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Ebook 下載 —— ImageXpress 高內(nèi)涵在高通量篩選中的應(yīng)用

美谷分子儀器(上海)有限公司 2023-01-09 17:03:25 312  瀏覽
  • 醫(yī)藥發(fā)展依賴于新藥開發(fā)的進度,而高通量藥物篩選(High-Through Screening,HTS)可短時間內(nèi)篩出數(shù)種化合物,有助于加速研究進程,因此高通量藥物篩選技術(shù)在世界范圍內(nèi)得以廣泛應(yīng)用。學(xué)術(shù)研究和生物制藥公司加大投資力度將會推進高通量藥物篩選技術(shù)市場的發(fā)展,而高通量藥物篩選技術(shù)的也是生命科學(xué)研究乃至整個醫(yī)藥行業(yè)發(fā)展的原動力。


    隨著技術(shù)的進步和先進迭代產(chǎn)品不斷增加,預(yù)計未來高通量藥物篩選技術(shù)市場內(nèi)將迅速增長 , 而高通量藥物篩選技術(shù)的應(yīng)用也會隨之迅速增加。此外,隨著高內(nèi)涵(High-Content Screening,HCS)系統(tǒng)的不斷完善,基于細胞的測定有望得到更多的利用,并且從生化測定向基于細胞測定的方式大幅轉(zhuǎn)變。Molecular Devices 公司的 ImageXpress 系列高內(nèi)涵系統(tǒng),不但提供了細胞成像技術(shù)實現(xiàn)的所有細節(jié)和功能,其完善的激光自動聚焦加圖像自動聚焦技術(shù)有極大的兼容性和開放性,能夠?qū)崿F(xiàn)未來新型耗材和方法的檢測和分析。MetaXpress PowerCore 高內(nèi)涵并行加速軟件系統(tǒng)能夠大大提高系統(tǒng)分析通量,加速藥物檢測的速度,節(jié)省時間和人力的成本。這些特性決定了 ImageXpress 系統(tǒng)將會成為高內(nèi)涵篩選中不可替代的篩選檢測終端,為醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展做出巨大的貢獻!


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Ebook 下載 —— ImageXpress 高內(nèi)涵在高通量篩選中的應(yīng)用

醫(yī)藥發(fā)展依賴于新藥開發(fā)的進度,而高通量藥物篩選(High-Through Screening,HTS)可短時間內(nèi)篩出數(shù)種化合物,有助于加速研究進程,因此高通量藥物篩選技術(shù)在世界范圍內(nèi)得以廣泛應(yīng)用。學(xué)術(shù)研究和生物制藥公司加大投資力度將會推進高通量藥物篩選技術(shù)市場的發(fā)展,而高通量藥物篩選技術(shù)的也是生命科學(xué)研究乃至整個醫(yī)藥行業(yè)發(fā)展的原動力。


隨著技術(shù)的進步和先進迭代產(chǎn)品不斷增加,預(yù)計未來高通量藥物篩選技術(shù)市場內(nèi)將迅速增長 , 而高通量藥物篩選技術(shù)的應(yīng)用也會隨之迅速增加。此外,隨著高內(nèi)涵(High-Content Screening,HCS)系統(tǒng)的不斷完善,基于細胞的測定有望得到更多的利用,并且從生化測定向基于細胞測定的方式大幅轉(zhuǎn)變。Molecular Devices 公司的 ImageXpress 系列高內(nèi)涵系統(tǒng),不但提供了細胞成像技術(shù)實現(xiàn)的所有細節(jié)和功能,其完善的激光自動聚焦加圖像自動聚焦技術(shù)有極大的兼容性和開放性,能夠?qū)崿F(xiàn)未來新型耗材和方法的檢測和分析。MetaXpress PowerCore 高內(nèi)涵并行加速軟件系統(tǒng)能夠大大提高系統(tǒng)分析通量,加速藥物檢測的速度,節(jié)省時間和人力的成本。這些特性決定了 ImageXpress 系統(tǒng)將會成為高內(nèi)涵篩選中不可替代的篩選檢測終端,為醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展做出巨大的貢獻!


