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懸浮細(xì)胞的處理方法;奧陸生物

本文由 上海奧陸生物科技有限公司 整理匯編

2024-09-30 17:29 1273閱讀次數(shù)

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上海奧陸生物科技有限公司懸浮細(xì)胞處理方法細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)?*辦法。從細(xì)胞資源ZX獲得細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后,先打開(kāi)外包裝,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作。將細(xì)胞懸液移入離心管,1000rpm/min離心5分鐘。上清培養(yǎng)液移入無(wú)菌瓶中,留待日后培養(yǎng)用。離心下來(lái)的細(xì)胞T25瓶中加培養(yǎng)液6-8ml,混勻后放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。傳代方法:細(xì)胞生長(zhǎng)至1X106/ml時(shí)(一般情況),將細(xì)胞懸液移入離心管800-1000rpm/min離心5分鐘,然后棄上清,加新鮮培養(yǎng)液混勻,1瓶分成3瓶(或6瓶-10瓶),每T25瓶加培養(yǎng)基至6-8ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)該細(xì)胞使用培養(yǎng)基:1、DMEM(高糖)2、R16403、R1640(改良)4、MEM(EBSS)5、MEM(NEAA)6、D/F127、F128、F12K9、MaCcoy‘10、L15血清要求:1、20%FBS2、15%FBS3、10%FBS4、5%FBS5、2.5%FBS6、15%HS7、10%HS8、5%HS9、2.5%HS10、10%CCF(滅活)凍存液:常規(guī)培養(yǎng)液+20%FBS+8%DMSO

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