資料庫
關于做ELISA試劑盒過程中
-
本文由 研域生物技術(上海)有限公司 整理匯編
2018-11-05 10:00 203閱讀次數(shù)
文檔僅可預覽首頁內(nèi)容,請下載后查看全文信息!
-
立即下載
關于做ELISA試劑盒過程中,難免會遇到各種不同的問題,比如標準曲線不好,試劑盒的回收率,假陰性,假陽性,實驗的重復性不好等等?,F(xiàn)在我司就來一一解答用戶們在實驗過程中遇到的各種疑問!ELISA試劑盒曲線問題:1,與曲線好壞相關,,保證曲線的正常2,衍生化試劑原因(長時間衍生化試劑變質(zhì)),更換衍生化試劑3.OD值不正常試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃溫度控制不好,控制正確溫度孵育時間不準確,控制孵育時間洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增加,洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干陽光直射,對著風直接吹,避風避酶標儀的波長錯誤,酶標儀的波長450nm抗體的稀釋錯誤,正確的稀釋抗體水質(zhì)問題,用娃哈哈礦泉水代替4.白板洗滌液配制錯誤,正確的配制洗滌液少加液體(錯加液體),正確的步驟加液體5,儀器試劑原因離心管未清洗干凈,正確的洗滌器具有機溶劑的影響,做試劑空白看影響結(jié)果6.無梯度標準品也污染,換標準品點板OD值不正常,控制溫度時間在做一次人為點板,不要點板7.線性不好OD值不正常,控制溫度時間在做一次ELISA試劑盒回收率8.空白管陽性高樣本本身就是陽性樣本,換陰性樣本做回收率空白管在實驗中被污染,實驗中防止交叉污染水質(zhì)原因用,娃哈哈礦泉水代替9.偏高添加量不準確,極ng準的添加量添加濃度不適合,添加合適的濃度取液吹干量多,準確的取液吹干取到其它相層液體,取需用相吹干復溶液未稀釋或加入量少,正確的稀釋復溶液10.偏低添加量不準確,極ng準的添加量添加濃度不適合,添加合適的濃度取液吹干量少,準確的取液吹干復溶液稀釋錯誤或加入量多,正確的稀釋復溶液假陰、陽性11,水質(zhì)原因:點復溶液驗證,用娃哈哈礦泉水代替12,實驗操作原因吸取到其它相吹干,準確的取液吹干離心不徹底,延長離心時間樣本的污染,更換樣本乳化未處理完全,溫?。?0℃)處理乳化現(xiàn)象
登錄或新用戶注冊
請用手機微信掃描下方二維碼
快速登錄或注冊新賬號
微信掃碼,手機電腦聯(lián)動
更多資料
-
關于做ELISA試劑盒過程中
- 關于做ELISA試劑盒過程中,難免會遇到各種不同的問題,比如標準曲線不好,試劑盒的回收率,假陰性,假陽性,實驗的重復性不好等等?,F(xiàn)在我司就來一一解答用戶們在實驗過程中遇到的各種疑問!ELISA試劑盒曲線問題:1,與曲線好壞相關,,保證曲線的正常2,衍生化試劑原因(長時間衍生化試劑變質(zhì)),更換衍生化試劑3.OD值不正常試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃溫度控制不好,控制正確溫度孵育時間不準確,控制孵育時間洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增加,洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干陽光直射,對著風直接吹,避風避酶標儀的波長錯誤,酶標儀的波長450nm抗體的稀釋錯誤,正確的稀釋抗體水質(zhì)問題,用娃哈哈礦泉水代替4.白板洗滌液配制錯誤,正確的配制洗滌液少加液體(錯加液體),正確的步驟加液體5,儀器試劑原因離心管未清洗干凈,正確的洗滌器具有機溶劑的影響,做試劑空白看影響結(jié)果6.無梯度標準品也污染,換標準品點板OD值不正常,控制溫度時間在做一次人為點板,不要點板7.線性不好OD值不正常,控制溫度時間在做一次ELISA試劑盒回收率8.空白管陽性高樣本本身就是陽性樣本,換陰性樣本做回收率空白管在實驗中被污染,實驗中防止交叉污染水質(zhì)原因用,娃哈哈礦泉水代替9.偏高添加量不準確,極ng準的添加量添加濃度不適合,添加合適的濃度取液吹干量多,準確的取液吹干取到其它相層液體,取需用相吹干復溶液未稀釋或加入量少,正確的稀釋復溶液10.偏低添加量不準確,極ng準的添加量添加濃度不適合,添加合適的濃度取液吹干量少,準確的取液吹干復溶液稀釋錯誤或加入量多,正確的稀釋復溶液假陰、陽性11,水質(zhì)原因:點復溶液驗證,用娃哈哈礦泉水代替12,實驗操作原因吸取到其它相吹干,準確的取液吹干離心不徹底,延長離心時間樣本的污染,更換樣本乳化未處理完全,溫?。?0℃)處理乳化現(xiàn)象[詳細]
