全部評(píng)論(1條)
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- fsq9264543 2018-04-03 00:00:00
- 熒光屬于光致發(fā)光,需選擇合適的激發(fā)光波長(zhǎng)(Ex)以利于檢測(cè)。激發(fā)波長(zhǎng)可通過(guò)熒光化合物的激發(fā)光譜來(lái)確定。激發(fā)光譜的具體檢測(cè)辦法是通過(guò)掃描激發(fā)單色器,使不同波長(zhǎng)的入射光激發(fā)熒光化合物,產(chǎn)生的熒光通過(guò)固定波長(zhǎng)的發(fā)射單色器,由光檢測(cè)元件檢測(cè)。Z終得到熒光強(qiáng)度對(duì)激發(fā)波長(zhǎng)的關(guān)系曲線就是激發(fā)光譜。在激發(fā)光譜曲線的Z大波長(zhǎng)處,處于激發(fā)態(tài)的分子數(shù)目Z多,即所吸收的光能量也Z多,能產(chǎn)生Z強(qiáng)的熒光。當(dāng)考慮靈敏度時(shí),測(cè)定應(yīng)選擇Z大激發(fā)波長(zhǎng)。 熒光激發(fā)波長(zhǎng)對(duì)應(yīng)于某一個(gè)紫外可見(jiàn)光譜吸收波長(zhǎng),可能稍大一些,不完全相等。你可以將紫外吸收波長(zhǎng)設(shè)為激發(fā)波長(zhǎng),掃描發(fā)射光譜,然后再固定發(fā)射波長(zhǎng)掃描激發(fā)光譜,得到Z大激發(fā)波長(zhǎng),再做發(fā)射光譜,再做激發(fā)光譜,一直到得到固定不變的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)為止。 紫外吸收波長(zhǎng)可以作為激發(fā)波長(zhǎng),激發(fā)波長(zhǎng)的選擇不影響發(fā)射波長(zhǎng)的選擇,理論上激發(fā)光譜和發(fā)射光譜有一個(gè)鏡像關(guān)系,很多人就誤以為,激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)時(shí)一一對(duì)應(yīng)的,其實(shí)不然,激發(fā)光譜的強(qiáng)弱只代表該物質(zhì)在所選擇的激發(fā)波長(zhǎng)下被激發(fā)的比率,其發(fā)射光譜還是原來(lái)形狀的光譜,只是在強(qiáng)弱上改變.我們選擇Z大激發(fā)波長(zhǎng)是為了獲得高激發(fā)率的物質(zhì)形態(tài),間接提高靈敏度,選擇Z大發(fā)射波長(zhǎng)是為了直接提高靈敏度,
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