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  月夜火牙 2017-08-04 00:00:00

  游泳池水中大腸菌群檢驗(yàn)方法： 一、大腸菌群多管發(fā)酵法測定 1定義 大腸菌群（coliform bacteria）系指一群在36±1℃培養(yǎng)24h能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。 2 儀器 見《公共場茶具的大腸菌群測定方法》。 3培養(yǎng)基和試劑 3.1乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 3.1.1成分：蛋白胨 10g，牛肉膏 2g，乳糖 5g，氯化鈉 5g，1.6%（V/V）溴甲酚紫乙醇溶液 1mL，蒸餾水 1000mL 三.倍濃縮乳糖蛋白胨培養(yǎng)液按上述乳糖蛋白胨培養(yǎng)液濃縮三倍配制。 3.1.2配法：將蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化鈉置于1000ml蒸餾水中加熱溶解，調(diào)pH到]7.2～7.4。再加入1ml 1.6%溴甲酚指示劑，充分混勻，分裝到含有倒管的試管中，115℃高壓滅菌15min。 3.2伊紅美蘭瓊脂 見《公共場所茶具的大腸菌群測定方法》。 3.3革蘭氏染色液 風(fēng)《公共場所茶具的大腸菌群測定方法》。 3.4染色法 見《公共場所茶具的大腸菌群測定方法》。 4推測性試驗(yàn) 4.1在2個裝有50ml三倍濃縮乳糖膽鹽培養(yǎng)液的大試管或燒杯內(nèi)各加入水樣100ml。 4.2在10支裝有5ml三倍濃縮乳糖膽鹽培養(yǎng)液的試管里各加入水樣10ml。 4.3輕搖試管，使液體充分混勻，置36±1℃培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24h。 4.4觀察每管是否產(chǎn)氣，如不產(chǎn)氣則報告為大腸菌群陰性；若有氣體產(chǎn)生則為推測性試驗(yàn)陽性，需做進(jìn)一步的證實(shí)試驗(yàn)。 5證實(shí)試驗(yàn) 5.1平板分離 自推測性檢驗(yàn)陽性管中取一接種環(huán)培養(yǎng)液，接種到伊紅美藍(lán)瓊脂平板上，置36±1℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)18～24h，觀察菌落形態(tài)，典型的大腸菌群菌落為黑紫色或紅紫色，具有金屬光澤。 5.2復(fù)發(fā)酵試驗(yàn) 挑取可疑大腸菌群菌落1或2個進(jìn)行革蘭氏染色，同時接種乳糖發(fā)酵管，于36±1℃培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24h。 5.3凡乳糖發(fā)酵管Z終產(chǎn)酸產(chǎn)氣，革蘭氏染色為陰性的Z大可能數(shù)（MPN）檢索表得出1000ml水樣中總大腸菌群的MPN值。

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