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2024-09-21 23:40 531閱讀次數(shù)

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• 不經(jīng)顯微操作進行體細(xì)胞克隆(徒手克隆)

  不經(jīng)顯微操作進行體細(xì)胞克隆(徒手克隆)[詳細(xì)]

  2024-09-21 23:40

  專利

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• 克隆心得:幫助新手快速做出克隆

  克隆心得:幫助新手快速做出克隆[詳細(xì)]

  2015-12-30 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 植物的克隆

  植物的克隆[詳細(xì)]

  2011-04-14 00:00

  選購指南

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• 分子克隆常用技術(shù)

  分子克隆常用技術(shù)[詳細(xì)]

  2016-01-07 00:00

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• TY-4069阿克隆磨耗機

  TY-4069阿克隆磨耗機[詳細(xì)]

  2014-09-05 00:00

  專利

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• 膠原抗體誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎（CAIA-5克隆合劑）操作流程

  膠原抗體誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎（CAIA-5克隆合劑）操作流程[詳細(xì)]

  2018-10-20 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• BT產(chǎn)品應(yīng)用（22）使用QPix400系統(tǒng)自動篩選顏色克?。喝缂t白克隆篩選

  通過顏色來篩選重組細(xì)菌是一個簡單且GX的方法。比如常用的藍(lán)白克隆篩選，通過B-半乳糖苷酶和X-gal之間的反應(yīng)，通過顏色的變化區(qū)分克隆是否成功插入外源基因。我們QPix400系統(tǒng)通過使用QPix顏色克隆篩選軟件模塊和紅色QPix顏色濾光片成功實現(xiàn)自動化的藍(lán)白克隆篩選，大大增加實驗室重組克隆的篩選效率。通過功能擴展，現(xiàn)在QPix400系統(tǒng)通過QPix顏色克隆篩選軟件模塊和新的藍(lán)色QPix濾光片（Figure1）可以實現(xiàn)紅白克隆的篩選?？梢詰?yīng)用于篩選天然紅色的微生物克隆如酒紅色酵母以及和X-gal反應(yīng)變成紅色的克隆。本文描述了如何使用QPix400系統(tǒng)進行紅白克隆的篩選。[詳細(xì)]

  2024-09-11 17:48

  應(yīng)用文章

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• 巨噬細(xì)胞克隆刺激因子 M-CSF單抗

  應(yīng)用巨噬細(xì)胞克隆刺激因子M-CSF單抗實驗：試驗驗證過適用于Westernblotting實驗、免疫組化實驗（Immunohistochemistry）、ELISA實驗。M-CSF單抗說明書，請打電話詢要。巨噬細(xì)胞克隆刺激因子包裝規(guī)格：0.1ml、0.2mlAnti-M-CSF：鼠源單抗、兔源多抗重要提示：巨噬細(xì)胞克隆刺激因子M-CSF單抗避免重復(fù)凍融，專為科研實驗使用。歡迎打電話咨詢詳情！6600-40-4L-正纈氨酸9075-68-7普魯蘭酶大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白elisa代測,GFAP試劑盒22838-58-0BOC-D-纈氨酸6212-33-5對氯苯甘氨酸9004-54-0葡聚糖T40人衣原體蛋白酶樣活性因子elisa代測,CPAF試劑盒830-96-63-吲哚丙酸人基質(zhì)金屬蛋白酶組織YZ因子1elisa代測,TIMP-1試劑盒119-90-4鄰聯(lián)茴香胺[詳細(xì)]

  2018-11-05 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 美科學(xué)家成功克隆人類胚胎干細(xì)胞

  美科學(xué)家成功克隆人類胚胎干細(xì)胞[詳細(xì)]

