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- qdfine 2017-11-25 00:00:00
- 實驗原理： 紙層析法（paper chromatography）是生物化學(xué)上分離、鑒定氨基酸混合物的常用技術(shù)，可用于蛋白質(zhì)的氨基酸成分的定性鑒定和定量測定?！ 〖垖游龇ㄓ址Q紙色譜法，是用濾紙為支持物，所用展層溶劑大多由水和有機(jī)溶劑組成，濾紙纖維與水的親和力強(qiáng)，與有機(jī)溶劑的親和力弱，因此在展層時，紙纖維上吸附的水分是固定相，有機(jī)溶劑是流動相。溶劑由下向上移動的，稱上行法；由上向下移動的，稱下行法。將樣品點(diǎn)在濾紙上(此點(diǎn)稱為原點(diǎn))，進(jìn)行展層，樣品中的各種氨基酸在兩相溶劑中不斷進(jìn)行分配?！ ∮捎谒鼈兊姆峙湎禂?shù)不同，不同氨基酸隨流動相移動的速率就不同，于是就將這些氨基酸分離開來，形成距原點(diǎn)距離不等的層析點(diǎn)。 引申： 氨基酸的定性鑒別：紫外吸收光譜法 精密稱取酪氨酸、色氨酸、苯內(nèi)氨酸各適量，分別用水制成1ml含20μg（色氨酸）、40μg（酪氨酸）、200μg（苯丙氨酸），在波長230~300nm測定各氨基酸的吸收光譜。 在20種天然氨基酸中，只有酪氨酸、色氨酸和苯內(nèi)氨酸，在紫外區(qū)Z大吸收，酪氨酸的Z大吸收峰的波長275nm處，色氨酸的Z大吸收峰在波長280nm處，同時在波長288nm處有一個肩峰，苯丙氨酸Z大的吸收峰在波長258nm處，同時在257nm和264nm處有兩個較小的吸收峰。由此可見，這三種氨基酸可以通過紫外吸收光譜加以鑒別。
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