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- vg枯產(chǎn)喏 2010-11-17 00:00:00
- 做學(xué)問厚道點,自己寫吧!
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- 穩(wěn)穩(wěn)雯雯98 2010-11-09 00:00:00
- PCR技術(shù)在放射生物學(xué)中的應(yīng)用 1 PCR儀的主要特點 PCR技術(shù)具有GX、靈敏,特異性強(qiáng),應(yīng)用范圍廣等特點。 DNA序列的快速擴(kuò)增使在DNA水平上進(jìn)行大量的種群研究成 為可能。單鏈擴(kuò)增對幾十或幾百個個體進(jìn)行快速測序而不經(jīng) 過以前所需的繁瑣的克隆步驟。一旦得到了一組具代表性的 序列數(shù)據(jù),可用更方便且簡單的分析方法,來獲得等位基因的 序列數(shù)據(jù)。對分析來說,傳統(tǒng)分子技術(shù)所需的組織樣品用量相 對較多,尤其是許多無脊椎動物,它們對于進(jìn)行分子檢測所用 的一般操作方法來講太小。因此,對于小生物、共生生物或那 些在培養(yǎng)基中不易生長的生物個體的直接分析是困難的。PCR 儀的出現(xiàn),擴(kuò)大了進(jìn)行分子檢測的生物范圍?,F(xiàn)在可以直接研 究象原生物和藻類等單細(xì)胞生物自然種群的基因結(jié)構(gòu)。此方 法在生物的分布及數(shù)量分析中得到廣泛的應(yīng)用。Z后,聚合酶 鏈反應(yīng)的敏感性使其可以檢出及鑒定少量的單細(xì)胞生物、共生 生物及寄生生物,既使樣品是來自后二者宿主的DNA混合物 中也可檢出。 PCR儀可做到無損傷樣品檢驗。用于基因分析的樣品一 般都需要采血樣或取組織。這就限制了基因分析在行為學(xué)及 生態(tài)學(xué)研究中的應(yīng)用,在這些領(lǐng)域中必須把對象所受的干擾減 到Z低。從諸如單根頭發(fā)等法醫(yī)學(xué)樣品中擴(kuò)增序列為行為科 學(xué)家及保留生物學(xué)家提供了一個新機(jī)會。無損傷樣品檢驗也 使收集用于研究的危險生物的樣品變得容易了。目前,實時定 圖1 內(nèi)參GAPPDH不同濃度的擴(kuò)增圖 量PCR儀的出現(xiàn)對于某個基因在總RNA或總DNA的相對或 定量、探索在各種誘導(dǎo)因素下(輻射、轉(zhuǎn)基因動物、細(xì)胞的 基因轉(zhuǎn)染、癌變等)基因的變化等等提供了可能,我們應(yīng)用實時 定量PCR儀建立了內(nèi)參GAPPDH的標(biāo)準(zhǔn)曲線,內(nèi)參的擴(kuò)增曲 線見圖1,在實驗研究的過程中,對基因與內(nèi)參的擴(kuò)增曲線和 解離進(jìn)行對比,研究者就可以對所關(guān)心的目的基因進(jìn)行快速的 相對定量分析,與普通PCR相比,方便而且快捷。 2 在放射生物學(xué)中的應(yīng)用 研究者們利用PCR技術(shù),做了大量的研究工作,使許多研 究成為可能。其中包括基因在細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá);進(jìn)行基 因擴(kuò)增,克隆,體外表達(dá),對基因的蛋白水平的研究打下了基 礎(chǔ);進(jìn)行了基因多態(tài)性的研究;另外還對腫瘤細(xì)胞基因的變化 進(jìn)行了充分的研究,對腫瘤的診斷和ZL提供了依據(jù)。在放射 醫(yī)學(xué)中,利用該技術(shù)對輻射后細(xì)胞中基因的表達(dá)進(jìn)行了系統(tǒng)的 研究,并在生物劑量計中進(jìn)行了初步的探索。 (收稿日期:2008-06-17;修回日期:2008-12-17) ZG輻射衛(wèi)生2009年3月第18卷第1期 Chin J RadiolHealth,March 2009,Vol18,No 1·33· 調(diào)強(qiáng)放療延長單次分割照射時間對鼻咽癌細(xì)胞系放射生物學(xué)效應(yīng)的影響 你要找資料就留郵箱,題目具體一些 要我就無能為力了
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