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ELISA實驗中需要包被抗體或者抗原?怎么包被使其固相化?

時光不腐 2011-03-13 04:57:00 478  瀏覽
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全部評論(2條)

  • fpb8419045dg 2011-03-14 00:00:00
    北京美萊博醫(yī)學科技有限公司:010-82893546免費提供技術服務

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  • 羅顯宰 2011-03-14 00:00:00
    需要,diyi步即用包被液稀釋抗原,4°C包被過夜。包被液為碳酸鹽緩沖液:碳酸氫鈉 2.93g;碳酸鈉1.59g 配成水溶液1L,PH=9.6;4°C保存。

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  (1)要留心避免出現(xiàn)嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的ELISA試劑盒測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育進程中吸附于固相,然后與后邊參與的HRP底物反響顯色。

  (2)樣本的收集及血清別離中要留心盡量避免細菌污染,一則細菌的成長,其所分泌的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)作分化效果;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作符號的測定方法發(fā)作非特異性攪擾。

  (3)血清標本如是以無菌操作別離,則可以在2~8℃下保存一周,ELISA試劑盒如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長期保存,應在-70℃以下。

  (4)冰凍保存的血清標本須留心避免因停電等形成的重復凍融。ELISA試劑盒標本的重復凍融所發(fā)作的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發(fā)作損壞效果,然后引起假陰性效果。此外,凍融標本的混勻亦應留心,不要進行劇烈振動,重復倒置混勻即可。

  (5)標本在保存中如出現(xiàn)細菌污染所形成的的混濁或絮狀物時,應離心沉積后取上清檢測。Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的試驗確診方法。因為其試劑安穩(wěn)、易保存,操作簡潔,效果判斷較客觀等要素,已廣泛應用在免疫學查驗的各領域中。ELISA試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。成長環(huán)境之中的有用因子和營養(yǎng)成分進行更好的了解,確保這種血清原材料的成長活性和可靠性更高,以更加的品質讓這種動物細胞培養(yǎng)的活性得到大幅度的提升;

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