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大鼠去甲腎上腺素(NA)ELISA試劑盒
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2018-09-13 10:00 323閱讀次數(shù)
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大鼠去甲腎上腺素(NA)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠NA(Norepinephrine,Noradrenaline)單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的NA與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠NA,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,NA濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中NA濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):1280ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成2560ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入2560ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品256、128、64、32、16、8、4、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應NA含量即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的NA檢測濃度小于2ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠NA。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷!
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大鼠去甲腎上腺素(NA)ELISA試劑盒
- 大鼠去甲腎上腺素(NA)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠NA(Norepinephrine,Noradrenaline)單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的NA與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠NA,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,NA濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中NA濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):1280ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成2560ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入2560ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品256、128、64、32、16、8、4、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應NA含量即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的NA檢測濃度小于2ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠NA。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
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- 試驗原理:NA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知NA濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將NA和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中NA的濃度呈比例關系。試劑盒內容及其配制自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1.標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:1600pg/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。800pg/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液400pg/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液200pg/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液100pg/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液50pg/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pg/ml(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度(pg/ml)A16001600樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。結果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的NA標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的NA含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-1600pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[詳細]
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大鼠間羥去甲腎上腺素(NMN)ELISA試劑盒使用說明書
- 南京森貝伽現(xiàn)貨供應,質量保證,價格優(yōu)惠,試劑盒森貝伽。本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關液體樣本中間羥去甲腎上腺素(NMN)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠間羥去甲腎上腺素(NMN)水平。用純化的大鼠間羥去甲腎上腺素(NMN)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入間羥去甲腎上腺素(NMN),再與HRP標記的間羥去甲腎上腺素(NMN)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的間羥去甲腎上腺素(NMN)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠間羥去甲腎上腺素(NMN)含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:540pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為360pg/mL,240pg/mL,120pg/mL,60pg/mL,30pg/mL)。加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍:12pg/mL-500pg/mL保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-07 14:16
產品樣冊
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大鼠去甲腎上腺素檢測試劑盒注意事項說明
- 大鼠去甲腎上腺素檢測試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。大鼠去甲腎上腺素檢測試劑盒標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。[詳細]
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2018-12-30 10:00
產品樣冊
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豬去甲腎上腺素(NE)ELISA試劑盒
- 豬去甲腎上腺素(NE)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 11:01
實驗操作
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豬去甲腎上腺素(NE)ELISA檢測試劑盒
- 豬去甲腎上腺素(NE)ELISA檢測試劑盒[詳細]
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2015-06-12 00:00
實驗操作
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人去甲腎上腺素(NE)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人去甲腎上腺素(NE)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和唾液等其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人NE單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的NE與單抗結合,加入生物素化的抗人NE,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,NE濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中NE濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、唾液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清用標本稀釋液作1:10稀釋(取20ul,加標本稀釋液180ul,稀釋10倍)。唾液不作稀釋,直接檢測。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應NE含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的NE檢測濃度小于31pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人NE。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產品樣冊
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人重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)ELISA試劑盒
- 人重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-17 19:14
其它
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去甲腎上腺素ELISA Kit使用說明書
- Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4去甲腎上腺素ELISAKit使用說明書(德國IBL:RE59261)1、應用范圍此試劑盒可用于人血清和尿液中去甲腎上腺素的體外定量檢測。2、臨床意義兒茶酚胺類激素腎上腺素、去甲腎上腺素和多巴胺主要由腎上腺髓質、交感神經系統(tǒng)和大腦產生。它們幾乎影響所有的組織,并與其它激素和神經系統(tǒng)一起參與各種生理過程的調節(jié)。在許多疾病中,兒茶酚胺激素及其代謝產物變腎上腺素和去甲變腎上腺素的分泌量都會增加,因而這些激素可用于疾病的診斷。所以,這些激素的檢測對于疾病的診斷及神經系統(tǒng)腫瘤疾病的具有重要意義。它主要用于嗜鉻細胞瘤的診斷,當然也用于成神經細胞瘤和神經節(jié)細胞瘤的診斷。因為在實驗一開始時有提取步驟,用戶可使用各種動物材料進行實驗。所有動物的兒茶酚胺的化學結構相同,因此此試劑盒可用于測大鼠、小鼠或其它動物。3、實驗原理此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態(tài)抗體可以結合到抗原分子的一個抗原決定簇上,而抗原分子可在溫育期內結合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標二抗一起在微孔內溫育,此酶標二抗可結合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后,溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結果可直接從標準曲線上讀取。4、貯存與穩(wěn)定性試劑盒和運輸環(huán)境和儲存環(huán)境溫度為2-8℃,避免熱源或太陽直射。樣品的儲存與穩(wěn)定性及試劑的準備將在相關章節(jié)中闡述。開封的試劑盒在有效期內穩(wěn)定,前提是將試劑盒用袋子密封并儲存于2-8℃的環(huán)境下。5、樣品的采集與儲存注意人體內的兒茶酚氨和間甲腎上腺素的釋放會受到一些食品和藥物的影響。因此在樣品采集前72小時內病人應禁止服用下列食物和藥品:維生素B,咖啡,香蕉,α甲基多巴,MAO,COMTYZ劑,還有降血壓類藥物。血漿(EDTA)注意血液采集后兩小時內,將血液樣品冷藏于2-8℃的環(huán)境下直致離心獲取血漿。注意靜脈穿刺采集全血的常規(guī)注意事項。從采集到血液樣品的那一刻起到檢測時都應保持血液樣品的化學整體性。不要使用明顯溶血、黃疸的和脂血樣品。如果樣品出現(xiàn)混濁,則在實驗前應當離心以除去所有的微粒物質。貯存2-8℃≤-20℃避免熱源或太陽直射,避免反復凍融,冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6h1個月尿液可以是自然尿液也可使用24h尿液。