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人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA Kit說(shuō)明書(shū)
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本文由 上海希美化學(xué)有限公司 整理匯編
2014-08-21 00:00 251閱讀次數(shù)
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人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA Kit說(shuō)明書(shū)
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人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA Kit說(shuō)明書(shū)
- 人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA Kit說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2014-08-21 00:00
安裝說(shuō)明
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人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA Kit文獻(xiàn)
- 人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA Kit文獻(xiàn)[詳細(xì)]
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2024-09-12 18:29
標(biāo)準(zhǔn)
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基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
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基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)本試劑僅供研究使用標(biāo)本:體液基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)試驗(yàn)原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份?;|(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作?;|(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋?;|(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到極ng確的結(jié)果?;|(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%?;|(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlTF豬組織因子規(guī)格:48T/96Tt-PA豬組織型纖溶酶原激活劑規(guī)格:48T/96THIS豬組胺規(guī)格:48T/96TTGF-β1豬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1規(guī)格:48T/96TMHCⅢ/SLAⅢ豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類規(guī)格:48T/96TMHCⅡ/SLAⅡ豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類規(guī)格:48T/96TMHCⅠ/SLAⅠ豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類規(guī)格:48T/96TTNF-α豬腫瘤壞死因子α規(guī)格:48T/96TADP豬脂聯(lián)素規(guī)格:48T/96TLp-α豬脂蛋白α規(guī)格:48T/96Tapo-B100豬載脂蛋白B100規(guī)格:48T/96Tapo-A1豬載脂蛋白A1規(guī)格:48T/96TAChRab豬乙酰膽堿受體抗體規(guī)格:48T/96TACh豬乙酰膽堿規(guī)格:48T/96TIGFBP-3豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3規(guī)格:48T/96TIGF-2豬胰島素樣生長(zhǎng)因子2規(guī)格:48T/96TIGF-1豬胰島素樣生長(zhǎng)因子1規(guī)格:48T/96TINS豬胰島素規(guī)格:48T/96TOxLDL豬氧化低密度脂蛋白規(guī)格:48T/96TPDGF豬血小板衍生生長(zhǎng)因子規(guī)格:48T/96TPAF豬血小板活化因子規(guī)格:48T/96TFDP豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物規(guī)格:48T/96TFbg豬血纖蛋白原規(guī)格:48T/96TTM豬血栓調(diào)節(jié)蛋白規(guī)格:48T/96TNO豬血清一氧化氮規(guī)格:48T/96TVWF豬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子規(guī)格:48T/96TANG-R-Tie2豬血管生成素受體Tie2規(guī)格:48T/96TANG-2豬血管生成素2規(guī)格:48T/96TANG-1豬血管生成素1規(guī)格:48T/96TVCAM-1/CD106豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1規(guī)格:48T/96TVE-cad豬血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體規(guī)格:48T/96TANG-Ⅱ豬血管緊張素Ⅱ規(guī)格:48T/96TcTn-Ⅰ豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ規(guī)格:48T/96TPAI-1豬纖溶酶原激活物YZ因子1規(guī)格:48T/96TPAI豬纖溶酶原激活物YZ因子規(guī)格:48T/96TICAM-3/CD50豬細(xì)胞間粘附分子3規(guī)格:48T/96TICAM-2/CD102豬細(xì)胞間粘附分子2規(guī)格:48T/96THA豬透明質(zhì)酸規(guī)格:48T/96TMBP豬髓磷脂堿性蛋白規(guī)格:48T/96TMPO豬髓過(guò)氧化物酶規(guī)格:48T/96TOXR豬食欲素受體規(guī)格:48T/96TOX-B豬食欲素/阿立新B規(guī)格:48T/96TSS豬生長(zhǎng)抑素規(guī)格:48T/96TGHRP-Ghrelin豬生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin規(guī)格:48T/96TGHRP豬生長(zhǎng)激素釋放多肽規(guī)格:48T/96TGH豬生長(zhǎng)激素規(guī)格:48T/96TEPI豬腎上腺素規(guī)格:48T/96THSP-90豬熱休克蛋白90規(guī)格:48T/96THSP-70豬熱休克蛋白70規(guī)格:48T/96THSP-40豬熱休克蛋白40規(guī)格:48T/96THSP-20豬熱休克蛋白20規(guī)格:48T/96TNE豬去甲腎上腺素規(guī)格:48T/96TGLUT2豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2規(guī)格:48T/96TPrednisolone豬潑尼松龍規(guī)格:48T/96TCORT豬皮質(zhì)酮/腎上腺酮規(guī)格:48T/96TCortisol豬皮質(zhì)醇規(guī)格:48T/96TBNP豬腦鈉素/腦鈉尿肽規(guī)格:48T/96TSGLT1豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1規(guī)格:48T/96TeNOS-3豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3規(guī)格:48T/96TeNOS豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶規(guī)格:48T/96TET-1豬內(nèi)皮素1規(guī)格:48T/96TET-1豬內(nèi)皮素1規(guī)格:48T/96TIgM豬免疫球蛋白M規(guī)格:48T/96TIgG豬免疫球蛋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2018-10-09 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人基質(zhì)Gla蛋白(MGP)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人基質(zhì)Gla蛋白(MGP)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和唾液等其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人MGP單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的MGP與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人MGP,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,MGP濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中MGP濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):4ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、唾液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清用標(biāo)本稀釋液至少作1:2稀釋(取100ul,加標(biāo)本稀釋液100ul,稀釋2倍)。唾液不作稀釋,直接檢測(cè)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成8000pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液200ul。在**管中加入8000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)MGP含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的MGP檢測(cè)濃度小于31pg/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人MGP。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
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2014-09-02 00:00
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