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2023-01-09 17:03:25 312 0
安泰高壓放大器在高通量微液滴分選中的應(yīng)用

實驗名稱:高壓放大器在微液滴高通量液滴分選實驗中的應(yīng)用

實驗?zāi)康模夯谖⒁旱蔚膯渭毎麥y序通量高,交叉污染程度低,被廣泛應(yīng)用于單細胞分析,由于液滴在生成時液滴內(nèi)包裹細胞與微珠的情況服從雙泊松分布,為保證有效樣本純度,造成了樣本損失問題與有效樣本比例過低的問題。針對此問題,本論文設(shè)計并實驗了一種高通量液滴分選與融合的方案,旨在解決由雙泊松分布問題造成的樣本損失。

實驗設(shè)備:微流注射泵,激光器沒數(shù)據(jù)采集卡,信號發(fā)生器,ATA-2161高壓放大器,示波器,高通濾光片。

實驗過程:

(1)細胞分選方案設(shè)計;

如下圖所示為熒光激發(fā)液滴分選方案設(shè)計原理圖,液滴在高速通過熒光檢測的光斑位置處時,陽性液滴被激光激發(fā)發(fā)出熒光,熒光經(jīng)物鏡以及光路射入PMT陰極,經(jīng)PMT放大后傳入信號采集系統(tǒng),觸發(fā)信號觸發(fā)信號發(fā)生器,輸出一段恒定的交流電壓,后再經(jīng)ATA-2161高壓放大器放大為高頻高壓交流電,加在電極兩端用于對液滴施加介電泳力。

液滴分選方案實驗原理圖

(2)FADS 系統(tǒng)搭建。

主要由三部分組成:微流控芯片、光電檢測模塊、數(shù)據(jù)采集與控制系統(tǒng)模塊。

系統(tǒng)實物圖

將生成好的液滴置入注射器中,倒置使液滴全部懸浮于液面以上,設(shè)置體積流速為20μL/h將液滴從水相入口注入,取1mL油作為連續(xù)相以700μL/h體積流速從對應(yīng)入口注入。將芯片置于倒置顯微鏡載物臺上,并調(diào)整位置使得激光光斑垂直照射在流道中央,最后固定芯片位置,持續(xù)注射液滴,觀察Labview前面板上的熒光檢測信號與高速攝像機拍攝畫面,調(diào)節(jié)高壓放大器放大倍數(shù),使得液滴在不破裂的情況下能夠被完整地拉入陽性流道。

實驗結(jié)果:

在正常狀態(tài)下,液滴在油加速后高速流過流道,沒有包裹熒光微球的液滴沒有激活電極,所以在流場曳力作用下流入較寬的默認流道;如圖b所示,當(dāng)包裹著16微米熒光微球的液滴經(jīng)過光斑檢測區(qū)域時,微球被激發(fā)發(fā)出熒光,被高速攝像機與PMT捕捉,而后通過檢測系統(tǒng)與控制系統(tǒng)激活電極,電極給與液滴-一個正介電泳力,將液滴拉入較為窄的分選流道,如圖c中被拉入分選流道的液滴即為圖b中的發(fā)光液滴。以此完成液滴高通量分選。

通過分選包裹著488nm熒光微球的液滴,從理論_上實現(xiàn)了基于介電泳的熒光激發(fā)液滴分選,且準確率較高。

實驗中用到的高壓放大器ATA-2161主要指標:

本文實驗素材由西安安泰整理發(fā)布,安泰高壓放大器廣泛應(yīng)用于壓電陶瓷驅(qū)動、超聲波測試、聲吶系統(tǒng)應(yīng)用和MEMS測試等,如果想了解高壓放大器更多應(yīng)用,歡迎訪問安泰測試網(wǎng)。

2021-09-29 16:29:11 353 0
高內(nèi)涵在模式生物中的應(yīng)用(一)

生命科學(xué)研究離不開各式各樣的模式生物,模式生物由于其結(jié)構(gòu)簡單、生活周期短、培養(yǎng)簡單、基因組小等特點,在生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。模式生物作為材料不僅能回答生命科學(xué)研究中Z基本的生物學(xué)問題,對人類一些疾病的ZL也有借鑒意義。常見的模式生物有真菌中的酵母,低等無脊椎動物中的線蟲,昆蟲綱的果蠅,魚綱的斑馬魚,哺乳綱的小鼠以及植物中的擬南芥。


高內(nèi)涵系統(tǒng)不僅僅適用于各種各樣的細胞模型,對各種小型的模式生物也非常友好,通過將這些模式生物做一些預(yù)處理,放在微孔板中,我們就可以用高內(nèi)涵系統(tǒng)來拍攝和分析它們。本期和下期,我們將隆重介紹高內(nèi)涵與這些模式生物的故事。

酵 母

常用于模式生物的酵母有兩個物種:出芽酵母和裂殖酵母,以出芽酵母為例,其細胞為球形或者卵形,直徑5–10μm。其繁殖的方法為出芽生殖。使用高內(nèi)涵系統(tǒng),可以觀察和分析酵母的世代周期、蛋白定位等。

