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極性好小且很接近,過柱子分離需要注意哪些

wayaan313 2017-01-02 03:43:05 398  瀏覽
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參與評論

全部評論(1條)

  • kingkou2 2017-01-03 00:00:00
    1、慢速好些2、濕法或干法裝柱子都一樣3、柱子長些的好,使用較小極形的展開劑,用較長的柱子慢慢過。選擇展開劑方法:找個較小的極性反復(fù)多爬幾次板,看看如果5-6次以下即可看到些許分離,即可選用該展開劑。

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我們實驗室的空調(diào)形同虛設(shè),目前溫度為35度左右吧。我用二氯甲烷混合硅膠裝柱,攪拌均勻,裝好以后很容易產(chǎn)生氣泡,下部還會越來越多的雪花狀,覺得是干了的硅膠,還會斷層,瘋掉了。... 我們實驗室的空調(diào)形同虛設(shè),目前溫度為35度左右吧。我用二氯甲烷混合硅膠裝柱,攪拌均勻,裝好以后很容易產(chǎn)生氣泡,下部還會越來越多的雪花狀,覺得是干了的硅膠,還會斷層,瘋掉了。。。??照{(diào)就別想了,想找個辦法給柱子降溫,師姐說可以放冰袋在柱子旁邊之類的,但總感覺作用也不大吧。。我的洗脫劑是二氯甲烷和甲醇的混合,初始洗脫劑是二氯甲烷,后面逐漸加大甲醇的比例。。 請各位大俠支支招啊。。。 展開
2018-06-10 06:22:46 635 1
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柱子能否達(dá)到所需的分離速度?

ACE Excel為UHPLC帶來了享有盛譽(yù)的ACE HPLC性能

重要的是要認(rèn)識到色譜柱的選擇性和柱效是獨立的變量,在開發(fā)分離方法時您不必選擇使用一種而不使用另一種。事實上,為了實現(xiàn)Z佳的總體分離效果,您應(yīng)當(dāng)對上述兩個變量以及保留值進(jìn)
行優(yōu)化。當(dāng)需要實現(xiàn)高速分離時尤其如此。(參見圖7)


圖 7:利用柱效和鍵合相選擇性來開發(fā)更快的分離方法

條件:
流動相:

A = 5mM甲酸(0.189)ml / L;
A = 5mM甲酸(溶于甲醇中)
柱溫:40℃
檢測:PDA, 254nm

樣品:
1. 阿司匹林
2. 非那西丁
3. 1,3-二硝基苯
4. 苯甲酸乙酯

5. 尼美舒利
6. 布洛芬
7. 吲哚美辛


利用UHPLC色譜柱更高的柱效,可在更高的流動相流速下使用更短的色譜柱,以使這種混合物的分離時間縮短80%(相比HPLC色譜柱)。
然而,也可以通過優(yōu)化鍵合相的選擇性來進(jìn)一步縮短分離時間,在這個案例中,就是利用了C18-PFP鍵合相所具有的增強(qiáng)的選擇性。

與C18UHPLC色譜柱、C18 HPLC色譜柱相比,ACE Excel C18-PFP UHPLC色譜柱分別將混合物的分離時間縮短了80%以上以及96%,同時保持了所有峰的分離度。


ACE Excel UHPLC色譜柱的設(shè)計旨在充分利用低擴(kuò)散、超高壓UPLC?和UHPLC儀器(高達(dá)1000 bar),并可與所有市售UPLC和UHPLC系統(tǒng)相兼容。
ACE Excel UHPLC色譜柱可以為堿性化合物提供更佳的峰形,改善柱子與柱子之間的重現(xiàn)性,提供額外的利用多種分離機(jī)制的固定相,以及改善色譜柱的耐用性。

ACE Excel UHPLC色譜柱的可用性意味著色譜分析師在使用UPLC和UHPLC儀器時有更多的選擇來獲得更好的結(jié)果。


圖 8:ACE Excel色譜柱提供快速、高分辨率的分離

條件
色譜柱:ACE Excel C18, 2 μm, 3.0 x 50 mm
流動相:60秒內(nèi)從30%B至B
A =水+ 0.1%TFA B =乙腈
流速:2.5 mL/min
柱溫:40oC
壓力:703 bar (10,335 psi)
檢測:PDA, 254 nm
儀器:安捷倫1290 UHPLC
化合物
1. 乙酰苯胺
2. 苯乙酮
3. 苯丙酮
4. 苯丁酮
5. 二苯甲酮
6. 苯戊酮
7. 苯己酮
8. 苯庚酮
9. 苯辛酮

ACE Excel C18色譜柱可在不到60秒內(nèi)提供這9種分析物的基線分離。


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