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利用CAT(離心粘結(jié)力測試)技術(shù)定量測定膠帶性能
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本文由 上海珩澤科技有限公司 整理匯編
2024-09-17 20:02 1529閱讀次數(shù)
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利用CAT(離心粘結(jié)力測試)技術(shù)定量測定膠帶性能
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2018-11-18 10:00
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- 本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。人過氧化氫酶(CAT)定量檢測試劑盒(ELISA)使用說明書【試劑盒名稱】人過氧化氫酶(CAT)定量檢測試劑盒(ELISA)【試劑盒用途】定量檢測人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中過氧化氫酶(CAT)的含量?!緳z測原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預(yù)先包被人過氧化氫酶(CAT)多克隆抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中人過氧化氫酶(CAT)濃度呈正相關(guān),450nm波長下測定OD值,根據(jù)標準品和樣品的OD值,計算樣本中人過氧化氫酶(CAT)含量?!驹噭┖薪M成】1酶標包被板12孔×8條7底物夜A6mL2標準品:40ng/ml0.6mL8底物夜B6mL320倍濃縮洗滌液20mL9終止液6mL4標準品稀釋液6mL10說明書1份5樣本稀釋液6mL11封板膜2張6酶標試劑6mL12密封袋1個備注:標準品用標準品稀釋液依次稀釋為:40、20、10、5、2.5、1.25ng/ml【需要而未提供的試劑和器材】1、37℃恒溫箱2、標準規(guī)格酶標儀3、精密移液器及一次性吸頭4、蒸餾水5、一次性試管6、吸水紙【操作步驟】1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先2加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。7、溫育:重復(fù)4的操作。8、洗板:重復(fù)5的操作。9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。Z終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。【樣本要求】1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的YZ劑。2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒。【注意事項】1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。2、酶標包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為1.0-40ng/ml,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結(jié)果(1.0-40ng/ml范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本Z終濃度。6、若顯色過淺,可適當(dāng)延長底物溫育時間。7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。【操作程序總結(jié)】3準備試劑,樣品和標準品加入準備好的樣品和標準品,37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次,加入酶標試劑,37℃反應(yīng)30分鐘洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘之內(nèi)讀OD值計算【檢測范圍】1.0-40ng/ml【規(guī)格】96T/盒【貯藏】2-8℃,避光防潮保存?!居行凇?個月[詳細]
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CZY-G 初粘性測試儀,嚴格按照國標GB/T4852標準設(shè)計。適用于壓敏膠帶、醫(yī)用貼劑、不干膠標簽、保護膜等相關(guān)產(chǎn) 品進行初粘性測試,獨具A斜面滾球法B斜槽滾球法兩種試驗方法,轉(zhuǎn)換方式簡單易行。[詳細]
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- 紫外線對CFRP與混凝土粘結(jié)性能的影響[詳細]
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2018-09-14 10:00
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2011-02-11 00:00
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