-
2018-11-05 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
關于真假elisa試劑盒的警示
- 國內(nèi)Elisakit的嚴重問題警示:Elisa試劑盒假貨猖獗,70%以上人買到的elisa試劑盒是假貨(保守估計)1:號稱國產(chǎn),但“生產(chǎn)廠家名稱"不敢印制在試劑盒上的,肯定假貨。2:凡進口分裝的,肯定假貨。Z常見造假:一次性生產(chǎn)上千個同一種試劑盒(如:TGF-β),當你要什么指標,他們就打上對應指標的標簽,冒充你要的那個賣給你。TGF-β在大多數(shù)哺乳類動物中(人、大鼠、小鼠、豬、?!┒加袕V泛表達,種屬間抗原的氨基酸序列同源性達1**%,TGF-β隨著其他因子的影響,表達水平也發(fā)生相應變化。你要購買什么待測指標,造假者事先設計好結(jié)果,拿到試劑盒后,只要做了測的過程,就能得出對應的數(shù)據(jù)。不管你的樣本是什么,肯定能做出試驗結(jié)果,標準曲線也很好,待測品也會顯色,實驗者很容易就被欺騙。[詳細]
-
2018-09-04 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
BZY系列自動表面張力儀測試過程中應做的準備
- BZY系列自動表面張力儀測試過程中應做的準備BZY系列自動表面張力儀恰好為客戶進行表面張力方面的研究提供了完善的解決方案。它wan美的“在線性”,完全能夠測出因溶液時間變化或表面活性劑存在而出現(xiàn)的變化值,為確保檢測的準確性,測試過程中應做好如下工作:當白金板/環(huán)或玻璃皿不干凈時,測量值會有所誤差,而且再現(xiàn)性較差,數(shù)值忽大忽小或持續(xù)增加或持續(xù)減小,所以應力求保持干凈。舉例而言,比如在測水的過程中使用者將手指輕輕點水,本儀器立即會顯示出變化了的較小的張力值,這是是因為人的手有油,改變了水的表面特性。本儀器已經(jīng)對密度作了一定的修正。如果需要保證測試的結(jié)果的更極ng確,請參考附件中的修正表進行修正。為了達到測試精度要求,本公司的白金板均為特殊訂制,表面進行了特殊的粗糙度處理。因此應避免白金板表明的劃傷和磨損。如果使用者自行更換而無法測量準確時,本公司不負任何責任。根據(jù)物理化學原理,事實上在測試過程中對測值有影響的自然條件有(1)溫度;(2)氣壓.測量高揮發(fā)性液體時應加快測試過程,高揮發(fā)性液體在測量時很容易粘著在白金板上,請在做重復性測試前將白金板清洗干凈。測量時發(fā)生蒸發(fā)現(xiàn)象時,表面張力值會隨時間的變化而升高。雖然玻璃皿中被測液體的多少不會影響到測值的準確性,但為了妥善起見,請確保液體有5mm高度,約15ml左右。添加表面活性劑以作表面張力變化觀察時,請確保不要將表面活性劑碰到白金板。測量過程中樣品臺的上升或下降均會影響到表面張力值,上升時減小,下降時增加。兩者都是誤差的表現(xiàn)之一。[詳細]
-
2018-10-07 10:02
產(chǎn)品樣冊
-
關于移液器使用及校準過程中影響因素分析
- 隨著現(xiàn)代化工、生物、制藥等行業(yè)的迅速發(fā)展,使得移液器的應用得到了推廣。移液器是一種有效的控制設備,但是若沒有遵守操作規(guī)范,容易導致移液量不極ng準,從而影響到其使用效應。 文章主要針對移液器使用及校準過程中影響因素進行分析。[詳細]
-
2018-08-29 17:18
標準
-
凍干機品牌定位:做自己還是做別人?
