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羧肽酶原B(Procarboxypeptidase B)TAFI 說明書
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本文由 上海起發(fā)實驗試劑有限公司 整理匯編
2018-09-29 10:03 1066閱讀次數(shù)
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EnzymeResearch,EnzymeResearch介紹,EnzymeResearch代理,EnzymeResearch總代,EnzymeResearch**代理,EnzymeResearchZG代理EnzymeResearch是一家擁有超過25年的酶研究的實驗室,生產(chǎn)和開發(fā)多種用于基本凝血研究的多種酶和輔因子。在過去的十年EnzymeResearchLaboratories為科學(xué)家參與止血和血栓形成的研究提供了寶貴支持。TAFI(ProcarboxypeptidaseB)TAFITAFI(ProcarboxypeptidaseB)ThrombinActivatableFibrinolysisInhibitor(TAFI),alsoknownasplasmaprocarboxypeptidase-Bandcarboxypeptidase-U,isasinglechainglycoproteinwithamassof58,000daltons.TAFIispurifiedfromnormalhumanplasmausingimmunoaffinityandion-exchangechromatography.Buffercomposition=20mMHEPES/0.2MNaCl/pH7.4ExtinctionCoefficient(1%)=20.2MolecularWeight=58,000daltons上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人:楊建輝400電話:4006551678辦公電話:021-50724187傳真:021-50724961*8006手機:15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址:上海市浦東新區(qū)繡川路561號1102室
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羧肽酶原B(Procarboxypeptidase B)TAFI 說明書
- EnzymeResearch,EnzymeResearch介紹,EnzymeResearch代理,EnzymeResearch總代,EnzymeResearch**代理,EnzymeResearchZG代理EnzymeResearch是一家擁有超過25年的酶研究的實驗室,生產(chǎn)和開發(fā)多種用于基本凝血研究的多種酶和輔因子。在過去的十年EnzymeResearchLaboratories為科學(xué)家參與止血和血栓形成的研究提供了寶貴支持。TAFI(ProcarboxypeptidaseB)TAFITAFI(ProcarboxypeptidaseB)ThrombinActivatableFibrinolysisInhibitor(TAFI),alsoknownasplasmaprocarboxypeptidase-Bandcarboxypeptidase-U,isasinglechainglycoproteinwithamassof58,000daltons.TAFIispurifiedfromnormalhumanplasmausingimmunoaffinityandion-exchangechromatography.Buffercomposition=20mMHEPES/0.2MNaCl/pH7.4ExtinctionCoefficient(1%)=20.2MolecularWeight=58,000daltons上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人:楊建輝400電話:4006551678辦公電話:021-50724187傳真:021-50724961*8006手機:15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址:上海市浦東新區(qū)繡川路561號1102室[詳細]
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2018-09-29 10:03
產(chǎn)品樣冊
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豬羧肽酶B(CPB)酶聯(lián)免疫分析
- 豬羧肽酶B(CPB)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T10U/L-240U/L使用目的:本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中羧肽酶B(CPB)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬羧肽酶B(CPB)水平。用純化的豬羧肽酶B(CPB)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入羧肽酶B(CPB),再與HRP標(biāo)記的羧肽酶B(CPB)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的羧肽酶B(CPB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中豬羧肽酶B(CPB)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(480U/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。240U/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液120U/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液60U/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液30U/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液15U/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月__[詳細]
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2018-09-19 10:01
產(chǎn)品樣冊
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Cytochalasin B 細胞松弛素B 說明書
- CytochalasinB細胞松弛素BCytochalasinB細胞松弛素B產(chǎn)品編號規(guī)格價格C8080-11mg680.00說明:細胞研究工具;肌動蛋白聚合的鑒定。別名:松胞菌素B;松孢素B;細胞分裂抑素B;Phomin分子式:C29H37NO5分子量:479.61CAS#:14930-96-2外觀:白色結(jié)晶性粉末特性:來源:Drechsleradematioidea純度:≥98%(HPLC)溶解性:溶于乙醇,參考濃度20mg/ml??扇苡贒MSOR:26/27/28-63S:28-36/37-45儲存條件:20℃FromSigmaC6762上海索萊寶生物科技有限公司聯(lián)系方式:電話021-54100800傳真021-54261506手機15021200052上海索萊寶生物科技有限公司ShanghaisolarbioBioscience&TechnologyCo.,LTD上海索萊寶生物科技有限公司是一家集銷售生化試劑、實驗耗材、自產(chǎn)分子生物學(xué)產(chǎn)品為一體,并能提供技術(shù)支持的專業(yè)性生物科技公司。公司秉承“以客戶為ZX,以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,在依靠客戶的大力支持和員工的不懈努力下獲得了快速的成長。公司組織結(jié)構(gòu)清晰,內(nèi)部管理科學(xué),擁有一支既分工細致又高度合作的年輕化隊伍,保持了各個部門之間的GX合作運轉(zhuǎn),充分保障了公司在充滿競爭的市場中處于領(lǐng)xian地位。公司注重與業(yè)界精英合作,目前公司已經(jīng)和Amersham、Amresco、Axygen、BD、Corning、Dragon、Eppendorf、Fluka、Hyclone、Merck、Millipore、Omega、Oxoid、Pall、Peprotech、Pharmacia、Pierce、Roche、Sigma、Serva、TBD、Whatman、GBD、ADL、R&D、RB等企業(yè)結(jié)成緊密的合作伙伴關(guān)系,代理其領(lǐng)xian世界的產(chǎn)品,并在全國各地設(shè)有分銷機構(gòu)。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實驗技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時間、極具競爭力的價格,所有這些都保證了我們向您提供的是Z專業(yè)Zyou質(zhì)的服務(wù)!歡迎新老顧客前來詢問[詳細]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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FH0831-小鼠原B細胞株;BA-F3
