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ALZET迷你滲透膠囊MODEL2002說明書中文

本文由 上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司 整理匯編

2024-09-30 16:09 716閱讀次數(shù)

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ALZET迷你滲透膠囊MODEL2002使用Protocol概述:ALZET滲透泵是一種小型、可植入式的膠囊,可應(yīng)用于小鼠、大鼠及其他實(shí)驗(yàn)動物研究。該膠囊無需進(jìn)行外部連接或頻繁處理,就能以恒定的速率持續(xù)給藥一天到四周的時間。LOTN*.10212-08平均泵出速率0.51ul/HR標(biāo)準(zhǔn)差0.02ul/HR平均灌注體積244.6ul標(biāo)準(zhǔn)差6.0ul一、ALZET迷你滲透膠囊MODEL2002基本描述A.性能(37℃)泵送率0.5μl/hr(±0.1μl/hr)持續(xù)時間14天膠囊容量200ulB.組件1.灌注管(fil領(lǐng)tube)2.流量調(diào)節(jié)器(flowmoderator)3.膠囊(pumpbodymaterials)二、ALZET迷你滲透膠囊MODEL2002使用注意點(diǎn)1.ALZET迷你滲透膠囊不可重復(fù)使用2.膠囊必須被溶液充滿,同時需要記錄灌注量3.溶解藥物的溶劑需與膠囊材料相兼容4.在實(shí)驗(yàn)過程中,藥物在溶劑中要保持穩(wěn)定5.藥物的質(zhì)量輸出速率用方程式ko=QCd計(jì)算,ko為藥物質(zhì)量輸出速率g/hr),Q是膠囊中溶液的體積輸出速率(l/hr),Cd為藥物濃度(g/l)6.在對膠囊進(jìn)行灌注,操作以及手術(shù)植入過程中要確保無菌7.如果要想膠囊立刻起作用,或者膠囊中灌注的是粘性溶液,或者如果附加一根導(dǎo)管,那么膠囊需在無菌的37℃生理鹽水中至少孵育4-6小時(**是隔夜)8.如果膠囊使用的環(huán)境與正常的哺乳動物的體溫以及滲透壓顯著不同時,膠囊的泵送率可能會受到影響。9.膠囊在給藥完成后或植入21天內(nèi)需取出,如超時,膠囊附近組織內(nèi)的水分會進(jìn)入膠囊,導(dǎo)致局部組織隆起,并處于高鹽狀態(tài),對機(jī)體組織產(chǎn)生傷害。10.通過與導(dǎo)管連接,ALZET迷你滲透膠囊可向動靜脈循環(huán),大腦,器官,內(nèi)腔等持續(xù)提供藥物。11.在實(shí)驗(yàn)過程中通過監(jiān)測血藥濃度可以驗(yàn)證膠囊實(shí)驗(yàn)的正確性,同時通過查看試驗(yàn)完成后膠囊中藥物的剩余量,以及進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)等也可驗(yàn)證。三、ALZET迷你滲透膠囊灌注方法步驟藥物充滿膠囊很重要,正確的灌注方法下面已經(jīng)給出。膠囊中有氣泡或者不能正確將流量調(diào)節(jié)器插入膠囊將會導(dǎo)致不可預(yù)測的藥物泵送率波動。在灌注和植入過程中應(yīng)戴手套;另外大量的油脂如果在皮膚表面聚積,可能會影響膠囊性能;如果膠囊被污染了,應(yīng)用70%的異丙醇擦拭,切忌不能用異丙醇浸泡;注意要在常溫下灌注藥物。STEP1:稱量空膠囊以及它的流量調(diào)節(jié)器(總重)STEP2:利用27式灌裝管以及1ml的注射器灌裝膠囊。若使用較大注射器,由于灌裝速度過快,可能會在膠囊中產(chǎn)生氣泡。用注射器抽取藥物溶液,裝上灌裝管。需要注意的是注射器和與其連接的灌裝管之間不能有氣泡。STEP3:拔掉流量調(diào)節(jié)器,將膠囊直立,從膠囊頂部的小開口插入灌流管,直到不能再插入為止。此時灌流管的接近膠囊的底部。STEP4:保持膠囊直立,緩慢推注射器的活塞。當(dāng)藥物溶液到達(dá)膠囊頂部小開口處停止灌注,小心移去灌注管(速度快了可能會產(chǎn)生氣泡)。STEP5:擦掉溢出的藥物溶液,插入流量調(diào)節(jié)器直到白色帽子到達(dá)膠囊頂部為止。插入的流量調(diào)節(jié)器將會取代部分已經(jīng)灌注到膠囊中的藥物溶液,溢出的溶液需要擦干凈。確保該裝置正常運(yùn)行,需要將流量調(diào)節(jié)器全部插進(jìn)膠囊中。STEP6:稱量灌滿后的膠囊(連同流量調(diào)節(jié)器),步驟6和步驟1的差值為灌注的藥物溶液的凈重。對于大多數(shù)稀釋的水溶液,重量(mg)=體積(ul)。灌注的體積應(yīng)該大于平均灌注體積(MeanFillVolume)的90%,即244.6*0.9=220.41。如果是這樣的話,灌裝后的膠囊就可以使用了,如果不滿足以上條件,說明膠囊中含有氣泡,不能使用。