  2024-09-17 04:42

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 阿克隆磨耗機技術(shù)條件

  信任達(dá)儀器有限公司是長期從事實驗儀器研制，開發(fā)，生產(chǎn)的企業(yè)。經(jīng)過多年來的研發(fā)，現(xiàn)已開發(fā)適合鞋業(yè)，皮革業(yè)，五金電鍍業(yè)，包裝紙業(yè)，電線電纜業(yè)，自行車業(yè)，金屬塑料業(yè)紡信織等行業(yè)的品管檢測設(shè)備有三百余種。如力學(xué)試驗機，wan能材料試驗機，拉力試驗機，壓力試驗機，環(huán)境試驗機，恒溫恒濕，恒溫恒濕試驗機，恒溫恒濕試驗箱，低溫耐寒實驗機，鹽水噴霧試驗機，鹽霧試驗機，標(biāo)準(zhǔn)光源箱，老化試驗機，耐黃邊試驗機，震動，光學(xué)儀器，投影儀，影像測量儀，檢針機，涂層測厚儀/等。并可定制各種非標(biāo)物性檢測設(shè)備，產(chǎn)品符合STM，JIS，GB，DIN，CNS等多國標(biāo)準(zhǔn)。在產(chǎn)品性價比上力求wan美，以達(dá)到適合不同規(guī)模的企業(yè)選用。并在上海，廣東，北京設(shè)有服務(wù)處。為用戶提供即使周到的售后服務(wù)。本公司國內(nèi)銷售的產(chǎn)品均可出具國家科技，監(jiān)督部門有效鑒定證書。擁有強大的銷售隊伍和經(jīng)營網(wǎng)絡(luò)，海內(nèi)外市場廣闊，企業(yè)綜合實力躋身國內(nèi)同行前列。在全國有很高的聲譽。產(chǎn)品遍布全國。信任達(dá)的目標(biāo)：yi流的產(chǎn)品，yi流的服務(wù)經(jīng)營方針：以產(chǎn)品促市場，以服務(wù)促市場企業(yè)精神：積極進取，勇于開拓創(chuàng)新理念：持續(xù)創(chuàng)新，不斷超越協(xié)作理念：先做朋友再成事業(yè)市場理念：肩負(fù)責(zé)任，大步向前聯(lián)系方式詹任民電話：021-32513188傳真：021-52958755www.shxrd168.comwww.shxrd.com[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:37

  產(chǎn)品樣冊

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• BT產(chǎn)品應(yīng)用（17）使用QPix400系統(tǒng)自動篩選顏色克?。喝缢{(lán)白克隆篩選

  在分子克隆過程中，篩選含有插入基因片段的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化子是一項必不可少的工作。一種稱為“藍(lán)白斑篩選”的顏色報告基因可以根據(jù)克隆顏色快速區(qū)分出重組和非重組的克隆。盡管藍(lán)白篩選提供了一個直觀的辨別重組克隆的方法，但是，在克隆挑取過程中，過多的人工操作過程存在主觀、速度慢、易出錯等問題。 Molecular Devices QPix400系列微生物克隆篩選系統(tǒng)提供了一個自動化的解決方案，尤其針對藍(lán)白克隆篩選，通過白光成像提供了準(zhǔn)確GX的克隆轉(zhuǎn)化檢測方法。這個解決方案整合了QPix Software2.0藍(lán)白篩選模塊、QPix顏色濾片以及可調(diào)平板適配器。[詳細(xì)]

  2021-02-18 17:12

  應(yīng)用文章

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• 細(xì)胞瓊脂克隆斑形成實驗方法

  細(xì)胞瓊脂克隆斑形成實驗方法1.取MDA-435-OL-Sec23a-GFP和MDA-435-OLLV3NC-GFP對數(shù)生長期的細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液,使用血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)后備用。2.使用梯度稀釋法適當(dāng)稀釋細(xì)胞懸液后,向6孔板的每個孔內(nèi)分別加入含50個細(xì)胞的2mL細(xì)胞懸液,細(xì)胞懸液使用含10%FBS的DMEM培養(yǎng)液配制。每種細(xì)胞均設(shè)置3個6孔板復(fù)孔。3.12h后鏡下可觀察到6孔板內(nèi)細(xì)胞已經(jīng)全部貼壁,此時將皿中培養(yǎng)液換成瓊脂濃度為0.2%的含10%FBS的DMEM培養(yǎng)液,置于37°C培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。4.10d后鏡下可觀察到6孔板內(nèi)出現(xiàn)集落生長的細(xì)胞克隆斑。此時棄去含瓊脂的培養(yǎng)液,用PBS輕輕潤洗2次,然后6孔板內(nèi)每孔加入2mL冰甲醇固定30min,固定結(jié)束后使用PBS輕輕潤洗2次,然后使用結(jié)晶紫染色5min,再用PBS輕輕潤洗后室溫干燥。5.干燥完成后將6孔板移至顯微鏡下觀察計數(shù)每個孔內(nèi)細(xì)胞克隆斑數(shù)量,超過50個細(xì)胞的克隆斑即可計數(shù)。根據(jù)細(xì)胞克隆斑形成率=(克隆數(shù)/接種細(xì)胞數(shù))×1**%來計算細(xì)胞體外克隆率。[詳細(xì)]

