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大腸桿菌(E.coli)ELISA 試劑盒使用方法
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本文由 上海信然實(shí)業(yè)有限公司 整理匯編
2015-03-27 00:00 246閱讀次數(shù)
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大腸桿菌(E.coli)ELISA 試劑盒使用方法
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大腸桿菌(E.coli)ELISA 試劑盒使用方法
- 大腸桿菌(E.coli)ELISA 試劑盒使用方法[詳細(xì)]
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2015-03-27 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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大腸桿菌(E.coli)elisa試劑盒說明書
- 大腸桿菌(E.coli)elisa試劑盒使用目的:本試劑盒用于測(cè)定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中大腸桿菌(E.coli)表達(dá)。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大腸桿菌(E.coli)表達(dá)。用純化的大腸桿菌(E.coli)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中大腸桿菌(E.coli)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的大腸桿菌(E.coli)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中大腸桿菌(E.coli)的存在與否。大腸桿菌(E.coli)elisa試劑盒組成:130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8陽性對(duì)照0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9陰性對(duì)照0.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求:1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。大腸桿菌(E.coli)elisa試劑盒操作步驟:1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)2.加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。大腸桿菌(E.coli)elisa試劑盒計(jì)算和結(jié)果判定:試驗(yàn)有效性:陽性對(duì)照孔平均值≥1.00;陰性對(duì)照平均值≤0.10臨界值(CUTOFF)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15陰性判定:樣品OD值<臨界值(CUTOFF)者為大腸桿菌(E.coli)陰性陽性判定:樣品OD值≥臨界值(CUTOFF)者為大腸桿菌(E.coli)陽性注意事項(xiàng):1.操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,本試劑不同批號(hào)組分不得混用。2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。3.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物請(qǐng)避光保存。6.試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí),參考波長(zhǎng)為630nm7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時(shí)必須大腸桿菌(E.coli)elisa試劑盒注意安全。保存條件及有效期:1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2019-01-02 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大腸桿菌(E.coli)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明
- 計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)檢測(cè)試劑盒
- 大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2015-09-07 00:00
專利
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大腸桿菌內(nèi)毒素(endotoxin)試劑盒使用方法
- 檢測(cè)范圍:96T0.03Eu/L0.8Eu/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大腸桿菌樣本中內(nèi)毒素(endotoxin)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大腸桿菌內(nèi)毒素(endotoxin)水平。用純化的大腸桿菌內(nèi)毒素(endotoxin)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)毒素(endotoxin),再與HRP標(biāo)記的內(nèi)毒素(endotoxin)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內(nèi)毒素(endotoxin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大腸桿菌內(nèi)毒素(endotoxin)濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大腸桿菌內(nèi)毒素elisa試劑盒使用說明書
- 大腸桿菌內(nèi)毒素elisa試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2015-05-14 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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人大腸桿菌DH5α菌體蛋白酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用方法
- 檢測(cè)范圍:96T1ng/L-45ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中大腸桿菌DH5α菌體蛋白含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人大腸桿菌DH5α菌體蛋白水平。用純化的人大腸桿菌DH5α菌體蛋白抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大腸桿菌DH5α菌體蛋白,再與HRP標(biāo)記的大腸桿菌DH5α菌體蛋白抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大腸桿菌DH5α菌體蛋白呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人大腸桿菌DH5α菌體蛋白濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(64ng/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。32ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液16ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液8ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液4ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大腸桿菌宿主殘留蛋白 elisa試劑盒說明書
- 試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。1使用目的:本試劑盒用于飼料、魚、蝦和肉類組織(如雞、牛肉和豬肉),藥物、血清和尿樣中大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)殘留的定量檢測(cè)。2實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,在微孔板包被有大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)偶聯(lián)抗原,加入大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)與微孔條上預(yù)包被的大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)抗體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè),吸光值與樣品中大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)含量成反比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)的含量。3試劑盒組成3.1預(yù)包被的大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)偶聯(lián)抗原的可拆酶標(biāo)板:1塊(12孔×8條)。3.2大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)標(biāo)準(zhǔn)品:6瓶(1ml/瓶),含量分別是:0ug/ml,0.1ug/ml,0.3ug/ml,0.9ug/ml,2.7ug/ml,8.1ug/ml3.3抗大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)抗體酶結(jié)合物:1瓶(6ml)。3.4顯色液A:1瓶(6ml)。3.5顯色液B:1瓶(6ml)。3.6終止液:1瓶(6ml),2M硫酸。3.7樣本稀釋液:1瓶(10×,6ml),用于樣品稀釋用。3.8濃縮洗滌液:1瓶(20×,20ml),用于洗板。3.9說明書一份。4需要而未提供的材料4.1設(shè)備4.1.1波長(zhǎng)450nm酶標(biāo)儀。4.1.2粉碎機(jī)。4.1.3量筒。4.1.4振蕩器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相當(dāng)?shù)臑V紙。4.1.7微量移液器。4.2試劑4.2.1去離子水或蒸餾水。4.2.2甲醇。5貯存5.1試劑盒貯存于2~8℃,切勿冷凍5.2未用完的微孔板應(yīng)該密封干燥保存6注意事項(xiàng)6.1使用試劑盒前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書。