国产三级在线看完整版-内射白嫩大屁股在线播放91-欧美精品国产精品综合-国产精品视频网站一区-一二三四在线观看视频韩国-国产不卡国产不卡国产精品不卡-日本岛国一区二区三区四区-成年人免费在线看片网站-熟女少妇一区二区三区四区

儀器網(wǎng)(yiqi.com)歡迎您!

| 注冊2 登錄
網(wǎng)站首頁-資訊-話題-產(chǎn)品-評測-品牌庫-供應商-展會-招標-采購-知識-技術-社區(qū)-資料-方案-產(chǎn)品庫-視頻

資料庫

儀器網(wǎng)> 資料庫>牛布氏桿菌(Brucellosis)說明書定性

牛布氏桿菌(Brucellosis)說明書定性

本文由 上海瓦蘭生物科技有限公司 整理匯編

2018-09-22 10:00 537閱讀次數(shù)

掃    碼    分   享
文檔僅可預覽首頁內(nèi)容,請下載后查看全文信息!
立即下載
www.chzbio.com牛布氏桿菌(Brucellosis)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定牛血清,血漿及相關液體樣本中布氏桿菌(Brucellosis)的表達。實驗原理:本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標本中牛布氏桿菌(Brucellosis)。用純化的牛布氏桿菌(Brucellosis)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中布氏桿菌(Brucellosis)相結合,經(jīng)洗滌除去未結合的抗體和其他成分后再與HRP標記的布氏桿菌(Brucellosis)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中牛布氏桿菌(Brucellosis)的存在與否。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存陰性對照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存陽性對照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。結果判定:試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10臨界值(CUTOFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15陰性判定:樣品OD值<臨界值(CUTOFF)者為牛布氏桿菌(Brucellosis)陰性陽性判定:樣品OD值≥臨界值(CUTOFF)者為牛布氏桿菌(Brucellosis)陽性注意事項1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物請避光保存。6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月

參與評論

全部評論(0條)

更多資料

該會員其他資料
大鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
大鼠2,3-二磷酸油酸(2,3-DPG)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
大鼠3-羥3-甲基戊二酰輔酶A (HMG CoA)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
大鼠3-羥3甲基戊二酰輔酶A (HMG CoA)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
大鼠5羥色胺(5-HT)酶聯(lián)免疫分析
大鼠5-羥色胺(5-HT)酶聯(lián)免疫分析
大鼠8異前列腺素 (8-iso-PG) ELISA檢測試劑盒
大鼠5-羥色胺(5-HT)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)酶聯(lián)免疫分析
大鼠25-羥基維生素 D3(25(OH)D3)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)

在線留言

換一張?
取消