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豚鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa檢測試劑盒說明書
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本文由 上海心語生物科技有限公司 整理匯編
2019-01-02 10:00 622閱讀次數(shù)
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實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中豚鼠免疫球蛋白E(IgE)水平。用純化的豚鼠免疫球蛋白E(IgE)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E(IgE),再與HRP標記的免疫球蛋白E(IgE)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豚鼠免疫球蛋白E(IgE)濃度。豚鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa檢測試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(240μg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。豚鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa檢測試劑盒操作步驟標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。120μg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液60μg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液30μg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液15μg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液7.5μg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。豚鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa檢測試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月
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豚鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa檢測試劑盒說明書
- 實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中豚鼠免疫球蛋白E(IgE)水平。用純化的豚鼠免疫球蛋白E(IgE)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E(IgE),再與HRP標記的免疫球蛋白E(IgE)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豚鼠免疫球蛋白E(IgE)濃度。豚鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa檢測試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(240μg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。豚鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa檢測試劑盒操作步驟標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。120μg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液60μg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液30μg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液15μg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液7.5μg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。豚鼠免疫球蛋白E(IgE)elisa檢測試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2019-01-02 10:00
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大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA檢測試劑盒
- www.biokanu.com本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被大鼠免疫球蛋白E(IgE)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠免疫球蛋白E(IgE)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3.細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品酶標儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱操作注意事項試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。標準品稀釋液即可視為陰性對照或者空白;預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品(24μg/mL)0.6mL0.6mL按說明書進行稀釋標準品稀釋液6mL3mL無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無注:標準品用標準品稀釋液依次稀釋為:24、12、6、3、1.5、0.75μg/mL試劑的準備20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。結(jié)果判斷繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應(yīng)OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。試劑盒性能1.準確性:標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。2.靈敏度:Zdi檢測濃度小于0.1μg/mL。3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。5.貯藏:2-8℃,避光防潮保存。6.有效期:6個月免責(zé)聲明1.試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責(zé)。2.嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒說明書
- 人免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人IgE單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的IgE與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人IgE,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,IgE濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中IgE濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清至少作1:100稀釋(取10ul,加標本稀釋液990ul,稀釋100倍)。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成80ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入80ng/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)IgE含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的IgE檢測濃度小于0.3ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人IgE。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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ELISA檢測試劑盒使用說明書,小鼠免疫球蛋白E(IgE)
