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  狂愛(ài)佐 2013-11-25 00:00:00

  GX液相色譜法是以液體作為流動(dòng)相，借助于高壓輸液泵獲得相對(duì)較高流速的液流以提高分離速度、并采用顆粒極細(xì)的GX固定相制成的色譜柱進(jìn)行分離和分析的一種色譜方法。 在GX液相色譜中，若采用非極性固定相，如十八烷基鍵合相，極性流動(dòng)相，即構(gòu)成反相色譜分離系統(tǒng)。反之，則稱為正相色譜分離系統(tǒng)。反相色譜系統(tǒng)所使用的流動(dòng)相成本較低，應(yīng)用也更為廣泛。 ZG是茶的故鄉(xiāng)，制茶、飲茶已有幾千年歷史，名品薈萃，主要品種有綠茶、紅茶、烏龍茶、花茶、白茶、黃茶。茶有健身、治疾之藥物L(fēng)X，又富欣賞情趣，可陶冶情操。 茶葉的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥理作用是與它的化學(xué)成分分不開(kāi)的。它的化學(xué)組成約有四百多種，其中對(duì)人體營(yíng)養(yǎng)價(jià)值與藥理作用關(guān)系比較密切的是多酚類、生物堿和維生素。 茶多酚類物質(zhì)是茶葉主要的呈味物質(zhì)，苦味。茶葉中含量比較高，總量占干茶物質(zhì)的18％～36％，是茶葉YY價(jià)值的Z主要的物質(zhì)基礎(chǔ)，具有降血脂、抗腫瘤、抗脂質(zhì)過(guò)氧化、KJ和抗病毒、調(diào)節(jié)免疫功能等功效。茶多酚實(shí)際上是多種多酚類化合物的總稱，其中Z重要的是兒茶素類化合物，它占茶多酚總量的50％～70％。 茶葉指紋圖譜是利用茶內(nèi)含物質(zhì)的秘密、茶樹(shù)遺傳的密碼、用圖譜的方式來(lái)表述具有不同特性的茶葉，可包含種類、產(chǎn)區(qū)、樹(shù)齡、特性、制成品的年份等。本實(shí)驗(yàn)用HPLC對(duì)茶葉的主要成分進(jìn)行分離，是建立茶葉指紋圖譜的基礎(chǔ)。 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中有可能會(huì)帶入一些雜質(zhì)，因此實(shí)驗(yàn)結(jié)束后必須清洗柱子。 三、儀器與試劑 1. 儀器： Agilent1100 GX液相色譜儀， 50ul微量注射器。 2. 試劑： （1）甲醇 色譜純。 （2）乙腈 色譜純。 （3）甲酸 分析純。 四、實(shí)驗(yàn)步驟 1、色譜條件 色譜柱：色譜柱：XB-Phenyl ，5μm，4.6x150mm 柱溫：室溫 流動(dòng)相：乙腈 1%甲酸 /% 檢測(cè)器：DAD。 檢測(cè)波長(zhǎng)：276nm 進(jìn)樣體積：20??l定量環(huán)，實(shí)際注射每次可控制在50??l。 梯度洗脫： 2、待測(cè)溶液的配制 取兩種不同的綠茶，分別標(biāo)記為綠茶1、綠茶2。各取約0.8000g，用50ml沸水沖泡，分別在10min、30min取上清液，過(guò)0.45μm濾頭，即得樣品1（綠茶1沖泡10min）、樣品2（綠茶1沖泡30min）、樣品3（綠茶2沖泡10min）、樣品4（綠茶2沖泡30min）。 4、色譜測(cè)定 (1) 按操作規(guī)程開(kāi)啟電腦，開(kāi)啟脫氣機(jī)、泵、檢測(cè)器等的電源，啟動(dòng)Agilent 1100在線工作軟件，設(shè)定操作條件。流量為1.00ml/min。 (2) 待儀器穩(wěn)定后，開(kāi)始進(jìn)樣。將進(jìn)樣閥柄置于“LOAD”位置，用微量注射器吸取混合物溶液50ul，注入儀器進(jìn)樣口，順時(shí)針?lè)较虬鈩?dòng)進(jìn)樣閥至“INJECT”位置，此時(shí)顯示屏顯示進(jìn)樣標(biāo)志。 (3) 記下各組分色譜峰的保留時(shí)間及峰面積。并將測(cè)試報(bào)告打印成htm式，以便直接貼到實(shí)驗(yàn)報(bào)告中。 (4) 實(shí)驗(yàn)完畢，清洗系統(tǒng)及色譜柱。

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