本文由 深圳市諾亞迪化學(xué)科技有限公司 整理匯編

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  試驗(yàn)原理：PTHrP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知PTHrP濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將PTHrP和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PTHrP的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：400nmol/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進(jìn)行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標(biāo)記的抗PTHrP抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型人(Human)甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA檢測試劑盒自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人(Human)甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白ELISA檢測試劑盒操作注意事項(xiàng)1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2．實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7．底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9．按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備1．標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：400nmol/L（6號標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。200nmol/L（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100nmol/L（4號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50nmol/L（3號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25nmol/L（2號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液12.5nmol/L（1號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0nmol/L（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（nmol/L）A400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F12.512.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的PTHrP標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的PTHrP含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-400nmol/L4、敏感度：1.0nmol/L[詳細(xì)]

  2018-09-27 10:00

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• 奶粉中三聚氰胺檢測方法

  奶粉中三聚氰胺檢測方法[詳細(xì)]

  2009-02-11 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 奶粉中三聚氰胺的檢測

  本文參考《GB/T 22388 2008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》中第二法建立了基于?？艶otector Plus全自動固相萃取分析奶粉中三聚氰胺的檢測方法，試樣用1%三氣乙酸溶液提取，使用陽離子交換固相萃取柱凈化，用液相色譜質(zhì)譜/質(zhì)譜法測定和確證，內(nèi)標(biāo)法定量，回收率于87% 97%之間，RSD=4. 7。說明該方法能滿足奶粉中三聚氰胺的檢測。 [詳細(xì)]

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• 奶粉中三聚氰胺檢測方案

  奶粉中三聚氰胺檢測方案[詳細(xì)]

  2024-09-28 15:46

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• GB/T 22992-2008 牛奶和奶粉中玉米赤霉醇和雌激素檢測相關(guān)產(chǎn)品

  GB/T 22992-2008 牛奶和奶粉中玉米赤霉醇和雌激素檢測相關(guān)產(chǎn)品[詳細(xì)]

  2010-08-16 00:00

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• 檢測嬰幼兒奶粉中的亞麻酸

  檢測嬰幼兒奶粉中的亞麻酸[詳細(xì)]

  2024-09-29 13:51

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• 電子舌檢測奶粉中抗生素殘留

  電子舌檢測奶粉中抗生素殘留[詳細(xì)]

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• 奶粉中硝酸鹽亞硝酸鹽的檢測整體解決方案

  奶粉中硝酸鹽亞硝酸鹽的檢測整體解決方案[詳細(xì)]

  2014-10-13 00:00

  安裝說明

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• 奶粉中硝酸鹽亞硝酸鹽的檢測整體解決方案

  奶粉中硝酸鹽亞硝酸鹽的檢測整體解決方案[詳細(xì)]

  2014-06-17 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 食品（奶粉）中三聚氰胺檢測方法包

  [詳細(xì)]

  2020-04-26 17:54

  操作手冊

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• 牛奶和奶粉中地塞米松的檢測

  地塞米松是一種長效腎上腺糖皮質(zhì)類激素，具有調(diào)節(jié)糖代謝，促進(jìn)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為糖，提升血糖濃度，調(diào)節(jié)水鹽代謝等作用。由于地塞米松具有抗炎、抗過敏、抗毒素等廣泛的藥理作用，因而常用于畜牧養(yǎng)殖中。然而動物生長過程中過量使用這種激素則會導(dǎo)致其在動物源性食品中的殘留，影響人類健康。從體外大量攝入糖皮質(zhì)類激素會造成體內(nèi)激素的比例失調(diào)、糖代謝和無機(jī)鹽代謝紊亂，可能會引起肥胖、高血壓、骨質(zhì)疏松、胎兒畸形等不良癥狀。因此，許多國家對動物源性食品中糖皮質(zhì)類激素的Z大殘留量都做了規(guī)定。 [詳細(xì)]

  2024-01-29 15:10

  應(yīng)用文章

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• 奶粉中三聚氰胺的標(biāo)準(zhǔn)檢測方法

  奶粉中三聚氰胺的標(biāo)準(zhǔn)檢測方法[詳細(xì)]

  2024-09-13 02:26

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