6.2不要使用過期試劑盒。6.3試劑盒使用前,將試劑恢復(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時(shí)。6.4標(biāo)準(zhǔn)品中含有大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP),使用時(shí)應(yīng)特別注意,操作時(shí)應(yīng)帶手套。6.5終止液中含有硫酸,使用時(shí)防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。6.6不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用,否則會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。6.7不同批號(hào)試劑盒中的試劑不得混用;不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。6.8稀釋樣本時(shí)必須用本試劑盒中的樣本稀釋液,否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果6.9混合試劑時(shí)應(yīng)避免起泡。7工作液準(zhǔn)備7.1大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)標(biāo)準(zhǔn)品溶液:0ug/ml,0.1ug/ml,0.3ug/ml,0.9ug/ml,2.7ug/ml,8.1ug/ml7.2濃縮洗滌液:用蒸餾水按1:20(1+19)稀釋備用7.3樣本稀釋液:備用7.3顯色劑:已備用,避免光線直照7.4反應(yīng)終止液:已備用8樣品處理:(樣品在提取過程中,要嚴(yán)格按說明書操作,提取過程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋,否則會(huì)出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存)一般樣品處理8.1取10g粉碎的樣品,加20ml70%甲醇溶液8.2QL振蕩3分鐘8.3用WhatmanNo1濾紙過濾8.4取100μl處理后的樣品,加入400μl樣本稀釋液8.5取100μl稀釋液進(jìn)行分析動(dòng)物組織前處理8.6準(zhǔn)確稱取1±0.05g勻漿后的組織樣品到50ml的聚苯乙烯離心管中;加入3ml乙腈--丙酮提取溶液,2000rpm劇烈震蕩20s后4000r/min以上離心5min8.7取上清液0.8ml在50℃氮?dú)饬飨麓蹈?.8加入3.2mL樣品稀釋液,750rpm渦旋20s8.9取100ml用于分析飼料前處理方法8.10準(zhǔn)確稱取1±0.05g粉碎飼料樣品到50ml的聚苯乙烯離心管中;加入4ml乙腈,1ml丙酮,2000rpm劇烈震蕩20s后4000r/min以上離心3min8.11取上清液0.7ml在50℃氮?dú)饬飨麓蹈?.12加入2.8mL樣品稀釋液,渦旋20s,混勻后取100ml用于分析牛奶前處理方法8.13取1ml牛奶樣品到5ml聚苯乙烯離心管中;加入4ml樣品稀釋液,混勻后取100ml用于分析奶粉前處理方法8.14準(zhǔn)確稱取0.3g奶粉樣品到7ml的聚苯乙烯離心管中;加入2mlPBS溶液,2ml正己烷,震蕩混勻8.154000r/min以上離心5min,去除有機(jī)層和中間層,取下層溶液100ml到400ml樣品稀釋液8.16混勻后取100ml用于分析9酶免分析步驟9.1實(shí)驗(yàn)須知9.1.1實(shí)驗(yàn)開始前請(qǐng)將所有試劑于盒外充分恢復(fù)至室溫(25±2℃),時(shí)間約2小時(shí)?;販刂潦覝兀?5±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存注:一定保證回溫充分,否則影響檢測(cè)的極ng確度和準(zhǔn)確度。9.1.2使用后請(qǐng)立即將試劑放回2~8℃保存9.1.3請(qǐng)不要改變分析程序9.1.4請(qǐng)使用極ng確的微量移液器9.1.5操作一旦開始,請(qǐng)不要中斷任何程序9.1.6ELISA結(jié)果的可重復(fù)性極大程度的取決于操作程序,請(qǐng)嚴(yán)格按照要求操作9.1.7為避免交叉污染,每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣9.1.8加樣時(shí)請(qǐng)勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面9.2分析步驟9.2.1預(yù)先進(jìn)行編號(hào),標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,推薦進(jìn)行雙孔檢測(cè)9.2.2取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存9.2.3樣品稀釋液、濃縮洗滌液(20×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)9.2.4在B0孔中加入50μl0.0ug/ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液9.2.5在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液9.2.6在各樣品孔中加入50μl樣品溶液9.2.7在所有孔中加入50μl的抗大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)抗體酶結(jié)合物9.2.8輕輕晃動(dòng)反應(yīng)板幾秒鐘。9.337℃溫浴30min(溫浴過程中不時(shí)輕拍反應(yīng)板,可以減少雙孔誤差)9.3.1甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,Z后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以完全除去孔中液體。9.4反應(yīng)9.4.1洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個(gè)微孔中先加入50μl顯色液A,再加50μl顯色液B;輕微晃動(dòng)反應(yīng)板使之徹底混勻9.4.237℃溫浴10min9.4.3每孔中加入50μl終止液,混勻9.4.4在450nm下檢測(cè)吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。10結(jié)果計(jì)算10.1定量分析10.1.1所獲得的每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以**個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值(B0)再乘以1**%,即百分吸光度值。B標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值B00ug/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值10.1.2以大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)濃度的對(duì)數(shù)值為X軸,百分吸光度值為Y軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。根據(jù)樣品百分吸光度值,可從曲線上得到對(duì)應(yīng)點(diǎn)的橫坐標(biāo),即為大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)濃度的對(duì)數(shù)值,求得反對(duì)數(shù)即為測(cè)定液中大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)濃度C(ug/ml)10.1.3由于樣品經(jīng)過了預(yù)先稀釋,因此根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋倍數(shù)。10.2半定量測(cè)定10.1.1目測(cè)半定量測(cè)定:首先選擇一個(gè)適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運(yùn)行,根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值的高低比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。10.1.2儀器半定量測(cè)定:首先選擇一個(gè)適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)液與樣品同運(yùn)行,根據(jù)樣品與標(biāo)準(zhǔn)品顏色深淺比較,判斷樣品濃度值是小于還是大于標(biāo)準(zhǔn)值。11特異性物質(zhì)交叉反應(yīng)大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coliP)1**%12試劑盒參數(shù)本試劑盒檢測(cè)下限為0.1ug/mlB0吸光度**值應(yīng)大于1.0試劑盒吸光度板內(nèi)誤差小于8%,板間誤差小于15%。用本說明書提供的組織樣本提取方法回收率大于80%。13標(biāo)準(zhǔn)曲線模式(僅供參考)試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為0.1ug/ml~8.1ug/ml。14分析限制本試劑盒檢測(cè)為陽性的樣品應(yīng)該用另一種方法如HPLC或GC/MS加以確證。[詳細(xì)]
