本文由 上海希美化學(xué)有限公司 整理匯編

2014-08-21 00:00 308閱讀次數(shù)

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  糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標(biāo)本：體液糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒試驗原理：BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知BFGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將BFGF和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細(xì)胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guān)系。糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒操作注意事項1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2．實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7．底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9．按照中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。糖合酶3(CHSY3)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的BFGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的BFGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-800pg/ml4、敏感度：1.0pg/mlUP人尿蛋白規(guī)格：48T/96TGDI人鳥苷酸解離YZ因子規(guī)格：48T/96TGEF人鳥苷酸交換因子規(guī)格：48T/96TODC人鳥氨酸脫羧酶規(guī)格：48T/96TODC人鳥氨酸脫羧酶規(guī)格：48T/96TOCT人鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶規(guī)格：48T/96TFAK人黏著斑激酶規(guī)格：48T/96TMAdCAM-1人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子規(guī)格：48T/96TBDNF人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子規(guī)格：48T/96TBNP人腦鈉素/腦鈉尿肽規(guī)格：48T/96TNGB人腦紅蛋白規(guī)格：48T/96TENK人腦啡肽規(guī)格：48T/96TBGP/Gehrelin人腦腸肽規(guī)格：48T/96Tvisfatin人內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素規(guī)格：48T/96Tvaspin人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶YZ劑規(guī)格：48T/96TEL人內(nèi)皮脂肪酶規(guī)格：48T/96T[詳細(xì)]

  2018-10-09 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 小鼠檸檬酸合酶（CS）elisa試劑盒說明書

  小鼠檸檬酸合酶（CS）elisa試劑盒說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠檸檬酸合酶（CS）水平。用純化的小鼠檸檬酸合酶（CS）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入檸檬酸合酶（CS），再與HRP標(biāo)記的檸檬酸合酶（CS）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的檸檬酸合酶（CS）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠檸檬酸合酶（CS）濃度。小鼠檸檬酸合酶（CS）elisa試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（64U/mL）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。小鼠檸檬酸合酶（CS）elisa試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。32U/mL5號標(biāo)準(zhǔn)品150l的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液16U/mL4號標(biāo)準(zhǔn)品150l的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液8U/mL3號標(biāo)準(zhǔn)品150l的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液4U/mL2號標(biāo)準(zhǔn)品150l的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2U/mL1號標(biāo)準(zhǔn)品150l的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50l，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l，然后再加待測樣品10l（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50l，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50l，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。小鼠檸檬酸合酶（CS）elisa試劑盒注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照小鼠檸檬酸合酶（CS）elisa試劑盒說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃。2．有效期：6個月[詳細(xì)]

  2018-11-23 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA Kit說明書

  人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]

  2014-08-21 00:00

  操作手冊

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• 人血紅素氧合酶1(HO1)ELISA試劑盒

  人血紅素氧合酶1(HO1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2015-03-18 00:00

  報價單

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• 人血紅素氧合酶2(HO2)ELISA試劑盒

  人血紅素氧合酶2(HO2)ELISA試劑盒[詳細(xì)]

  2024-09-28 00:42

  安裝說明

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• 人甲狀腺素(T4)ELISA Kit說明書

  人甲狀腺素(T4)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]

  2014-09-02 00:00

  報價單

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• 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA Kit說明書

  人堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]

  2014-08-22 00:00

  專利

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• 人降鈣素(CT)ELISA Kit說明書

  人降鈣素(CT)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]

  2014-08-22 00:00

  安裝說明

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• 人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA Kit說明書

  人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]

  2014-08-22 00:00

  實驗操作

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• 人降脂素ELISA Kit說明書

  人降脂素ELISA Kit說明書[詳細(xì)]

  2014-08-22 00:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA Kit說明書

  人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]

  2014-08-22 00:00

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• 人金屬硫蛋白(MT)ELISA Kit說明書

  人金屬硫蛋白(MT)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]

  2014-08-22 00:00

  其它

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