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問(wèn)答社區(qū)

如何根據(jù)熒光基團(tuán)的發(fā)光強(qiáng)度推算蛋白的量

瘋了的*在路上 2017-02-10 04:11:56 384  瀏覽
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參與評(píng)論

全部評(píng)論(1條)

  • QQ550913602 2017-02-11 00:00:00
    熒光定量PCR是通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針,對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過(guò)程,結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析,計(jì)算待測(cè)樣品模板的初始濃度. 原理: PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán).探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;剛開(kāi)始時(shí),探針結(jié)合在DNA任一一條單鏈上;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步.

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    評(píng)論

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經(jīng)過(guò)測(cè)定已知了該混合液的電導(dǎo)率和pH,想由此知道該溶液中的鹽的濃度,該如何計(jì)算呢? Kohlrausch公式我是知道的,可是無(wú)限稀釋摩爾電導(dǎo)率這項(xiàng)數(shù)據(jù)我不知道?;蛟S有人知道怎么查這項(xiàng)數(shù)據(jù)么?需要什么化學(xué)手冊(cè)吧?另外,Kohlrausch公式里的經(jīng)驗(yàn)常數(shù)A是多少呢?... 經(jīng)過(guò)測(cè)定已知了該混合液的電導(dǎo)率和pH,想由此知道該溶液中的鹽的濃度,該如何計(jì)算呢? Kohlrausch公式我是知道的,可是無(wú)限稀釋摩爾電導(dǎo)率這項(xiàng)數(shù)據(jù)我不知道?;蛟S有人知道怎么查這項(xiàng)數(shù)據(jù)么?需要什么化學(xué)手冊(cè)吧?另外,Kohlrausch公式里的經(jīng)驗(yàn)常數(shù)A是多少呢? 或許誰(shuí)有更好的方法還請(qǐng)指教,謝謝。 展開(kāi)
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