- FH0831-小鼠原B細胞株;BA-F3[詳細]
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2024-05-30 09:33
應(yīng)用文章
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pPICZα B載體說明書
- pPICZαB型號載體名稱出品公司載體用途VJI0297pPICZαBInvitrogen酵母表達載體OX1promoterregion:bases1-941OX1primingsite:bases855-875α-factorsignalsequence:bases941-1207Multiplecloningsite:bases1208-1276c-mycepitope:bases1275-1304Polyhistidine(6xHis)tag:bases1320-13373AOX1primingsite:bases1423-1443AOX1transcriptionterminationregion:bases1341-1682TEF1promoter:bases1683-2093EM7promoter:bases2095-2162ShbleORF:bases2163-2537CYC1transcriptionterminationregion:bases2538-2855pUCorigin:bases2866-3539(complementarystrand)質(zhì)粒圖譜:上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人:楊建輝400電話:4006551678辦公電話:021-50724187傳真:021-50724961*8006手機:15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址:上海市浦東新區(qū)繡川路561號1102室[詳細]
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2018-09-29 10:02
產(chǎn)品樣冊
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pGAPZα B載體說明書
- pGAPZαB型號載體名稱出品公司載體用途VJI0294pGAPZαBInvitrogen酵母表達載體Theglyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase(GAPDH)enzymeisconstitutivelyexpressedathighlevelsinmanyorganisms,includingPichiapastoris.Thepromoterofthegene(GAP)encodingtheGAPDHproteinhasrecentlybeencharacterizedandshowntoexpressrecombinantproteinstohighlevelsinPichiapastoris,dependingonthecarbonsourceused(Waterhametal.,1997).ThelevelofexpressionseenwiththeGAPpromoter(PGAP)canbeslightlyhigherthanthatobtainedwiththeAOX1promoter.ThepGAPZA,B,andCvectors(2.9kb)andpGAPZαA,B,andC(3.1kb)vectorsusetheGAPpromotertoconstitutivelyexpressrecombinantproteinsinPichiapastoris.ProteinscanbeexpressedasfusionstoaC-terminalpeptidecontainingthemycepitopefordetectionandapolyhistidinetagforpurificationonmetal-chelatingresin(i.e.ProBond).Inaddition,pGAPZαproducesproteinsfusedtoanN-terminalpeptideencodingtheSaccharomycescerevisiaeα-factorsecretionsignal.BothvectorsaresuppliedinthreereadingframestofacilitateinframecloningwiththeC-terminaltagand/ortheN-terminalsecretionsignal.Selectionofthesevectorsisbasedont質(zhì)粒圖譜:上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人:楊建輝400電話:4006551678辦公電話:021-50724187傳真:021-50724961*8006手機:15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址:上海市浦東新區(qū)繡川路561號1102室[詳細]
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2018-09-29 10:02
產(chǎn)品樣冊
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人核因子κB(NF-κB)ELISA Kit說明書
- 人核因子κB(NF-κB)ELISA Kit說明書[詳細]
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2014-08-21 00:00
實驗操作
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人YZ素B(Inhibin B)ELISA試劑盒說明書
- 人YZ素B(InhibinB)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人InhibinB單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的InhibinB與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人InhibinB,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,InhibinB濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中InhibinB濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):5ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成10ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入10ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)InhibinB含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的InhibinB檢測濃度小于10pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人InhibinB。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人顆粒酶B(Granzym B)ELISA試劑盒說明書
- 人顆粒酶B(GranzymB)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人GranzymB單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的GranzymB與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人GranzymB,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,GranzymB濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中GranzymB濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。2.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。3.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。取8個1.5ml離心管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul置于漩渦混合器上混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔(空白管除外)中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值減除空白值后再行計算。如空白OD低于0.1,也可以直接計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),使用軟件作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)GranzymB含量。軟件可以向本公司免費索取。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的GranzymB檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人GranzymB。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.檢測時所有試劑都要恢復(fù)到室溫。板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.試劑盒使用超敏TMB溶液,若顯色過深會出現(xiàn)絮狀物,屬正?,F(xiàn)象,不影響結(jié)果判讀。5.說明書中試劑盒組成為96T的量,48T的量應(yīng)減半!6.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人細胞周期素B(Cyclin B)ELISA試劑盒說明書