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小鼠(Mouse)免疫球蛋白E(IgE)ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被免疫球蛋白E(IgE)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3.細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品1.酶標儀(450nm)2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒溫箱操作注意事項1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。3.濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,Z終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。5.所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、0.75、1.5、3、6、12μg/mL試劑的準備20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法1.手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。2.自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;3.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。結(jié)果判斷繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應(yīng)OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。試劑盒性能1.準確性:標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。2.靈敏度:Zdi檢測濃度小于0.1μg/mL。3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。5.貯藏:2-8℃,避光防潮保存。6.有效期:6個月免責(zé)聲明1.試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責(zé)。2.嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。FORFORRESEARCHUSEONLY.NOTFORUSEINDIAGNOSTICPROCEDURES.MouseImmunoglobulinE(IgE)ELISAKitinstructionIntendeduseThisIgEELISAkitisintendedLaboratoryforResearchuseonlyandisnotforuseindiagnosticortherapeuticprocedures.TheStopSolutionchangesthecolorfrombluetoyellowandtheintensityofthecolorismeasuredat450nmusingaspectrophotometer.InordertomeasuretheconcentrationofIgEinthesample,thisIgEELISAKitincludesasetofcalibrationstandards.ThecalibrationstandardsareassayedatthesametimeasthesamplesandallowtheoperatortoproduceastandardcurveofOpticalDensityversusIgEconcentration.TheconcentrationofIgEinthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.SamplecollectionandstoragesSerum-Useaserumseparatortubeandallowsamplestoclotfor30minutesbeforecentrifugationfor10minutesatapproximately3000×g.Removeserumandassayimmediatelyoraliquotandstoresamplesat-20℃or-80℃.Avoidrepeatedfreeze-thawcyclesPlasma-CollectplasmausingEDTAorheparinasananticoagulant.Centrifugesamplesfor30minutesat3000×gat2-8℃within30minutesofcollection.Storesamplesat-20℃or-80℃.Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.Cellculturesupernatesandotherbiologicalfluids-Removeparticulatesbycentrifugationandassayimmediatelyoraliquotandstoresamplesat-20℃or-80℃.Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.Note:Thesamples首lebecentrifugateddequatelyandnohemolysisorgranulewasallowed.Materialsrequiredbutnotsupplied1.Standardmicroplatereader(450nm)2.PrecisionpipettesandDisposablepipettetips.3.37℃incubatorPrecautions1.Donotsubstitutereagentsfromonekittoanother.Standard,conjugateandmicroplatesarematchedforoptimalperformance.Useonlythereagentssuppliedbymanufacturer.2.Donotremovemicroplatefromthestoragebaguntilneeded.Unusedstrips首ldbestoredat2-8°Cintheirpouchwiththedesiccantprovided.3.Mixallreagentsbeforeusing.Removeallkitreagentsfromrefrigeratorandallowthemtoreachroomtemperature(20-25°C)MaterialssuppliedName96determinations48determinationsMicroelisastripplate12*8strips12*4stripsStandard0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSampleDiluent6.0ml3.0mlHRP-Conjugatereagent10.0ml5.0ml20XWashsolution25ml15mlChromogenSolutionA6.0ml3.0mlChromogenSolutionB6.0ml3.0mlStopSolution6.0ml3.0mlClosureplatemembrane22Usermanual11Sealedbags11Note:Standard(S0→S5)concentrationwasfollowedby:0,0.75,1.5,3,6,12μg/ml.Reagentpreparation20×washsolution:DilutewithDistilledordeionizedwater1:20.Assayprocedure1.Prepareallreagentsbeforestartingassayprocedure.ItisrecommendedthatallStandardsandSamplesbeaddedinduplicatetotheMicroelisaStripplate.2.Addstandard:SetStandardwells,testingsamplewells.Addstandard50μltostandardwell.3.AddSample:Addtestingsample10μlthenaddSampleDiluent40μltotestingsamplewell;Blankwelldoesn’taddanyting.4.Add100μlofHRP-conjugatereagenttoeachwell,coverwithanadhesivestripandincubatefor60minutesat37°C.5.Aspirateeachwellandwash,repeatingtheprocessfourtimesforatotaloffivewashes.Washbyfil領(lǐng)eachwellwithWashSolution(400μl)usingasquirtbottle,manifolddispenserorautowasher.Completeremovalofliquidateachstepisessentialtogoodperformance.Afterthelastwash,removeanyremainingWashSolutionbyaspiratingordecanting.Inverttheplateandblotitagainstcleanpapertowels.6.AddchromogensolutionA50μlandchromogensolutionB50μltoeachwell.Gentlymixandincubatefor15minutesat37°C.Protectfromlight.7.Add50μlStopSolutiontoeachwell.Thecolorinthewells首ldchangefrombluetoyellow.Ifthecolorinthewellsisgreenorthecolorchangedoesnotappearuniform,gentlytaptheplatetoensurethoroughmixing.8.ReadtheOpticalDensity(O.D.)at450nmusingamicrotiterplatereaderwithin15minutes.Calculationofresults1.Thisstandardcurveisusedtodeterminetheamountinanunknownsample.ThestandardcurveisgeneratedbyplottingtheaverageO.D.(450nm)obtainedforeachofthesixstandardconcentrationsonthevertical(Y)axisversusthecorrespondingconcentrationonthehorizontal(X)axis.2.First,calculatethemeanO.D.valueforeachstandardandsample.AllO.D.values,aresubtractedbythemeanvalueofthezerostandardbeforeresultinterpretation.Constructthestandardcurveusinggraphpaperorstatisticalsoftware.3.Todeterminetheamountineachsample,firstlocatetheO.D.valueontheY-axisandextendahorizontallinetothestandardcurve.Atthepointofintersection,drawaverticallinetotheX-axisandreadthecorrespondingconcentration.4.Anyvariationinoperator,pipettingandwashingtechnique,incubationtimeortemperature,andkitagecancausevariationinresult.Eachuser首ldobtaintheirownstandardcurve.5.Thesensitivitybythisassayis0.1μg/ml6.StandardcurveStorage:2-8℃.validity:sixmonths.FORRESEARCHUSEONLY;NOTFORTHERAPEUTICORDIAGNOSTICAPPLICATIONS!PLEASEREADTHROUGHENTIREPROCEDUREBEFOREBEGINNING![詳細]