- 凍干機品牌定位:做自己還是做別人?[詳細]
-
2015-11-27 00:00
選購指南
-
代測/代做,人高遷移率族蛋白B1(HMGB1)ELISA檢測試劑盒說明書
- 代測/代做,人高遷移率族蛋白B1(HMGB1)ELISA檢測試劑盒說明書此說明書為PDF格式,請下載參閱!謝謝DR0876人尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humanurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAkitDR0877人FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKitDR0878人FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt-3L)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanFMS-liketyrosinekinase3ligand,Flt-3LELISAKitDR0879人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanAtrialNatriureticPeptide,ANPELISAKitDR0880人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanplateletmembraneglycoproteinⅣ,GP-ⅣELISAKitDR0881人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanApolipoproteinE,Apo-EELISAKitDR0882人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Human8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISAKitDR0883人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humanproteolipidprotein,PLPELISAKitDR0884人循環(huán)免疫復合物(CIC)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humancirculatingimmunecomplex,CICELISAKitDR0885人血小板相關抗體IgM(PA-IgM)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanPlateletassociatedantibody,PA-IgMELISAKitDR0886人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(angiostatin)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanangiostatinELISAKitDR0887人纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanPlasminogen,PlgELISAKitDR0888人血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanBradykinin,BKELISAKitDR0889人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humanlupusanticoagulant,LAC/LAELISAKitDR0890人抗磷脂抗體(Apl/APA)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humananti-phospholipidantibody,Apl/APAELISAKitDR0891人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanHomocysteicacid,HcyELISAKitDR0892人apelin12(AP12)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humanapelin12,AP12ELISAKitDR0893人超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKitDR0894人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Human15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISAKitDR0895人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanTroponinⅠ,Tn-ⅠELISAKitDR0896人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanSerumamyloidA,SAAELISAKitDR0897人過敏毒素/補體片斷4(C4a)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanComplementfragment4a,C4aELISAKitDR0898人補體片斷5a(C5a)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanComplementfragment5a,C5aELISAKitDR0899人補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanComplementfragment3a,C3aELISAKitDR0900人糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKitDR0901人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKitDR0902人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKitDR0903人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humancardiotrophln1,CT-1ELISAKitDR0904人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humanlipoproteinα,Lp-αELISAKitDR0905人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKitDR0906人纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humanplasmin-antiplasmincomplex,PAPELISAKitDR0907人凝血酶抗凝血酶復合物(TAT)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humanthrombin-antithrombincomplex,TATELISAKitDR0908人抗凝血酶受體(ATR)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humananti-thrombinreceptor,ATRELISAKitDR0909人凝血酶受體(TR)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humanthrombinreceptor,TRELISAKitDR0910人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKitDR0911人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanN-terminalpro-brainnatriureticpeptide,NT-proBNPELISAKITDR0912人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanProAtrialNatriureticPeptide,Pro-ANPELISAKitDR0913人大內(nèi)皮素(BigET)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanBigEndothelin,BigETELISAKitDR0914人肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanMyoglobin,MYO/MBELISAKitDR0915人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumancardiactroponinⅠ,cTn-ⅠELISAKitDR0916人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書Humananti-immunodeficiencyvirusantibody,HIVELISAKitDR0917人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠ-Ab)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanHerpessimplexvirusⅠantibody,HSVⅠ-AbELISAKitDR0918人乳頭狀瘤病毒抗體(HPV)ELISA試劑盒Humanpapillomavirus,HPVELISAKitDR0919人乳頭狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanpapillomavirusIgM,HPV-IgMELISAKitDR0920人乳頭狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKitDR0921人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA試劑盒/kit價格北京elisa說明書HumanHerpessimplexvirus2,HSV-Ag2ELISAKit北京免疫組化試劑盒報價價格,elisa試劑盒進口原裝北京供應商,北京生物緩和液報價,北京生物緩和液現(xiàn)貨供應,北京酶和輔酶報價,北京酶和輔酶現(xiàn)貨供應,北京免疫組化試劑盒報價價格代做,北京抗生素供應商,北京ELISA檢測試劑盒進口原裝哪里有,北京酶聯(lián)免疫試劑盒技術咨詢,北京染色劑價格,北京進口原裝ELISA試劑盒哪里有[詳細]
-
2018-09-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
用引伸計做拉伸試驗
- 用引伸計做拉伸試驗[詳細]
-
2013-05-15 00:00
產(chǎn)品樣冊
-
做鹽霧試驗的作用
- 做鹽霧試驗的作用[詳細]
-
2012-07-04 00:00
安裝說明
-
博醫(yī)康凍干機品牌定位:做自己還是做別人?