- 人細胞周期素B(CyclinB)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人CyclinB單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的CyclinB與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人CyclinB,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,CyclinB濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中CyclinB濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):160ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入2ml蒸餾水混勻,配成80ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液975ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入80ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液25ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CyclinB含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CyclinB檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人CyclinB。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.2%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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CAS:14930-96-2,細胞松弛素B,Cytochalasin B
- CAS:14930-96-2,細胞松弛素B,CytochalasinB英文名稱:CytochalasinB;PhominCAS號:14930-96-2C29H37NO5=479.61級別:BR含量:≥98.0%熔點:218~222℃性狀:白色粉末,不溶于水,溶解度:10.3mg/ml,乙醇20mg/ml(24C),DMSO371mg/ml,DMF492mg/ml(24C)。比旋光度89°(c=1,甲醇)用途:生化研究。在進行動物細胞核和細胞質(zhì)分離的同時,又能保持其原有形態(tài)而使用的一種試劑。動物細胞核在細胞質(zhì)中,不是呈浮游狀態(tài)存在,而是通過一種被稱之為微絲(microfilament)的含有肌動蛋白(actin)的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)與細胞膜互相接合。細胞松弛素能阻礙微絲的形成,當(dāng)用這一試劑處理動物細胞,細胞核便會以一層很薄的細胞質(zhì)層與細胞膜呈纏繞的狀態(tài)從細胞中突出。把這種現(xiàn)象稱為脫核。這種方法于1967年首先由卡特(Carter)所發(fā)現(xiàn)。其后,普雷斯科特(Prescott)提出了使用離心分離的改良方法,從而提高了脫核的效率。已知有從A到F等多種細胞松弛素,在脫核實驗中,從保存的穩(wěn)定性上考慮,以使用細胞松弛素BZ為常見。保存:-20℃CAS:14930-96-2,細胞松弛素B,CytochalasinBGr-448K,Anti-CK34βE12打折,βE12高分子量角蛋白CK34βE12打折,抗體促銷C.L.E.D培養(yǎng)基添加劑生產(chǎn)廠商直接銷售茜素雙酯,標(biāo)準(zhǔn)品,價格,50mgRatnicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISA試劑盒大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸Elisa試劑盒96T/48T,妥布霉素紙片,30片/瓶人激肽釋放酶6(KLK6)ELISA試劑盒大鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBVpreS2Ab)ELISA試劑盒升麻苷,標(biāo)準(zhǔn)品,價格,20mgMouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISA試劑盒小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體ⅠElisa試劑盒96T/48T,CAS:14930-96-2,細胞松弛素B,CytochalasinB[詳細]
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2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊
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犬核因子?b (NF?b)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書
- 犬核因子?b (NF?b)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書[詳細]
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2015-03-11 00:00
其它
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人神經(jīng)激肽B(Neurokinin B)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人神經(jīng)激肽B(NeurokininB)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人NeurokininB單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的NeurokininB與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人NeurokininB,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,NeurokininB濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中NeurokininB濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)NeurokininB含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的NeurokininB檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人NeurokininB。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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葉綠素B
- 葉綠素B[詳細]
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2014-09-29 00:00
期刊論文
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派洛寧B
- 派洛寧B[詳細]
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2024-09-16 18:45
實驗操作
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大鼠蛋白激酶B(PKB)說明書
- www.biokanu.com大鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中蛋白激酶B(PKB)含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠蛋白激酶B(PKB)水平。用純化的大鼠蛋白激酶B(PKB)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入蛋白激酶B(PKB),再與HRP標(biāo)記的蛋白激酶B(PKB)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的蛋白激酶B(PKB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠蛋白激酶B(PKB)濃度。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:270nmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180nmol/L,120nmol/L,60nmol/L,30nmol/L,15nmol/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:10nmol/L-200nmol/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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pEF1/myc-His B載體說明書
