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• 血漿中C5a的ELISA測定

  實驗原理將抗C5a單克隆抗體包被固相聚苯乙烯板，加入經(jīng)聚乙二醇（PEG）處理的待測樣本，然后依次加入兔抗人C5a-IgC多克隆抗體和過氧化物酶標(biāo)記的豬抗兔IsC，再加入底物2，2’-連氮-雙（3-乙基苯駢唑啉-6-磺酸鹽）（ABTS）和H2O2顯色，于酶標(biāo)儀405mn處測定每分鐘光密度增加量（OD/min），以O(shè)D/min為縱坐標(biāo)，C5a標(biāo)準(zhǔn)晶濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，求出待測樣本中C5a的含量。實驗試劑1.PBSPH7.2，9mmol/L磷酸鹽緩沖液含140mmol/LNaCl。2.PBS-TweenpH7.2PBS含0.05％Tween20，簡稱PBS-T。3.底物溶液：100mL2mmol/LABTS溶液中含100mmol/L醋酸鈉，50mmol/L磷酸鈉，2.5mmol/LH2O2。4.沉淀劑：①：100mLpH8.0，20mmoL/LTris-甘氨酸-HCl緩沖液中含20gPEG4000，0.8gRivanol；沉淀劑②：100mLpH2.0.100mmol／L甘氨酸-HCl緩沖液中含20gPEG4000。[詳細]

  2018-10-01 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 小鼠補體C5a（C5a）ELISA試劑盒說明書

  小鼠補體C5a（C5a）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和生物體液內(nèi)）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠C5a單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的C5a與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗小鼠C5a，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，C5a濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中C5a濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：30ug/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1：10稀釋（取20ul，加標(biāo)本稀釋液180ul,稀釋10倍）。細胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入3ml蒸餾水混勻，配成10000ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，**管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入10000ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、0ng/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)C5a含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的C5a檢測濃度小于4ng/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的小鼠C5a。不與小鼠其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔，每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 人補體片段C5a（C5a）ELISA試劑盒說明書

  人補體片段C5a（C5a）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人C5a單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的C5a與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人C5a，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，C5a濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中C5a濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：5ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、唾液等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1：100稀釋（取10ul，加標(biāo)本稀釋液990ul,稀釋100倍），2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成10000pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，每管加入標(biāo)本稀釋液200ul。在**管中加入10000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品5000、2500、1250、625、312、156、78、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)C5a含量，再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的C5a檢測濃度小于40pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人C5a。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔，每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

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  2013-12-10 00:00

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  人血漿樣本中總膽汁酸含量測定方法上海恒遠生物提醒大家：人總膽汁酸Elisa試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T0.6mmol/L-16mmol/L使用目的：人總膽汁酸Elisa試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中總膽汁酸（TBA)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人總膽汁酸（TBA)水平。用純化的人總膽汁酸（TBA)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入總膽汁酸（TBA)，再與HRP標(biāo)記的總膽汁酸（TBA)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的總膽汁酸（TBA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人總膽汁酸（TBA)濃度。[詳細]

  2018-11-16 10:02

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