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2018-11-15 10:00
產(chǎn)品樣冊
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豬免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
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2013-12-12 00:00
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大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
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2013-12-11 00:00
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雞免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
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2013-12-13 00:00
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大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠IgE單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的IgE與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠IgE,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,IgE濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中IgE濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):250ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。所有標本測定前用標本稀釋液至少作1:20稀釋(取10ul,加標本稀釋液190ul,稀釋20倍)。2.標準品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成500ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,每管加入標本稀釋液200ul。在**管中加入500ng/ml的標準品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、3.9、0ng/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)IgE含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的IgE檢測濃度小于2ng/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠IgE。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.6%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
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2024-09-20 13:35
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2024-09-18 18:09
其它
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小鼠免疫球蛋白E(IgE)說明書
- 小鼠免疫球蛋白E(IgE)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T100-2000ng/ml使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清樣本中免疫球蛋白E(IgE)含量。實驗原理實驗原理實驗原理實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標本中小鼠免疫球蛋白E(IgE)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E(IgE),再與HRP標記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠免疫球蛋白E(IgE)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(4000ng/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本標本標本標本要求要求要求要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟操作步驟操作步驟操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2000ng/ml5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液1000ng/ml4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液500ng/ml3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液250ng/ml2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液125ng/ml1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期保存條件及有效期保存條件及有效期保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月上海恒遠生物科技有限公司主營產(chǎn)品/服務(wù):ELISA試劑盒,免疫組化試劑盒,放免試劑盒,標準品,血清,抗體,培養(yǎng)基,生物試劑,基準試劑!ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。歡迎廣大客戶來電來函![詳細]
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2018-11-15 10:03
產(chǎn)品樣冊
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犬(Canine)免疫球蛋白E(IgE)elisa試劑盒使用說明書
- 犬白細胞分化抗原8(CD8)elisa試劑盒犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISAKitCanineclusterofdifferentiation8,CD8ELISAKit犬白細胞分化抗原6(CD6)elisa試劑盒犬白細胞分化抗原6(CD6)ELISAKitCanineclusterofdifferentiation6,CD6ELISAKit犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)elisa試劑盒犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISAKitCaninehepatitisBvirussurfaceantigen,HBsAgELISAKit犬2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)elisa試劑盒犬2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISAKitCanine2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISAKit犬α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒犬α干擾素(IFN-α)ELISAKitCanineInterferonα,IFN-αELISAKit犬白介素18(IL-18)elisa試劑盒犬白介素18(IL-18)ELISAKitCanineInterleukin18,IL-18ELISAKIT犬腎上腺髓質(zhì)素(ADM)elisa試劑盒犬腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISAKitCanineadrenomedullin,ADMELISAKit犬免疫球蛋白E(IgE)elisa試劑盒犬免疫球蛋白E(IgE)ELISAKitCanineImmunoglobulinE,IgEELISAKit犬組胺(HIS)elisa試劑盒犬組胺(HIS)ELISAKitCanineHistamine,HISELISAKit犬細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)elisa試劑盒犬細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISAKitCanineintercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISAKit犬肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)elisa試劑盒犬肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISAKitCanineTroponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit犬肌紅蛋白(MYO/MB)elisa試劑盒犬肌紅蛋白(MYO/MB)ELISAKitCanineMyoglobin,MYO/MBELISAKit犬葉酸(FA)elisa試劑盒犬葉酸(FA)ELISAKitCanineFolicacid,FAELISAKit犬腎素(Renin)elisa試劑盒犬腎素(Renin)ELISAKitCanineReninELISAKit犬前列腺特異性抗原(PSA)elisa試劑盒犬前列腺特異性抗原(PSA)ELISAKitCanineprostatespecificantigen,PSAELISAKit犬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)elisa試劑盒犬