本文由 上海起發(fā)實驗試劑有限公司 整理匯編

2018-09-29 10:03 2822閱讀次數(shù)

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• 血小板膜糖蛋白（Human GPIIb/IIIa） GP2b3a說明書

  EnzymeResearch，EnzymeResearch介紹,EnzymeResearch代理,EnzymeResearch總代,EnzymeResearch**代理,EnzymeResearchZG代理EnzymeResearch是一家擁有超過25年的酶研究的實驗室，生產(chǎn)和開發(fā)多種用于基本凝血研究的多種酶和輔因子。在過去的十年EnzymeResearchLaboratories為科學家參與止血和血栓形成的研究提供了寶貴支持。EnzymeResearch通過不斷追求產(chǎn)品的Z高品質(zhì)，贏得了世界各地凝血研究實驗室的信任。EnzymeResearchLaboratories為生物技術(shù)公司,制藥行業(yè)、醫(yī)院和大學的研究實驗室提供用于全方位的純化抗凝因子。除了其制造能力，EnzymeResearchLaboratories也創(chuàng)新研發(fā)領(lǐng)域中的血液凝固技術(shù)。HumanGPIIbIIIaGP2b3aHumanGPIIbIIIaPlateletmembraneglycoproteinsareinvolvedinplateletadhesionandaggregation.GlycoproteinsIIbandIIIa（GPIIbandGPIIIa）constitutethefibrinogenreceptorandarerequiredforplateletaggregation.ERLoffersGPIIbIIIapurifiedfromhumanplatelets.GlycoproteinIIbconsistsof2disulfide-linkedsubunitsGPIIb（MW=125,000）andGPII（MW=23,000）whileGPIIIahasonlyonepolypeptidechain（MW=108,000）.GPIIbIIIamigratesongelsasfollows:GPIIb136,000non-reducedand125,000reduced.GPIIIais97,000non-reducedand108,000reduced.ProteinconcentrationisdeterminedviatheBradfordmethod.BufferComposition=20mMTris-HCl/0.1MNaCl/0.1%TritonX-100/1mMCaCl2/0.05%NaN3/50%glycerol/pH7.4*ExtinctionCoefficient（1%）=9.1上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人：楊建輝400電話：4006551678辦公電話：021-50724187傳真：021-50724961*8006手機：15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址：上海市浦東新區(qū)繡川路561號1102室[詳細]

  2018-09-29 10:03

  產(chǎn)品樣冊

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• 人血小板膜糖蛋白（GP IIb/IIIa）ELISA試劑盒說明書

  人血小板膜糖蛋白（GPIIb/IIIa）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人GPIIb/IIIa單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的GPIIb/IIIa與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人GPIIb/IIIa，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，GPIIb/IIIa濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中GPIIb/IIIa濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：4000ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。血清、血漿至少作1：10稀釋（取20ul，加標本稀釋液180ul,稀釋10倍）。2.標準品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成4000ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入4000ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品400、200、100、50、25、12.5、6.25、0ng/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應GPIIb/IIIa含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的GPIIb/IIIa檢測濃度小于3ng/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人GPIIb/IIIa。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 血小板膜糖蛋白說明書試劑盒檢測說明

  血小板膜糖蛋白說明書試劑盒檢測說明本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T0.6ng/ml-20ng/ml使用目的：本試劑盒用于測定人唾液樣本中血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)水平。用純化的人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)，再與HRP標記的血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血小板膜糖蛋白Ⅳ(GPⅣ)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（40ng/ml）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。20ng/ml5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液10ng/ml4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液5ng/ml3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液2.5ng/ml2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液1.25ng/ml1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測樣品10l（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié)：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-10-09 10:00

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• 血小板膜糖蛋白Ⅵ（GP6）ELISA試劑盒說明書

  血小板膜糖蛋白Ⅵ(GP6)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本：體液血小板膜糖蛋白Ⅵ(GP6)ELISA試劑盒說明書試驗原理：BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。血小板膜糖蛋白Ⅵ(GP6)ELISA試劑盒說明書自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。血小板膜糖蛋白Ⅵ(GP6)ELISA試劑盒說明書操作注意事項1．試劑應按標簽儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7．底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9．按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。血小板膜糖蛋白Ⅵ(GP6)ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。血小板膜糖蛋白Ⅵ(GP6)ELISA試劑盒說明書操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。血小板膜糖蛋白Ⅵ(GP6)ELISA試劑盒說明書性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。血小板膜糖蛋白Ⅵ(GP6)ELISA試劑盒說明書結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的BFGF標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍：0-800pg/ml4、敏感度：1.0pg/mlORM人類粘蛋白規(guī)格：48T/96THTLV-Ⅰ人類嗜T淋巴細胞Ⅰ型病毒規(guī)格：48T/96TRF人類風濕因子規(guī)格：48T/96THLA-G人類白細胞抗原G規(guī)格：48T/96THLA-E人類白細胞抗原E規(guī)格：48T/96THLA-C人類白細胞抗原C規(guī)格：48T/96THLA-B27人類白細胞抗原B27規(guī)格：48T/96THLA-A人類白細胞抗原A規(guī)格：48T/96TmTOR人雷帕霉素靶蛋白規(guī)格：48T/96TTH人酪氨酸羥化酶規(guī)格：48T/96TTyk-2人酪氨酸激酶2規(guī)格：48T/96TLAC/LA人狼瘡抗凝抗體規(guī)格：48T/96TLyme-IgG人萊姆IgG規(guī)格：48T/96TVacA人空泡毒素相關(guān)蛋白A規(guī)格：48T/96TPEB1人空腸彎曲菌黏附蛋白規(guī)格：48T/96TCC16人克拉拉細胞蛋白規(guī)格：48T/96TENA人可提取核抗原規(guī)格：48T/96TsTfR人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體規(guī)格：48T/96TsTRAIL人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體規(guī)格：48T/96TsTNF-R2人可溶性腫瘤壞死因子受體2規(guī)格：48T/96TsTNF-R1人可溶性腫瘤壞死因子受體1規(guī)格：48T/96TsTNFαR人可溶性腫瘤壞死因子α受體規(guī)格：48T/96TSam人可溶性粘附分子規(guī)格：48T/96TsPECAM-1人可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1規(guī)格：48T/96T[詳細]

  2018-10-09 10:00

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• 大鼠血小板膜糖蛋白ba(GP-ba/CD41+CD61)ELISA試劑盒

  大鼠血小板膜糖蛋白ba(GP-ba/CD41+CD61)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-10 00:00

  實驗操作

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• 大鼠 （Rat） 血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa （GP-Ⅱb/Ⅲa） ELISA 檢測試劑盒說明書

  大鼠(Rat)血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(GP-Ⅱb/Ⅲa)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本：血清或血漿試驗原理：GP-Ⅱb/Ⅲa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知GP-Ⅱb/Ⅲa濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將GP-Ⅱb/Ⅲa和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中GP-Ⅱb/Ⅲa的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：80ng/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標準品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標記的抗GP-Ⅱb/Ⅲa抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：80ng/ml（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。40ng/ml（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液20ng/ml（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液10ng/ml（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液5.0ng/ml（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液2.5ng/ml（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0ng/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度（ng/ml）A8080樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