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2018-09-03 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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α-胡蘿卜素Elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T35pg/ml-1400pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定玉米樣本中α-胡蘿卜素(α-Carotene)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中α-胡蘿卜素(α-Carotene)水平。用純化的α-胡蘿卜素(α-Carotene)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入α-胡蘿卜素(α-Carotene),再與HRP標(biāo)記的α-胡蘿卜素(α-Carotene)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α-胡蘿卜素(α-Carotene)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中α-胡蘿卜素(α-Carotene)濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人MuRF-1 elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T3.0pg/ml-90pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中MuRF-1含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人MuRF-1水平。用純化的人MuRF-1抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入MuRF-1,再與HRP標(biāo)記的MuRF-1抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MuRF-1呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人MuRF-1濃度。[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人sCTLA4 elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T12pg/ml-500pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中sCTLA4含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人sCTLA4水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入sCTLA4,再與HRP標(biāo)記的抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的sCTLA4呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人sCTLA4濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人MR-proANP elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T10pg/ml-320pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中MR-proANP含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人MR-proANP水平。用純化的人MR-proANP抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入MR-proANP,再與HRP標(biāo)記的MR-proANP抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MR-proANP呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人MR-proANP濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人Salusin βelisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T1.2pg/ml-40pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中Salusinβ含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人Salusinβ水平。用純化的人Salusinβ抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入Salusinβ,再與HRP標(biāo)記的Salusinβ抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Salusinβ呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人Salusinβ濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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L-谷胱甘肽Elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T1.2ng/L-45ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定樣本中L-谷胱甘肽(GSH)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中L-谷胱甘肽(GSH)水平。用純化的L-谷胱甘肽(GSH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入L-谷胱甘肽(GSH),再與HRP標(biāo)記的L-谷胱甘肽(GSH)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的L-谷胱甘肽(GSH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中L-谷胱甘肽(GSH)濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人PTCH1 elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T32pg/ml-1200pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中PTCH1含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人PTCH1水平。用純化的人PTCH1抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入PTCH1,再與HRP標(biāo)記的PTCH1抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的PTCH1呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人PTCH1濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人PKC-α elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T5U/L-160U/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中PKC-α活性。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人PKC-α水平。用純化的人PKC-α抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入PKC-α,再與HRP標(biāo)記的PKC-α抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的PKC-α呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人PKC-α活性濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人Rta-IgG elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T0.4pg/ml-20pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中Rta-IgG含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中人Rta-IgG水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入Rta-IgG,再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Rta-IgG呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人Rta-IgG濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人notch-2 elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T0.7nmol/L-17nmol/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中notch-2含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人notch-2水平。用純化的人notch-2抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入notch-2,再與HRP標(biāo)記的notch-2抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的notch-2呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人notch-2濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人C-jun elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T3U/L80U/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中C-jun含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人C-jun水平。用純化的人C-jun抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入C-jun,再與HRP標(biāo)記的C-jun抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C-jun呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人C-jun濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人RAB3B elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T7pg/ml-260pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中RAB3B含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人RAB3B水平。用純化的人RAB3B抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入RAB3B,再與HRP標(biāo)記的RAB3B抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的RAB3B呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人RAB3B濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-01 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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