- 博醫(yī)康凍干機品牌定位:做自己還是做別人?[詳細]
-
2015-06-08 00:00
應用文章
-
關于傅里葉變換
- 關于傅里葉變換[詳細]
-
2008-05-08 00:00
課件
-
關于頁巖
- 關于頁巖[詳細]
-
2015-04-13 00:00
課件
-
關于連接件
- 關于連接件[詳細]
-
2014-05-14 00:00
課件
-
關于辛烷值
- 辛烷值是表示汽油抗爆性的項目。抗爆性是指汽油在發(fā)動機內(nèi)(在汽油發(fā)動機中,燃料是靠電火花點燃而燃燒,故汽油機也可稱作點燃式發(fā)動機)燃燒時防止發(fā)生爆震的能力。爆震是汽油發(fā)動機中一種不正常的燃燒現(xiàn)象,爆震燃燒時,發(fā)動機會發(fā)生強烈震動,并發(fā)出金屬敲擊聲,隨即功率下降,排氣管冒黑煙,耗油量增多,嚴重的爆震會使發(fā)動機零件毀損。中紅外汽油分析儀美國培安公司詳情請瀏覽http://www.pynnco.com,或咨詢:電話:010-65528800,傳真:010-65519722,郵件sales@pynnco.com[詳細]
-
2018-08-17 10:00
產(chǎn)品樣冊
-
大鼠白細胞介素1β試劑盒在操作過程中的注意事項
- 在elisa實驗的操作過程中,某些方面是不能忽視的,一定要注意,它也決定了實驗會不會成功的關鍵,下面我們一起來分析下要注意的地方:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。[詳細]
-
2018-11-16 10:02
產(chǎn)品樣冊
-
怎樣做準質(zhì)控樣
- 怎樣做準質(zhì)控樣[詳細]
-
2015-07-23 00:00
安裝說明
-
利用LaChromUltra做超高速分析
- 利用LaChromUltra做超高速分析[詳細]
-
2024-09-28 23:21
專利
-
KB-WAX 做雜醇油
- KB-WAX 做雜醇油[詳細]
-
2024-09-15 17:51
期刊論文
-
鹽霧試驗箱做鹽霧試驗滿足標準
- 鹽霧試驗箱做鹽霧試驗滿足標準[詳細]
-
2024-09-28 21:18
報價單
-
為什么要用光致發(fā)光做測試
- 為什么要用光致發(fā)光做測試[詳細]
-
2024-09-20 13:31
實驗操作
-
中英文Elisa試劑盒,干擾素(IFN-α)Elisa試劑盒雞Elisa試劑盒試劑盒使用說明書
- 雞α干擾素(IFN-α)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定雞血清,血漿及相關液體樣本中α干擾素(IFN-α)的含量。代做ELISA試劑盒,代測elisa試劑盒,上海廣銳生物科技有限公司實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞α干擾素(IFN-α)水平。用純化的雞α干擾素(IFN-α)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入α干擾素(IFN-α),再與HRP標記的羊抗雞抗體體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α干擾素(IFN-α)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中雞α干擾素(IFN-α)含量。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品:54ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為30ng/L,20ng/L,10ng/L,5ng/L,2.5ng/L)。2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%檢測范圍:2ng/L-40ng/L保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
-
2018-10-23 10:31
產(chǎn)品樣冊
Copyright 2004-2026 yiqi.com All Rights Reserved , 未經(jīng)書面授權 , 頁面內(nèi)容不得以任何形式進行復制
參與評論
登錄后參與評論