2020年《國(guó)家食品安全監(jiān)督抽檢實(shí)施細(xì)則》(簡(jiǎn)稱國(guó)抽)與2019年相比，在茶葉的檢驗(yàn)項(xiàng)目中，刪除了除蟲脲、多菌靈、甲氰菊 酯、滴滴涕和特丁硫磷的檢測(cè)，新增了內(nèi)吸磷、乙酰甲胺磷、丙溴磷、毒死蜱和莠去津的檢驗(yàn)項(xiàng)目。

導(dǎo)讀

　　迪馬科技按照2020年版國(guó)抽細(xì)則的要求，參考《GB 23200.13-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 茶葉中448種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜法》、《GB/T 23204-2008 茶葉中519種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜法》、《GB 23200.113-2018 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》、《SN/T 4655-2016 出口食品中草甘膦及其代謝物殘留量的測(cè)定方法 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，采用SPE、QuEChERS結(jié)合GC-MS、UPLC-MS/MS建立了一系列茶葉中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法，系列方法中涵蓋了所有2020版國(guó)抽細(xì)則中茶葉檢驗(yàn)項(xiàng)目下的農(nóng)藥，可供廣大分析工作者參考！

方法匯總

SPE-UPLC-MS/MS法

克百威、滅多威、3-羥基克百威、茚蟲威、甲胺磷、氧樂(lè)果、啶蟲脒、吡蚜酮、吡蟲啉和內(nèi)吸磷(O+S)

QuEChERS-UPLC-MS/MS法

克百威、滅多威、3-羥基克百威、茚蟲威、甲胺磷、乙酰甲胺磷、敵百 蟲、氧樂(lè)果、啶蟲脒、吡蟲啉和內(nèi)吸磷(O+S) 

SPE-GC-MS法

內(nèi)吸磷(O+S)、滅線磷、甲拌磷、莠去津、氯唑磷、甲拌磷亞砜、甲拌磷砜、毒死蜱、三氯殺螨醇、水胺硫磷、丙溴磷、聯(lián)苯菊酯、氯氰菊酯和GX氯氰菊酯、氰戊菊酯和S-氰戊菊酯

SPE-UPLC-MS/MS法

氨甲基膦酸和草甘膦

方法一：SPE-UPLC-MS/MS法

01 適用范圍

本方法適用于茶葉中的克百威、滅多威、3-羥基克百威、茚蟲威、甲胺磷、氧樂(lè)果、啶蟲脒、吡蚜酮、吡蟲啉和內(nèi)吸磷(O+S)的檢測(cè)。

02 標(biāo)準(zhǔn)品配制

(1) 單標(biāo)儲(chǔ)備液1.0 mg/mL: 準(zhǔn)確稱取適量各標(biāo)準(zhǔn)品，用乙腈配制成1.0 mg/mL的單標(biāo)儲(chǔ)備液；

(2) 混標(biāo)儲(chǔ)備液5.0 μg/mL: 分別吸取各單標(biāo)儲(chǔ)備液，用乙腈配制成5.0 μg/mL混標(biāo)儲(chǔ)備液；

(3) 混標(biāo)中間液1.0 μg/mL: 吸取混標(biāo)儲(chǔ)備液，用乙腈配制成1.0 μg/mL混標(biāo)儲(chǔ)備液。

03 提取

(1) 取10.0 g樣品，加入30 mL乙腈，振蕩5 min，6000 rpm離心5 min，取出上清液；

(2) 向下層殘?jiān)欣^續(xù)加入30 mL、20 mL乙腈，按照步驟(1)重復(fù)提取兩次；

(3) 合并三次提取液，在40 ℃水浴中減壓蒸至1 mL，加入乙腈復(fù)溶，并轉(zhuǎn)移到具塞試管中定容至5 mL，取出1 mL，待凈化。

04 凈化

 ProElut TPC 12 mL (Cat.# 65354)

(1)活化：加入10 mL乙腈-甲苯(3-1)活化，棄去流出液；

(2)上樣：加入1 mL待凈化液，收集流出液；

(3)洗脫：加入25 mL乙腈-甲苯(3-1)，收集流出液，合并(2)和(3)流出液；

(4)重新溶解：將流出液在40 ℃水浴中旋轉(zhuǎn)濃縮至約0.5 mL，然后在室溫下用氮?dú)饩徛蹈?，? mL甲醇溶解，上機(jī)分析。

注:  同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液

05 分析條件

5.1 UPLC 條件

色譜柱: Leapsil C18，100 x 2.1 mm，2.7 μm (Cat#: 86005)