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKitCanineacetylcholinereceptorantibody,AChRabELISAKit犬γ氨基丁酸(GABA)elisa試劑盒犬γ氨基丁酸(GABA)ELISAKitCanineGamma-aminobutyricacid,GABAELISAKit犬5羥色胺(5-HT)elisa試劑盒犬5羥色胺(5-HT)ELISAKitCanine5-Hydroxytryptamine,5HTELISAKit犬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/DLA)elisa試劑盒犬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/DLA)ELISAKitCaninemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/DLAELISAKit犬白介素8(IL-8/CXCL8)elisa試劑盒犬白介素8(IL-8/CXCL8)ELISAKitCanineInterleukin-8,IL-8ELISAKit犬維生素K1(VK1)elisa試劑盒犬維生素K1(VK1)ELISAKitCanineVitaminK1,VK1ELISAKit犬維生素E(VE)elisa試劑盒犬維生素E(VE)ELISAKitCanineVitaminE,VEELISAKit犬維生素A(VA)elisa試劑盒犬維生素A(VA)ELISAKitCanineVitaminA,VAELISAKit犬雙氫睪酮(DHT)elisa試劑盒犬雙氫睪酮(DHT)ELISAKitCanineDihydrotestosterone,DHTELISAKit犬甲狀腺素(T4)elisa試劑盒犬甲狀腺素(T4)ELISAKitCaninethyroxine,T4ELISAKit犬三碘甲狀腺原氨酸(T3)elisa試劑盒犬三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISAKitCanineTri-iodothyronine,T3ELISAKit犬孕激素/孕酮(PROG)elisa試劑盒犬孕激素/孕酮(PROG)ELISAkitCanineProgesterone,PROGELISAkit犬雌激素(E)elisa試劑盒犬雌激素(E)ELISAKitCanineestrogen,EELISAKit犬骨橋素(OPN)elisa試劑盒犬骨橋素(OPN)ELISAKitCanineOsteopontin,OPNELISAKit犬胰島素受體β(ISR-β)elisa試劑盒犬胰島素受體β(ISR-β)ELISAKitCanineInsulinReceptorβ,ISR-βELISAKIT犬內(nèi)皮素1(ET-1)elisa試劑盒犬內(nèi)皮素1(ET-1)ElisakitCanineEndothelin1,ET-1ELISAKit犬血栓前體蛋白(TpP)elisa試劑盒犬血栓前體蛋白(TpP)ELISAKitCaninethrombusprecursorprotein,TpPELISAKit犬血栓素B2(TXB2)elisa試劑盒犬血栓素B2(TXB2)ELISAKitCanineThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit犬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)酶聯(lián)免疫試劑盒犬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISAKitCanineEndothelialnitricoxidesynthase,eNOSELISAKit犬睪酮(T)elisa試劑盒犬睪酮(T)ELISAKitCanineTestoterone,TELISAKit犬促卵泡素(FSH)elisa試劑盒犬促卵泡素(FSH)ELISAKitCaninefollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit犬雌二醇(E2)elisa試劑盒犬雌二醇(E2)ELISAKitCanineEstradiol,E2ELISAKit犬β內(nèi)啡肽(β-EP)elisa試劑盒犬β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISAKitCanineBeta-Endorphin,β-EPELISAKit犬促黃體生成激素(LH)elisa試劑盒犬促黃體生成激素(LH)ELISAKitCanineLuteinizingHormone,LHELISAKit犬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)elisa試劑盒犬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISAKitCaninethrombomodulin,TMELISAKit犬肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)elisa試劑盒犬肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISAKitCanineheparincofactorⅡ,HCⅡELISAKit犬轉(zhuǎn)移生長因子β1(TGF-β1)elisa試劑盒犬轉(zhuǎn)移生長因子β1(TGF-β1)ELISAKitCanineTransforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit[詳細]
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2018-11-15 10:00
產(chǎn)品樣冊
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豬免疫球蛋白E(IgE)說明書.pdf
- 豬免疫球蛋白E(IgE)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T10μg/ml-250μg/ml使用目的:本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中免疫球蛋白E(IgE)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標本中豬免疫球蛋白E(IgE)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E(IgE),再與HRP標記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豬免疫球蛋白E(IgE)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(480μg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。240μg/ml5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液120μg/ml4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液60μg/ml3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液30μg/ml2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液15μg/ml1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月上海恒遠生物科技有限公司,專業(yè)生產(chǎn)代理各種elisa試劑盒,質(zhì)量保證,值得信賴!提供免費代測服務(wù),全程提供技術(shù)指導(dǎo),歡迎廣大科研用戶朋友,來電來函!咨詢電話:021-60515410,18221290082![詳細]
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2018-11-15 10:03
產(chǎn)品樣冊
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大鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒使用方法
- 檢測范圍:48T7.5μg/ml-240μg/ml使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中免疫球蛋白E(IgE)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠免疫球蛋白E(IgE)水平。用純化的大鼠免疫球蛋白E(IgE)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E(IgE),再與HRP標記的免疫球蛋白E(IgE)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠免疫球蛋白E(IgE)濃度。[詳細]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊
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提供大鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒操作說明書
- 提供大鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒操作說明書[詳細]
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2024-09-30 11:52
安裝說明
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裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T3μg/ml-80μg/ml使用目的:本試劑盒用于測定裸鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中免疫球蛋白E(IgE)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標本中裸鼠免疫球蛋白E(IgE)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E(IgE),再與HRP標記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中裸鼠免疫球蛋白E(IgE)濃度。裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-14 10:00
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