將病人24h內的所有尿液都收集到,并混合于含10-15ml6N的HCl防腐劑的試劑瓶中。貯存≤-20℃避免熱源或太陽直射,避免反復凍融,冷凍狀態(tài)下運輸樣品。穩(wěn)定性6個月6、試劑盒成分注意:試劑盒有足夠做96份單孔檢測或48份雙孔檢測所需的試劑成分數(shù)量標志成分1×12×8MTP包被板,可拆,微孔中包被了抗兔IgG(羊,單克隆)。1×6×2.5mlCALA-F標準品A-F,即用腎上腺素:0;1.5;15;50;150ng/ml(0;8;27;82;273;819nmol/L)去甲腎上素:0;5;15;50;150;500ng/mL(0;30;89;296;887;2955nmol/L)多巴胺:0;12;35;115;450;2250ng/mL(0;78;228;750;2938;14688nmol/L)內含[-]腎上腺素,[-]去甲腎上腺素,[-]多巴胺(有生物活性),0.1M的HCl1×2×2.5mlCONTROL1+2質控品1+2即用,含:[-]腎上腺素,[-]去甲腎上腺素,[-]多巴胺(具有生物活性),0.1M的HCl,具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽.1×250μLENZCONJCONC酶聯(lián)物濃縮型(100×)內含:堿性磷酸酶標記的抗體,Tris緩沖液,HCl,0.01%的NaN32×EXTRPLATE提取板(微孔板)每板24孔,包被了硼酸親和凝膠。1×60mlEXTRBUF提取緩沖液粉紅色,即用,內含:0.016%的NaN32×1.25mlCOMTLYOCOMT凍干粉內含:兒茶酚-氧位-甲基轉移酶(豬肝),NaN31×2mlCOMTADDCOMT添加劑內含:人血漿,穩(wěn)定劑,0.01%硫柳汞。1×7mlANTISERUMDO去甲腎上腺素抗血清紫羅蘭色,即用,內含:抗去甲腎上腺素抗體(兔),緩沖液,穩(wěn)定劑。2×1.25mlCOENZ酶聯(lián)復合物即用,內含:S-腺苷-L-蛋白酸,穩(wěn)定劑。1×3mlENZBUF酶緩沖液即用,內含:Tris緩沖液,HCl,穩(wěn)定劑。1×17mlRELEASEBUFRelease緩沖液黃色,即用,內含:0.1M的HCl,指示劑。1×3mlACYLREAG?;噭┘从茫瑑群憾谆柞0?,乙醇。注意:有毒,高可燃性。1×50mlWASHBURCONC洗滌液濃縮型(10×)內含:Tris緩沖液,HCl,吐溫,0.2%的NaN31×9×PNPPSUBSPNPP底物片內含:對硝基苯磷酸(PNPP)1×27mlPNPPBUFPNPP底物緩沖液即用,內含:二乙醇胺,水,0.05%的NaN31×15mlPNPPSTOPPNPP終止液即用,內含:1M的NaOH,0.25M的EDTA3×FOIL粘性金屬板7、實驗所需器材(但試劑盒不提供)1)移液器(10;10-100;100-1000μL)2)軌道搖床(200-900rpm)3)旋渦混合器4)帶儲器的8通道移液器5)洗滌瓶,自動或半自動包被板清洗系統(tǒng)6)酶標儀7)雙蒸水或去離子水8)吸水紙,取樣吸頭,計時器8、實驗前說明注意用于96人份檢測色試劑盒成分可分成兩次進行。,下列所述體積為做48人份時所需要的量。8.1樣品的稀釋如果樣品中去甲腎上腺素濃度高于Z高標準品的應按照下列所述進行稀釋:樣品待稀釋稀釋液備注血漿去甲腎上腺素濃度高于Z高標準品中去甲腎上腺素的濃度雙蒸水提取步驟前尿液去甲腎上腺素濃度高于Z高標準品中去甲腎上腺素的濃度0.1N的HCl提取步驟前8.2樣品、標準品和質控品的提?。ㄌ崛“?,手動操作版)1)將標準品、已稀釋好的質控品、已稀釋好的尿液樣品各20μL和500μL血漿樣品加入到提取板相應的微孔中。除血漿樣品孔外,在所有的微孔中加入500μL雙蒸水以消除體積差別。2)在每一微孔中加入1000μL提取緩沖液3)蓋板。在軌道搖床(600-900rpm)上18-25℃的環(huán)境下提取30min。在提取過程中,液體的表面應該會浸濕粘性金屬板,但液體的量不能超過微孔的2/3。液體是否濺出并不會影響實驗結果。4)移去粘性金屬板,快速棄取孔內反應液,在吸水紙上拍干。5)每孔加入2ml雙蒸水6)用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上(600-900rpm)18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結果。7)移去粘性金屬板,快速棄取孔內反應液,在吸水紙上拍干。8)每孔加入150μL提取緩沖液,再向每孔中加入50μL酰化試劑,立即混合均勻。9)在軌道搖床(400-600rpm)上18-25℃的環(huán)境下提取20min。(無需蓋板)10)快速棄取孔內反應液,在吸水紙上拍干。11)每孔加入2ml雙蒸水。12)用新的粘性金屬板蓋板。在軌道搖床上(600-900rpm)18-25℃的環(huán)境下振蕩5min。液體是否濺出并不會影響實驗結果。13)移去粘性金屬板,快速棄取孔內反應液,在吸水紙上拍干。14)每孔加入300μLRelease緩沖液。15)在軌道搖床(400-500rpm)上18-25℃的環(huán)境下振蕩30min。(無需蓋板)已準備好的樣品應當在當天就進行檢測。如果不行的話,您可將提取板用粘性金屬板蓋好,在2-8℃的環(huán)境下可存放一夜。9、實驗步驟9.1COMT酶溶液的準備注意:COMT酶溶液應在使用前直接臨時配置。在COMT凍干粉中加入1.25ml雙蒸水,充分混和。再加入1.25ml酶聯(lián)溶液,然后再加入1.25ml酶溶液和0.40mlCOMT添加劑以充分混合溶解的COMT試劑*,COMT酶溶液Z后的體積為每支4.15ml。一支可做48人份。溶液可用旋渦混合器混合,但要避免氣泡產生,配置好的COMT溶液可在室溫下穩(wěn)定存放1小時。*如果只需要一定量的COMT溶液,則剩余的COMT溶液應立即凍存于-20℃的環(huán)境下。COMT溶液可在此環(huán)境下穩(wěn)定存放1-2個月。9.2樣品、標準品和質控品的酶分化注意如果要檢測腎上腺素和去甲腎上腺素,我們建議您先檢測腎上腺素。如果使用自動置換型衣液器加樣,請將取樣吸頭內的殘余液體加入到提取板的相應微孔內,否則剩余的提取液不夠去甲腎上腺素檢測用。將提取板放到有一定坡度的位置上。實驗開始前,確定好腎上腺素和去甲腎上腺素的檢測孔并標記好。9.3尿液與血漿中的去甲腎上腺素1在每一微孔內加入25ul臨時配制的COMT酶溶液,輕輕振板以使溶液混合均勻。2將提取好的標準品、質控品和樣品分別25ul加入到相應的微孔內。在此步驟中,我們可以將取樣吸頭直接深入到COMT溶液里。加樣后,溶液顏色變成粉色,輕輕振板以使溶液混合均勻。3向每一微孔中加入50ul去甲腎上腺素抗血清(藍色)。4蓋板,在軌道搖床上(400-600rpm)18-25℃的環(huán)境下孵育120min。8.4凍干粉或濃縮成分的準備稀釋成分稀釋液比例備注貯存穩(wěn)定性20ml洗滌液180ml雙蒸水1:10充分混合2-8℃4W60μL酶聯(lián)物6ml洗滌緩沖液(已稀釋好)1:101臨時配置,僅能使用一次,混合時避免氣泡產生18-25℃30min4PNPP底物片10.7mlPNPP底物緩沖液臨時配置,僅能使用一次18-25℃10min9.5ELISA實驗步驟1)移去粘性金屬板,棄取孔內反應液,每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干以除去殘余液體。2)在每一微孔中加入100ul臨時配置好的酶聯(lián)物。3)蓋板,在軌道搖床上(400-600rpm)18-25℃的環(huán)境下孵育60min。4)移去粘性金屬板,棄取孔內反應液,每孔用250-300ul稀釋好的洗滌液洗板4次。Z后在吸水紙上拍干一除去殘余液體。