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N-乙酰-DL-絲氨酸說明書,N-乙酰-DL-絲氨酸資料

本文由 上海金穗生物科技有限公司 整理匯編

2018-10-08 10:00 676閱讀次數(shù)

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[器材和試劑]●PCR試劑和設(shè)備。除了用Taq聚合酶緩沖液替代Vent聚合酶緩沖液。各自在適宜緩沖液中保存的Tdg聚合酶,均可使用?!馰區(qū)特異性正向(3’)(JκFORNot和JλFORNot)和反向(5’)(VHBACKSfiPCR引物●已組裝的scFv基因文庫●WizardPCR純化試劑盒(Promega)[方法]1.在0.5ml微量離心管中,配制兩個50/z1PCR反應(yīng)混合液(1個用于VHVκscFv文庫,另1個用于VuVλscFv文庫),其中含有:●水,36.5//1●10XTag緩沖液,5.0ul●20XdNTP,2.5ul●正向引物,2.0ul●反向引物,2.0ul●scFv基因文庫(約long),1.0ul2.在熱循環(huán)儀格內(nèi)加熱反應(yīng)管到94℃,5分鐘。如果沒有加熱蓋,則滴加1滴輕質(zhì)礦物油覆蓋反應(yīng)液。3.加入1.0ul(5單位)TdQDNA聚合酶。4.以94℃1分鐘、55℃1分鐘、72℃1分鐘的條件共循環(huán)25次,擴(kuò)增scFv基因。5.用WizardPCR純化試劑盒,純化PCR產(chǎn)物。www.shjsbio.com

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