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熱重分析儀 TG 209 F1 真空實驗操作方法
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2024-09-16 04:00 1919閱讀次數(shù)
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熱重分析儀 TG 209 F1 真空實驗操作方法
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熱重分析儀 TG 209 F1 真空實驗操作方法
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2024-09-16 04:00
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2024-09-12 18:32
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- 人一氧化氮(NO)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒僅供研究使用,用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中一氧化氮(NO)的含量。實驗原理:應用雙抗體夾心法測定標本中人一氧化氮(NO)水平。用純化的一氧化氮(NO)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入一氧化氮(NO),再與HRP標記的羊抗人抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的一氧化氮(NO)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人一氧化氮(NO)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:225μmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存操作步驟:1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為150μmol/L,100μmol/L,50μmol/L,25μmol/L,12.5μmol/L)。2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。DrugNamesGenericName:Humannitricoxide(NO)ELISAKit.PurposeThiskitallowsforthedeterminationofNOconcentrationsinHumanserum,bloodplasma,andotherbiologicalfluids.PrincipleoftheassayThekitassayHumanNOlevelinthesample,usePurifiedHumanNOantibodytocoatmicrotiterplatewells,makesolid-phaseantibody,thenaddNOtowells,CombinedNOantibodywhichWithHRPlabeled,becomeantibody-antigen-enzyme-antibodycomplex,afterwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolorAtHRPenzyme-catalyzed,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofNOinthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.Assayprocedure1.DiluteandaddsampletoStandard:set10StandardwellsontheELISAplatescoated,addStandard100μltothefirstandthesecondwell,thenaddStandarddilution50μltothefirstandthesecondwell,mix;takeout100μlformthefirstandthesecondwellthenaddittothethirdandtheforthwellseparately.thenaddStandarddilution50μltothethirdandtheforthwell,mix;thentakeout50μlfromthethirdandtheforthwelldiscard,add50μltothefifthandthesixthwell,thenaddStandarddilution50μltothefifthandthesixthwell,mix;takeout50μlfromthefifthandthesixthwellandaddtotheseventhandtheeighthwell,thenaddStandarddilution50μltotheseventhandtheeighthwell,mix;takeout50μlfromtheseventhandtheeighthwellandaddtotheninthandthetenthwell,addStandarddilution50μltotheninthandthetenthwell,mix,takeout50μlfromtheninthandthetenthwelldiscard(addSample50μltoeachwellafterDiluting,(density:150μmol/L,100μmol/L,50μmol/L,25μmol/L,12.5μmol/L)2.addsample:Setblankwellsseparately(blankcomparisonwellsdon’taddsampleandHRP-Conjugatereagent,othereachstepoperationissame).testingsamplewell.addSampledilution40μltotestingsamplewell,thenaddtestingsample10μl(samplefinaldilutionis5-fold),addsampletowells,don’ttouchthewellwallasfaraspossible,andGentlymix.3.Incubate:AfterclosingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor30minat37℃.4.Configurateliquid:30-fold(or20-fold)washsolutiondiluted30-fold(or20-fold)withdistilledwaterandreserve.5.washing:UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.addenzyme:AddHRP-Conjugatereagent50μltoeachwell,exceptblankwell.7.incubate:Operationwith3.8.washing:Operationwith5.9.color:AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionBtoeachwell,evadethelightpreservationfor15minat37℃10.Stopthereaction:AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction(thebluecolorchangetoyellowcolor).11.assay:takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin15min.Storage:2-8℃.validity:sixmonths備注:僅供科學研究實驗使用,以上信息僅供參考,具體產(chǎn)品信息以隨貨說明書為準。上海華壹生物科技有限公司訪問網(wǎng)址:http://www.huayi-bio.com咨詢電話:021-24209192,021-24209195,13661674336[詳細]
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2018-11-15 10:00
產(chǎn)品樣冊
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上海盈諾熱重分析儀密封性能實驗研究報告
- 設備是否密封,對測試結果有什么影響?氮氣是否起到保護作用?
我公司根據(jù)客戶要求“熱重法測試炭黑含量”,研發(fā)一款TGA-C系列熱重分析儀,增加了密封系統(tǒng)、天平恒溫系統(tǒng),避免氣體氣體影響,使測試炭黑含量更加準確(熱重法測試炭黑實驗原理,在氮氣保護條件下,升溫至高溫區(qū)某一溫度,恒溫5分鐘后,通入氧氣,繼續(xù)恒溫至重量不再損失)。
由于天平的稱重時支架不能與其他物體接觸,因此目前常規(guī)的熱重分析儀爐體非密封狀態(tài)。在實驗中,通入氮氣進行保護時,由于爐體非密封,導致有空氣進入,進而樣品與空氣中氧氣或其他氣體反應,從而導致樣品測試結果失真,氮氣保護段重量損失偏大,氧氣氧化段(即炭黑含量)重量損失偏小。
現(xiàn)在,TGA-C系列熱重分析儀、ZH-C系列綜合熱分析儀研發(fā)后,彌補了爐體漏氣的問題,在實驗中通入氮氣時,空氣不能進入爐體,從而達到氮氣保護的作用,避免炭黑提前氧化。[詳細]
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2019-07-03 10:08
實驗操作
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熱重分析儀
- 熱重分析儀[詳細]
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2024-09-11 17:53
產(chǎn)品樣冊
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士鋒生物酵母分批培養(yǎng)實驗操作方法
- 士鋒生物酵母分批培養(yǎng)實驗操作方法[詳細]
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2014-02-11 00:00
標準
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TGA熱重分析儀
- TGA熱重分析儀[詳細]
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2015-07-28 00:00
應用文章
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全自動熱重分析儀
- 全自動熱重分析儀[詳細]
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2008-12-18 00:00
實驗操作
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