- 型號載體名稱出品公司載體用途價格VPI0027pEF1/myc-HisBInvitrogen哺乳動物表達載體800產(chǎn)品參數(shù):KeyFunction:ConstitutiveExpressionMammalianSelection:Neo,G418Promoter:EF-1αVectorType:pEFCloningMethod:RestrictionEnzyme/MCSProteinTagorFusion:c-MycEpitopeTag,HisTag(6xHis)ConstitutiveorInducibleSystem:Constitutive載體抗性:氨芐青霉素(Ampicillin)載體描述:pEF1/myc-HisA,B,andCare6.2kbvectorsderivedfrompcDNA3.1/myc-Hisanddesignedforoverproductionofrecombinantproteinsinmammaliancelllines.Featuresofthevectorsallowpurificationanddetectionofexpressedproteins.High-levelstableandtransientexpressioncanbecarriedoutinmostmammaliancells.Thevectorscontainthefollowingelements:Humanelongationfactor1?-subunit(hEF-1α)promoterforhigh-levelexpressionacrossabroadrangeofspeciesandcelltypes(Goldmanetal.,1996;MizushimaandNagata,1990).Threereadingframestofacilitatein-framecloningwithaC-terminaltagencodingthemyc(c-myc)epitopeandapolyhistidinemetal-bindingpeptide.Neomycinresistancegeneforselectionofstablecelllines.EpisomalreplicationincelllinesthatarelatentlyinfectedwithSV40orthatexpresstheSV40largeTantigen(e.g.,COS7).Thecontrolplasmid,pEF1/myc-His/lacZ,isincludedforuseasapositivecontrolfortransfection,expression,anddetectioninthecelllineofchoice.質(zhì)粒圖譜:[詳細]
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2018-09-29 10:02
產(chǎn)品樣冊
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pUB6/V5 His B說明書
- pUB6/V5HisB型號載體名稱出品公司載體用途VPI0023pUB6/V5HisBInvitrogen哺乳動物表達載體產(chǎn)品參數(shù):KeyFunction:ConstitutiveExpressionMammalianSelection:BlasticidinPromoter:UbCVectorType:pUB6CloningMethod:RestrictionEnzyme/MCSProteinTagorFusion:V5EpitopeTag,HisTag(6xHis)ConstitutiveorInducibleSystem:Constitutive載體抗性:氨芐青霉素(Ampicillin)載體描述:pUB6/V5-HisA,B,andCare5.5kbvectorsdesignedforoverproductionofrecombinantproteinsinmammaliancelllines.Featuresofthevectorsallowpurificationanddetectionofexpressedproteins.High-levelstableandtransientexpressioncanbecarriedoutinmostmammaliancells.Thevectorscontainthefollowingelements:HumanubiquitinCpromoter(hUbC)forhigh-levelexpressionacrossabroadrangeofspeciesandcelltypes(Schorppetal.,1996;Wulffetal.,1990).Threereadingframestofacilitatein-framecloningwithaC-terminalpeptideencodingtheV5epitopeandapolyhistidine(6×His)metal-bindingtag.Blasticidinresistancegene(bsd)forselectionofstablecelllines.EpisomalreplicationincelllinesthatarelatentlyinfectedwithSV40orthatexpresstheSV40largeTantigen(e.g.COS-1,COS-7).Thecontrolplasmid,pUB6/V5-His/lacZ,isincludedforuseasapositivecontrolfortransfection,expression,anddetectioninthecelllineofchoice.質(zhì)粒圖譜:上海起福生物科技有限公司聯(lián)系人:楊建輝400電話:4006551678辦公電話:021-50724187傳真:021-50724961*8006手機:15921799099企業(yè)QQ:4006551678網(wǎng)址:http://www.qfbio.com/地址:上海市浦東新區(qū)繡川路561號1102室[詳細]
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2024-09-29 06:01
產(chǎn)品樣冊
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大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)ELISA試劑盒使用說明書
- 南京森貝伽現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量保證,價格優(yōu)惠,試劑盒森貝伽。本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)的含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)水平。用純化的大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB),再與HRP標(biāo)記的核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)的含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標(biāo)包被板1×481×962-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品:1350ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存20倍濃縮洗滌液20ml×1瓶20ml×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在**、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在**、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為900ng/L,600ng/L,300ng/L,150ng/L,75ng/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。計算:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%檢測范圍:50ng/L-1000ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-11-07 14:16
產(chǎn)品樣冊
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遠志皂苷B On極saponin B
- 遠志皂苷B On極saponin B[詳細]
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2015-09-09 00:00
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