實驗一

Hoechst 33342 染色酵母活細胞,通過63倍水浸式物鏡拍攝酵母細胞,高內(nèi)涵分析軟件Harmony自動識別酵母細胞,PhenoLOGIC人工智能算法區(qū)分出芽細胞:

 

實驗二

酵母細胞器相關(guān)蛋白的標記,紅色標記整個酵母細胞,綠色為不同細胞器,高內(nèi)涵分析軟件Harmony可識別不同的細胞器結(jié)構(gòu),分析其熒光強度、形態(tài)學(xué)參數(shù)和紋理參數(shù)[1]

 

下圖為突變體中蛋白定位發(fā)生變化[1]。

 

斑馬魚

斑馬魚也是成熟且常見的模式生物,常用于疾病研究中。斑馬魚成魚體長5cm左右,幼魚0.5-2cm,全身透明。一般首先對斑馬魚進行麻醉,再進行高內(nèi)涵拍攝。

實驗一

斑馬魚曲度的研究,毒性處理或一些基因突變會導(dǎo)致斑馬魚的曲度發(fā)生變化,高內(nèi)涵分析軟件Harmony可分析斑馬魚的軸向長度、曲率、彎曲角度等參數(shù):

 

實驗二

斑馬魚血管研究,斑馬魚全身透明,一直以來都是非常好的心血管研究模式生物,通過20倍水浸式物鏡(NA1.0)對斑馬魚血管進行成像,高內(nèi)涵分析軟件Harmony可通過一系列算法識別熒光標記的斑馬魚血管結(jié)構(gòu),也可對血管結(jié)構(gòu)做3D重構(gòu),分析血管長度、熒光強度等參數(shù):

 

參考文獻

1.Yeast Proteome Dynamics from Single Cell Imaging and Automated Analysis. Cell. 2015 Jun 4;161(6):1413-24. doi: 10.1016/j.cell.2015.04.051.

關(guān)于珀金埃爾默:

珀金埃爾默致力于為創(chuàng)建更健康的世界而持續(xù)創(chuàng)新。我們?yōu)樵\斷、生命科學(xué)、食品及應(yīng)用市場推出獨特的解決方案,助力科學(xué)家、研究人員和臨床醫(yī)生解決Z棘手的科學(xué)和YL難題。憑借深厚的市場了解和技術(shù)專長,我們助力客戶更早地獲得更準確的洞見。在,我們擁有12500名專業(yè)技術(shù)人員,服務(wù)于150多個國家,時刻專注于幫助客戶打造更健康的家庭,改善人類生活質(zhì)量。2018年,珀金埃爾默年營收達到約28億美元,為標準普爾500指數(shù)中的一員,紐交所上市代號1-877-PKI-NYSE。了解更多有關(guān)珀金埃爾默的信息,請訪問www.perkinelmer.com.cn。

 


2019-08-08 13:16:04 490 0
高內(nèi)涵在模式生物中的應(yīng)用(二)

       高內(nèi)涵系統(tǒng)不僅僅適用于各種各樣的細胞模型,對各種小型的模式生物也非常友好,通過將這些模式生物放在微孔板中,我們就可以用高內(nèi)涵系統(tǒng)來拍攝和分析它們。本期,我們將繼續(xù)介紹高內(nèi)涵與這些模式生物的故事。

擬南芥

擬南芥為兩年生草本,一般可長到7-40厘米,是植物學(xué)Z為常見的模式生物。其幼苗、根、莖、葉、原生質(zhì)體均可在高內(nèi)涵上進行自動成像和分析。

實驗一

高內(nèi)涵用于研究活體擬南芥全葉組織中膜運輸?shù)恼{(diào)節(jié),40倍水浸式物鏡對擬南芥葉片進行多層掃描,使用高內(nèi)涵分析軟件Harmony識別膜泡轉(zhuǎn)運體,統(tǒng)計其數(shù)目、熒光強度、定位等參數(shù)[2](如下圖)。

 

秀麗隱桿線蟲

秀麗隱桿線蟲在遺傳與發(fā)育生物學(xué)、行為與神經(jīng)生物學(xué)、衰老與壽命、人類遺傳性疾病都有非常重要的貢獻,成蟲體長為1mm,通身透明。一般首先對秀麗線蟲進行麻醉,再進行高內(nèi)涵拍攝。

實驗一

分析不同藥物處理后秀麗線蟲的數(shù)量和熒光強度,10倍物鏡拍攝多個視野,高內(nèi)涵分析軟件Harmony識別不同線蟲,計數(shù)并分析線蟲的熒光強度[3](如下圖)。