流  速: 0.4 mL/min

進(jìn)樣量: 1 μL

柱  溫: 35 ℃

流動(dòng)相: A: 0.1%甲酸水    B: 乙腈

梯度設(shè)置

5.2 質(zhì)譜條件

電離模式: ESI

掃描方式: 正離子掃描

檢測(cè)方式: 多反應(yīng)監(jiān)測(cè)

電噴霧電壓: 5500 V

霧化氣壓力: 50 psi

輔助氣壓力: 50 psi

氣簾氣壓力: 20 psi

離子源溫度: 500 ℃

定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、碰撞氣能量及去簇電壓見(jiàn)下表

06 添加回收結(jié)果

綠茶中10種農(nóng)藥殘留檢測(cè)的添加回收結(jié)果(%)

圖1 10 種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品20.0 μg/L的MRM色譜圖

方法二：QuEChERS-UPLC-MS/MS法

01 適用范圍

本方法適用于茶葉中的克百威、滅多威、3-羥基克百威、茚蟲威、甲胺磷、乙酰甲胺磷、敵百 蟲、氧樂(lè)果、啶蟲脒、吡蟲啉和內(nèi)吸磷(O+S)的檢測(cè)。

02 標(biāo)準(zhǔn)品配制

(1) 單標(biāo)儲(chǔ)備液1.0 mg/mL: 準(zhǔn)確稱取適量各標(biāo)準(zhǔn)品，用乙腈配制成1.0 mg/mL的單標(biāo)儲(chǔ)備液；

(2) 混標(biāo)儲(chǔ)備液5.0 μg/mL: 分別吸取各單標(biāo)儲(chǔ)備液，用乙腈配制成5.0 μg/mL混標(biāo)儲(chǔ)備液；

(3) 混標(biāo)中間液1.0 μg/mL: 吸取混標(biāo)儲(chǔ)備液，用乙腈配制成1.0 μg/mL混標(biāo)儲(chǔ)備液。

03 提取

(1) 取2.0 g樣品，加入10 mL水混勻，浸泡30 min；

(2) 繼續(xù)加入15 mL 乙腈，振蕩5 min；

(3) 加入6 g 無(wú)水硫酸鎂和1.5 g乙酸鈉(Cat#: 64520S)，振蕩1 min，6000 rpm離心5 min；

(3) 取出8 mL上清液，待凈化。

04 凈化

ProElut QuE 15 mL Tube (Cat#: 64622)

將待凈化液加入到15 mL ProElut QuEChERS凈化管，渦旋混合1 min，6000 rpm離心5 min，準(zhǔn)確取2 mL上清液于5 mL氮吹管中，40 ℃水浴中氮?dú)獯抵两桑尤? mL甲醇，混勻，上機(jī)分析。

注:  同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液

05 分析條件

5.1 UPLC 條件

色譜柱: Leapsil C18，100 x 2.1 mm，2.7 μm (Cat#: 86005)

流  速: 0.4 mL/min

進(jìn)樣量: 1 μL

柱  溫:  35 ℃

流動(dòng)相: A: 0.1%甲酸水    B: 乙腈

梯度設(shè)置

5.2 質(zhì)譜條件

電離模式: ESI

掃描方式: 正離子掃描

檢測(cè)方式: 多反應(yīng)監(jiān)測(cè)

電噴霧電壓: 5500 V

霧化氣壓力: 50 psi

輔助氣壓力: 50 psi

氣簾氣壓力: 20 psi

離子源溫度: 500 ℃

定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、碰撞氣能量及去簇電壓見(jiàn)下表

06 添加回收結(jié)果

綠茶中11種農(nóng)藥殘留檢測(cè)的添加回收結(jié)果(%)

圖1 11種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品13.3 μg/L的MRM色譜圖

方法三：SPE-GC-MS法

01 適用范圍

本方法適用于茶葉中內(nèi)吸磷(O+S)、滅線磷、甲拌磷、莠去津、氯唑磷、甲拌磷亞砜、甲拌磷砜、毒死蜱、三氯殺螨醇、水胺硫磷、丙溴磷、聯(lián)苯菊酯、氯氰菊酯和GX氯氰菊酯、氰戊菊酯和S-氰戊菊酯的檢測(cè)。

02 標(biāo)準(zhǔn)品配制

(1)單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液: 準(zhǔn)確稱取各農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品于10 mL容量瓶中，用甲苯溶解，并定容至刻度；

(2)混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液: 根據(jù)測(cè)定需要，吸取適量體積的單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于50 mL容量瓶中，并用乙酸乙酯定容至刻度；

