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  noobyyeee 2015-10-29 00:00:00

  　　一、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)功能的檢測 　　中性粒細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)有隨意運(yùn)動(dòng)和定向運(yùn)動(dòng)之分，可根據(jù)其細(xì)胞面積判 斷中性粒細(xì)胞活動(dòng)的強(qiáng)度。嚴(yán)重酒精中毒及某些腫瘤患者，其中性粒細(xì)胞 的隨意運(yùn)動(dòng)明顯減弱，甚至消失。中性粒細(xì)胞的定向運(yùn)動(dòng)表現(xiàn)為趨化運(yùn)動(dòng)， 測定方法大同小異，原理相同。 　　(一)體內(nèi)試驗(yàn)法(皮膚窗法) 　　染色觀察中性粒細(xì)胞聚集的開始時(shí)間、程度和形態(tài)變化。健康人白細(xì) 胞在皮窗處 2～3 h 開始聚集，細(xì)胞數(shù)達(dá) 50～100 個(gè)，6 小時(shí)可達(dá) 1 000 個(gè) 以上。初期以中性粒細(xì)胞為主，以后單核細(xì)胞逐漸增多。 　　(二)體外試驗(yàn)法 　　1．濾膜小室法(Boyden 小室法) 　　用油鏡檢測細(xì)胞在透明濾膜內(nèi)通過的距離，求其趨化單位。 　　2．瓊脂糖凝膠平板法 　　將瓊脂糖制成凝膠平板，在ZY孔加中性粒細(xì)胞懸液，兩側(cè)孔分別加 趨化因子或?qū)φ张囵B(yǎng)液。經(jīng) 37℃溫育 2～3 小時(shí)后，染色測量細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的距 離，按下式計(jì)算移動(dòng)指數(shù)。 　　移動(dòng)指數(shù)=趨化移動(dòng)距離/隨意移動(dòng)距離 　　二、吞噬和殺菌功能的檢測 　　(一)細(xì)胞內(nèi)殺菌功能的檢測 　　將待檢細(xì)胞懸液按一定比例混和，加活的白色念珠菌懸液，保溫后加 美藍(lán)溶液作活體染色，取樣涂片鏡檢。如胞內(nèi)白色念珠菌呈藍(lán)色，表示已 被殺死。共計(jì)數(shù) 100～200 個(gè)細(xì)胞，按下式分別求其吞噬率和殺菌率。 　　吞噬率(％)=（吞噬細(xì)菌的細(xì)胞數(shù)/計(jì)數(shù)的細(xì)胞數(shù)）×100％ 　　殺菌率(％)=（胞內(nèi)含著染菌體的細(xì)胞數(shù)/計(jì)數(shù)的細(xì)胞數(shù)）×100％ 　　溶細(xì)胞法能更直接反映細(xì)胞殺菌情況。將待檢中性粒細(xì)胞懸液與已經(jīng) 新鮮人血清調(diào)理過的細(xì)菌(大腸桿菌或金黃色葡萄球菌)懸液按一定比例混 合，置 37℃，每隔一定時(shí)間取定量培養(yǎng)物，經(jīng)稀釋后接種固體平板培養(yǎng)基， 37℃培養(yǎng) 18 小時(shí)后，計(jì)算菌落數(shù)，按下式計(jì)算中性粒細(xì)胞的殺菌能力。 　　殺菌率(％)=(1—（30、60、90min 的菌落數(shù)/0min 菌落數(shù))×100％ 　　正常情況下，吞噬指數(shù)接近于 1，吞噬率 61％～64％。對大腸桿菌的 殺菌率大于 90％，對金黃色葡萄球菌的殺菌率大于 85％。 　　(二)硝基四氮唑藍(lán)(NBT)還原試驗(yàn) 　　本法用以檢測中性粒細(xì)胞的胞內(nèi)殺菌能力。由于細(xì)胞在殺菌過程中耗 能劇增，其耗氧量亦隨之相應(yīng)增加，細(xì)胞內(nèi)磷酸己糖旁路代謝活力增強(qiáng)， 葡萄糖 6-磷酸酶氧化脫氫。此時(shí)加入 NBT 可接受所脫的氫，使原呈淡黃色 的 NBT 還原成點(diǎn)狀或塊狀顆粒，并沉積于胞漿內(nèi)。在顯微鏡下計(jì)數(shù)細(xì)胞內(nèi) 有藍(lán)色甲膳顆粒的中性粒細(xì)胞所占比例。正常參考值為 5％～10％。 　　(三)化學(xué)發(fā)光測定法 　　中性粒細(xì)胞在吞噬經(jīng)調(diào)理的金黃色葡萄球菌過程中，出現(xiàn)呼吸爆發(fā)， 產(chǎn)生大量活性氧自由基（oxygen redicals)，它們與細(xì)胞內(nèi)殺菌作用密切 相關(guān)，同時(shí)又能產(chǎn)生微弱的發(fā)光現(xiàn)象。在反應(yīng)體系中加_米諾能起增應(yīng)， 使發(fā)光效率大為增強(qiáng)，可用化學(xué)發(fā)光儀測定。

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