本文由 上海信裕生物技術(shù)有限公司 整理匯編

2015-03-17 00:00 222閱讀次數(shù)

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• 人羥脯氨酸（HYP）ELISA試劑盒說明書

  人羥脯氨酸（HYP）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人HYP單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的HYP與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人HYP，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測(cè)OD值，HYP濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中HYP濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：200ug/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)，2-8℃保存48小時(shí)；更長時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成200ug/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入200ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測(cè)程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0ug/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)HYP含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的HYP檢測(cè)濃度小于0.2ug/ml。2.特異性：可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人HYP。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔，每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人羥脯氨酸Elisa試劑盒操作步驟

  加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。EPI豬腎上腺素規(guī)格：48T/96THSP-90豬熱休克蛋白90規(guī)格：48T/96THSP-70豬熱休克蛋白70規(guī)格：48T/96THSP-40豬熱休克蛋白40規(guī)格：48T/96THSP-20豬熱休克蛋白20規(guī)格：48T/96TNE豬去甲腎上腺素規(guī)格：48T/96TGLUT2豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2規(guī)格：48T/96TPrednisolone豬潑尼松龍規(guī)格：48T/96TCORT豬皮質(zhì)酮/腎上腺酮規(guī)格：48T/96TCortisol豬皮質(zhì)醇規(guī)格：48T/96TBNP豬腦鈉素/腦鈉尿肽規(guī)格：48T/96TSGLT1豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1規(guī)格：48T/96TeNOS-3豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3規(guī)格：48T/96TeNOS豬內(nèi)皮型一氧化氮合成酶規(guī)格：48T/96TET-1豬內(nèi)皮素1規(guī)格：48T/96T[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)檢測(cè)試劑盒

  人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]

  2015-03-10 00:00

  操作手冊(cè)

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• 人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)檢測(cè)試劑盒

  人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]

  2015-03-11 00:00

  專利

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• 人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)檢測(cè)試劑盒

  人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]

  2015-03-10 00:00

  操作手冊(cè)

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• 特價(jià)促銷人α1-酸性糖蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒

  本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗(yàn)原理：α1-AGP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知α1-AGP濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將α1-AGP和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，人α1-酸性糖蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中α1-AGP的濃度呈比例關(guān)系。自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。人α1-酸性糖蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的α1-AGP標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的α1-AGP含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍：0-4.0g/L4、敏感度：0.01g/LRC081-2ugRecombinantMurineSDF-1beta/CXCL12（rMuCXCL12）2ugRC082-100ug人α1-酸性糖蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒RecombinantHumanParathyroidHormone1-34(rHuPTH1-34)重組激素100ugRC083-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone7-34(rHuPTH7-34)重組激素100ugRC084-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone1-84(rHuPTH1-84)重組激素100ugRC085-5ugRecombinantMurineGM-CSF重組鼠粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子5ugCLS1077-200ml細(xì)胞分離液1.077200mlCLS1077-1-200ml細(xì)胞分離液1.077(FICOLL配置)200ml[詳細(xì)]

  2018-09-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒

  人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2013-12-06 00:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒

  人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2015-01-13 00:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒

  人糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2015-01-13 00:00

  其它

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• 人2糖蛋白(2-GP)ELISA試劑盒

  人2糖蛋白(2-GP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-29 04:08

  課件

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• 人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒

  人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-10-04 08:22

  實(shí)驗(yàn)操作

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• 人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)檢測(cè)試劑盒

  人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]

  2015-03-11 00:00

  選購指南

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