5)如果可以的話,使用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液的時間間隔應當相同,使用自動置換型移液器并避免氣泡產生。6)在每一微孔中加入200ul底物液。7)不要蓋板,在軌道搖床上(400-600rpm)18-25℃的環(huán)境下孵育60min。8)在每一微孔內加入50ulPNPP終止液以終止酶反應。輕輕振板以使溶液混合均勻。9)加終止液后60min內405nm處讀取OD值。10、期望值實驗結果不能當作判斷任何ZL結果的**因素,疾病的判斷還應當與其它臨床觀察和診斷檢測相結合。以下結果為正常人群的正常值(5%-95%),建議每個實驗室讀確定自己的正常值范圍:尿液血漿μg/dnmol/dpg/mLnmol/L去甲腎上腺素<90<535<600<3.55本譯文僅供參考,詳情請以原文為準。ZGdu家總代理:深圳市科潤達生物工程有限公司辦公地址:深圳市蛇口工業(yè)區(qū)太子路18號海景廣場11C研發(fā)基地:深圳市蛇口沿山路10號6層電話:0755-26814430,26680196郵政編碼:518067免費電話:800-8306296傳真:0755-26814431[詳細]
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2018-11-14 10:00
產品樣冊
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小鼠去甲腎上腺素試劑盒檢測方法
- 小鼠去甲腎上腺素(NE)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒GenericName:MouseNoradrenaline(NE)ELISAKit.實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠去甲腎上腺素(NE)水平。用純化的小鼠去甲腎上腺素(NE)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入去甲腎上腺素(NE),再與HRP標記的去甲腎上腺素(NE)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的去甲腎上腺素(NE)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠去甲腎上腺素(NE)濃度。試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.92以上。2.批內與批見應分別小于9%和15%檢測范圍:請查看附件說明書[詳細]
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2018-11-15 10:00
產品樣冊
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人N-乙酰3-甲氧基去甲腎上腺素elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.7ng/L-20ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中N-乙酰3-甲氧基去甲腎上腺素(NAN)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人N-乙酰3-甲氧基去甲腎上腺素(NAN)水平。用純化的人N-乙酰3-甲氧基去甲腎上腺素(NAN)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入N-乙酰3-甲氧基去甲腎上腺素(NAN),再與HRP標記的N-乙酰3-甲氧基去甲腎上腺素(NAN)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的N-乙酰3-甲氧基去甲腎上腺素(NAN)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人N-乙酰3-甲氧基去甲腎上腺素(NAN)濃度。[詳細]
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2018-12-30 10:00
產品樣冊
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大鼠神經生長因子-beta(b-NGF)ELISA試劑盒-大鼠ELISA試劑盒
- 大鼠神經生長因子-beta(b-NGF)ELISA試劑盒-大鼠ELISA試劑盒中文名稱:大鼠神經生長因子-beta(b-NGF)ELISA試劑盒ELISA試劑盒價格:歡迎來電咨詢報價及索取詳細說明書規(guī)格:96T/48T庫存:現(xiàn)貨保質期:6個月用途:科研實驗等領域科學研究標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等注:標本必須為液體,不含沉淀?!驹噭┖袠颖疽蟆?、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的YZ劑。2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。3、樣本應充分離心,不得有溶血及顆粒?!咀⒁馐马棥?、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。2、酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經稀釋5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為12.5-400ng/L,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果(12.5-400ng/L范圍內),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本Z終濃度。6、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間。7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復使用封板膜。8、試劑盒保質期內使用,不同批號的試劑不得混用。9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。[詳細]
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2018-09-27 10:00
產品樣冊
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重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)檢測試劑盒
- 重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)檢測試劑盒[詳細]
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2015-05-27 00:00
課件
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大鼠c-fos ELISA試劑盒
- 大鼠c-fos ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-09 00:00
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