  2024-10-03 20:15

  產(chǎn)品樣冊

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• PCR分子克隆實驗引物溶解稀釋方法

  PCR分子克隆實驗引物溶解稀釋方法[詳細(xì)]

  2011-11-22 00:00

  操作手冊

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• 美科學(xué)家成功克隆人體胚胎 造人夢想成真

  美科學(xué)家成功克隆人體胚胎造人夢想成真美國加州的科學(xué)家表示已采用2名志愿者的皮膚細(xì)胞，成功克隆出了5個人體胚胎，進而可以開發(fā)出有科學(xué)價值的干細(xì)胞?！　∶绹又莸目茖W(xué)家表示，他們已經(jīng)采用2名志愿者的皮膚細(xì)胞，成功克隆出了5個人體胚胎，進而可以開發(fā)出有科學(xué)價值的干細(xì)胞。不過，有批評家認(rèn)為這是造人夢想變成了現(xiàn)實。此成果發(fā)表在17日出版的《干細(xì)胞》雜志上。　　不過，其他研究人員對美國的這一成果表示懷疑。如果此成果屬實，那么美國加州小組將證明能通過人體成熟細(xì)胞克隆出人來。這些科學(xué)家供職于美國加州的干細(xì)胞代理公司，他們表示，他們用試管嬰兒ZX工作的2名志愿者的皮膚細(xì)胞，克隆出了5個人體胚胎。他們表示，他們艱苦地驗證了可以從這2人體細(xì)胞中克隆出胚胎來。負(fù)責(zé)此項研究的安德魯弗蘭其說：“我們希望它能促進更多的研究?！薄　?jù)悉，他們使用了一種名為SCNT的體細(xì)胞核移植技術(shù)，就是掏空卵細(xì)胞，再在此卵子中注入捐贈者細(xì)胞核，加以復(fù)制。在此案例中，是采用了捐贈者的皮膚細(xì)胞。此同樣技術(shù)也于1996年用在了多莉羊的克隆上，這是從成年體細(xì)胞克隆出的哺乳動物。美國科學(xué)家希望使用此技術(shù)來制造特制的可用于移植的細(xì)胞、組織和器官，并能用此辦法來ZL傷害和疾病。　　科學(xué)家表示，來自克隆胚胎的干細(xì)胞為研究疾病的ZL。藥物的篩選和服用提供有價值的工具，比如糖尿病和帕金森氏癥。[詳細(xì)]

  2018-10-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• FH1210-人胚腎細(xì)胞F-克隆；Expi293F

  FH1210-人胚腎細(xì)胞F-克隆；Expi293F[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

  應(yīng)用文章

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• FH0822-人胚腎細(xì)胞-F克隆； 293F

  FH0822-人胚腎細(xì)胞-F克隆； 293F[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

  應(yīng)用文章

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• FH0534-小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??；L-929

  FH0534-小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克??；L-929[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

  應(yīng)用文章

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• 大鼠粒細(xì)胞克隆刺激因子(G-CSF)檢測試劑盒

  大鼠粒細(xì)胞克隆刺激因子(G-CSF)檢測試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-23 22:02

  報價單

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• 人寡克隆區(qū)帶 （OCB） ELISA 檢測試劑盒

  人寡克隆區(qū)帶(OCB)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗原理：OCB試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知OCB濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將OCB和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中OCB的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：400pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標(biāo)記的抗OCB抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2．實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7．底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9．按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備1．標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：400pg/ml（6號標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。200pg/ml（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml（4號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml（3號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25pg/ml（2號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5pg/ml（1號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（pg/ml）A400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F12.512.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的OCB標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的OCB含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-400pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人 （Human） 寡克隆區(qū)帶 ELISA 檢測試劑盒

  人(Human)寡克隆區(qū)帶(OCB)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗原理：OCB試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知OCB濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進行檢測。先將OCB和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中OCB的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：400pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標(biāo)記的抗OCB抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：400pg/ml（6號標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。200pg/ml（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml（4號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml（3號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25pg/ml（2號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5pg/ml（1號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（pg/ml）A400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F12.512.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的OCB標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的OCB含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-400pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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