(3)混合標(biāo)準(zhǔn)中間液1: 吸取5 mL混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于10 mL容量瓶中，并用乙酸乙酯定容至刻度；

(4)混合標(biāo)準(zhǔn)中間液2: 吸取1 mL混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于10 mL容量瓶中，并用乙酸乙酯定容至刻度。

03 提取

(1)取5.0 g樣品于50 mL離心管中，加入15 mL乙腈，振蕩5 min，8000 rpm離心5 min，收集上層清液；

(2)向下層殘?jiān)性偌尤?5 mL乙腈，按步驟(1)重復(fù)提取一次，合并上清液；

(3)將上清液在40 ℃水浴下減壓蒸至約1 mL，加入6 mL乙腈-甲苯(3-1)溶解，待凈化。

04 凈化

ProElut TPC 12 mL (Cat#: 65354)

(1)活化：加入10 mL乙腈-甲苯(3-1)，棄去流出液；

(2)上樣：將待凈化液加入柱中，收集流出液；

(3)洗脫：加入25 mL乙腈-甲苯(3-1)，合并(2)和(3)流出液；

(4)重新溶解：將洗脫液在40 ℃水浴下減壓蒸干，用乙酸乙酯定容至1 mL，混勻，供GC-MS分析。

注:  同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。

05 GC-MS條件

色譜柱：DM-5MS, 30 m × 0.32 mm × 0.25 μm (Cat.# 8231)

進(jìn)樣口溫度: 240 ℃

升溫程序: 初始溫度70 ℃，保持2 min，以25 ℃/min升溫至150 ℃，再以3 ℃/min升溫至200 ℃，再以8 ℃/min升溫至280 ℃，保持12 min

載氣: 氦氣，柱流速: 1.46 mL/min

進(jìn)樣方式: 不分流進(jìn)樣

進(jìn)樣量: 1.0 μL

離子源溫度: 230 ℃

接口溫度: 280 ℃

溶劑延遲: 6 min

電子轟擊電離源(EI): 選擇離子監(jiān)測(cè)模式(SIM)，分組監(jiān)測(cè)見(jiàn)下表

選擇離子監(jiān)測(cè)組表

06 添加回收結(jié)果

綠茶和紅茶中多種農(nóng)藥殘留量的GCMS檢測(cè)添加回收結(jié)果

14種農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)(10 ug/mL)TIC圖

方法四：SPE-UPLC-MS/MS法

01 適用范圍

本方法適用于綠茶、花茶、鐵觀音、紅茶和普洱茶中氨甲基膦酸和草甘膦的檢測(cè)，定量限0.1 mg/kg。

02 標(biāo)準(zhǔn)品配制

單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液: 準(zhǔn)確稱取各標(biāo)準(zhǔn)品，用水配制成1000 μg/mL的單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)中間液: 分別吸取各單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用水配制成1.0 μg/mL、10 μg/mL和50 μg/mL的混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)中間液。

03 提取

取1 g茶葉于50 mL離心管中，準(zhǔn)確加入10 mL水、10 mL二氯甲烷，振蕩10 min，超聲10 min，8000 rpm離心5 min，取5 mL上清液，待凈化。

04 凈化

ProElut GLY 6 mL (Cat.#:  65938)

(1)活化：依次加入5 mL甲醇、5 mL水，棄去流出液；

(2)上樣：將待凈化液加入柱中，棄去前3 mL流出液，收集后2 mL流出液，混勻，濾液過(guò)0.22 μm尼龍濾膜，上機(jī)分析。

注: 同方法制備基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液。

05 UPLC-MS/MS條件

5.1 UPLC 條件

色譜柱: Dikma Polyamino HILIC, 150 × 2.0 mm, 5 μm (Cat.#: 99302)

流  速: 0.2 mL/min

進(jìn)樣量: 10 μL

柱  溫: 35 ℃

流動(dòng)相: A: 乙腈 B: 5 mM乙酸銨溶液，氨水調(diào)節(jié)至pH=11

梯度設(shè)置:

5.2 質(zhì)譜條件

電離模式: ESI

掃描方式:   負(fù)離子掃描

檢測(cè)方式:   多反應(yīng)監(jiān)測(cè)   

電噴霧電壓:   -4500 V

霧化氣壓力:   60 psi  

輔助氣壓力:   60 psi

氣簾氣壓力:   35 psi   

離子源溫度:   550 ℃

定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、碰撞氣能量及去簇電壓見(jiàn)下表

06 添加回收結(jié)果

茶葉中氨甲基膦酸和草甘膦的LC-MS/MS檢測(cè)添加回收結(jié)果

相關(guān)產(chǎn)品