如果在灌注過程中阻力較大,可在灌注過程中將灌注管小角度翹起,灌注的小孔可通過來回移動灌注管而擴(kuò)大,或者在插入灌注管之前多次插入及拔出流量調(diào)節(jié)器以達(dá)到擴(kuò)大灌注孔的目的。四、藥物溶液如何配制及與膠囊的兼容性膠囊與水,稀釋的酸,堿溶液以及與稀釋的或低濃度的DMSO,酒精兼容,也與1**%丙烯和聚乙二醇兼容。ALZET膠囊與脂肪族,芳香烴類化合物不兼容,例如庚烷,甲苯,動植物油脂。使用不兼容的溶劑可能導(dǎo)致膠囊喪失功能。下表提供了一些與膠囊兼容的常用的已知溶劑。注意,以上溶劑只是與膠囊材料相兼容,實(shí)際操作過程中,還要注意是否與組織或體液兼容。溶液在膠囊中產(chǎn)生氣泡可能會影響藥物的泵送率,溶液中如果含有一些沉淀的不溶顆粒時需要過濾后使用,ALZET泵能夠泵出均質(zhì)的粘性溶液(粘度小于100000厘泊),懸浮液如果不沉淀也能被泵出。為了確保泵出速率的一致性,在持續(xù)泵出過程中懸浮液需保持均質(zhì)。五、ALZET滲透膠囊體內(nèi)植入手術(shù)ALZET滲透膠囊可被植入動物皮下,動物重至少20g。首先在肩胛骨間的皮膚處切一小口,然后用止血鉗將皮膚和皮下結(jié)締組織分開,形成一個小的袋。將膠囊插入,流量調(diào)節(jié)器朝里,皮膚開口可縫合或者用夾子夾住。LZET滲透膠囊可被植入動物腹部,動物重至少150g。首先在動物胸腔下面皮膚開一個中線小口,然后在皮膚下的腹部肌肉處開一個小口,將膠囊流量調(diào)節(jié)器朝內(nèi)插入腹部。肌肉開口用線縫合,皮膚開口可用線縫合也可用夾子夾住。六、ALZET滲透膠囊的檢測ALZET是精密的給藥工具,泵送率和灌注體積已經(jīng)給出,膠囊在4-6小時的啟動時間后,給藥速率趨于恒定,直到剩余5%的藥物時,泵送率迅速下降,直到0為止。DURECT方法是在37℃(+-0.5℃)下,0.9%的生理鹽水中離體測量泵送率,這種方法具有較好的可重復(fù)性。A.離體質(zhì)量檢測選取20個相同型號膠囊作為隨機(jī)樣本,膠囊中充滿染液。充滿后,膠囊浸沒在0.9%的生理鹽水(37℃)中,每隔一定時間將膠囊轉(zhuǎn)移到含有新鮮生理鹽水的試管中,直到第14天,對膠囊中泵出染料進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)分析。在4-336h過程中,每個膠囊都以恒定速率泵出染料。通過DURECT實(shí)驗(yàn),每個膠囊的時間依賴泵送率變量系數(shù)小于10%,均值的標(biāo)準(zhǔn)誤為5%。B.啟動時間如果膠囊在室溫下灌注,浸沒到等滲的生理鹽水(37℃),泵送率在幾小時內(nèi)不會達(dá)到穩(wěn)定。如果實(shí)驗(yàn)要求立即給藥,DURECT建議將未灌注藥物的膠囊浸沒在0.9%的生理鹽水中4-6小時(**隔夜37℃),如果與導(dǎo)管相連或者灌注粘性藥物時,以上步驟必須進(jìn)行。C.藥物持續(xù)泵送的驗(yàn)證藥物持續(xù)泵送可通過方程D=(V/Q)(.95)驗(yàn)證,D是持續(xù)時間,V是規(guī)格書中給出的膠囊泵送容量體積(ul),Q是泵送率(ul/hr)。七、驗(yàn)證ALZET滲透膠囊的準(zhǔn)確性為了驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否來自持續(xù)給藥,DURECT建議ALZET膠囊使用者在實(shí)驗(yàn)過程中的幾個時間點(diǎn)檢測血液藥物水平。注意不能將Z后膠囊中剩余空間作為泵出的藥物量,因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)過程中,膠囊會吸收水分,同樣,切開一個用完的膠囊來驗(yàn)證其性能也是不可靠的。A.確定平均泵送率ALZET迷你滲透膠囊的容量體積稍微大于14天泵出的溶液量。Z后,會有一些藥物溶液殘留在膠囊內(nèi),可用灌注管和1ml的注射器吸走。用額外的溶劑沖洗膠囊,對剩余藥物溶液進(jìn)行分析,算出殘余藥物量。平均泵送率=(起始藥物量-殘余藥物量)/運(yùn)行時間。B.確定離體實(shí)驗(yàn)泵送率ALZET迷你滲透膠囊給出的體積泵送率是在等滲的生理鹽水(37℃)中測定的,用戶發(fā)現(xiàn)檢測泵送率是必需的。DURECT給出了以下步驟:Step1:準(zhǔn)備一種能溶于生理鹽水的已知濃度溶液作為指示劑。泵出的指示劑的量作為計(jì)算泵送率的基礎(chǔ)。指示劑必需與膠囊相兼容,同時還容易在等滲的生理鹽水中進(jìn)行分析。Step2:根據(jù)第三部分的方法將指示劑溶液灌注到膠囊中。Step3:將膠囊放進(jìn)一只裝有15ml等滲生理鹽水的20ml試管中,在37℃中進(jìn)行預(yù)孵育,用塞子塞住試管,以防蒸發(fā)。

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