:00
其它
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大鼠白血病YZ因子受體(LIFR)ELISA試劑盒
- 大鼠白血病YZ因子受體(LIFR)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 00:01
安裝說明
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大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒
- 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶YZ因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-11 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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