 

小型藻類

藻類的生長、繁殖與水體環(huán)境密切相關(guān),常作為水體污染指示物,用于對水體的實時監(jiān)測中。小型藻類可放置于微孔板中,通過離心使其貼底,從而進行高內(nèi)涵的拍攝,根據(jù)研究內(nèi)容不同,一般采用20倍-63倍水浸式物鏡進行成像。很多研究中通過對葉綠體的成像來判斷藻類的狀態(tài),成像過程需要設(shè)置針對葉綠素自發(fā)熒光特殊的檢測方法,即通過設(shè)定激發(fā)光和發(fā)射光,定義一個新的通道(excitation 460-490nm,emission 655-705nm)。

實驗一

藻類用于檢測水質(zhì)污染,本研究中,模擬微塑料水質(zhì)污染,檢驗裸藻的生長狀態(tài),采用20倍水浸式物鏡(NA 1.0) 進行成像,綠色為微塑料,紅色為葉綠素。(如下圖)

 

生長狀態(tài)不好的裸藻葉綠素?zé)晒鈴姸葴p弱,形態(tài)發(fā)生變化。(如下圖)

 

左圖為Harmony軟件識別裸藻細胞,中間圖為通過形態(tài)區(qū)分形態(tài)正常的梭狀裸藻(紅色)和因毒性變圓的裸藻(綠色),右圖為通過熒光強度區(qū)分死亡裸藻(綠色)和存活裸藻(紅色)。

參考文獻

2.High-throughput confocal imaging of intact live tissue enables quantification of membrane trafficking in Arabidopsis. Plant Physiol. 2010 Nov;154(3):1096-104. doi: 10.1104/pp.110.160325. Epub 2010 Sep 14.

3.Expanding the Biological Application of Fluorescent Benzothiadiazole Derivatives: A Phenotypic Screening Strategy for Anthelmintic Drug Discovery Using Caenorhabditis elegans. SLAS Discov. 2019 Aug;24(7):755-765. doi: 10.1177/2472555219851130. Epub 2019 Jun 10.

關(guān)于珀金埃爾默:

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了解更多有關(guān)珀金埃爾默的信息,請訪問www.perkinelmer.com.cn。

 


2019-08-16 17:02:20 520 0
抗體ZL和高通量篩選中的單細胞包覆的液滴微流控實驗
液滴微流控和單細胞包覆為抗體ZL中的發(fā)現(xiàn)提供了關(guān)鍵。本文著重于充分挖掘天然B細胞多樣性以快速從人類患者中分離抗原特異性抗體的應(yīng)用。人抗體庫確實越來越被認為是ZL級抗體的有價值來源。然而,用于開發(fā)表達反抗體表達的B細胞的方法在其快速分離稀有和抗原特異性結(jié)合物的能力方面受到限制。如下ZD介紹了將200萬個初級B細胞封裝到皮升大小液滴的微流體技術(shù),其中同源V基因在液滴內(nèi)融合形成scF-v盒文庫。

使用液滴微流控進行單細胞包覆

實驗方法
該方法包括將單個B細胞包裹到體積為400μL的油包水液滴里面。玻璃芯片的入口有2個,允許2種液滴試劑通入到芯片的通道內(nèi)。

OB1壓力控制器用來產(chǎn)生高速率且穩(wěn)定可靠的尺寸均勻的液滴。將細胞水溶液和RT-PCR混合物各自在30mbar下泵送,同時將HFE7500氟化油+2%w/v008-氟表面活性劑在67mbar下泵送,通過調(diào)節(jié)OB1壓力控制器的輸出壓力以獲得1:1的水性混合物流體。

這樣做,可以在40分鐘內(nèi)常規(guī)封裝100萬個B細胞。微流體芯片的結(jié)構(gòu)設(shè)計用于合并兩種含水流體流:一種攜帶B細胞懸浮液,另一種含有RT-PCR混合物。將所得乳液收集在PCR條帶管中并用40μL的礦物油覆蓋。除去過量的氟化油,以保持總體積約為100μL。

實驗裝置
用到的儀器
Elveflow壓力和流量控制器(OB1 MK3)


樣品儲液池(小型、中型和大型),每個培養(yǎng)基樣品對應(yīng)一個樣品儲液池。


玻璃芯片


單細胞包覆的實驗裝置圖



實驗結(jié)果
從康復(fù)期供體中純化分離的B細胞,并用RT-PCR試劑包封入油包水液滴中,使得同源VH和VL結(jié)構(gòu)域被擴增和連接。得到的RT-PCR擴增子形成表達準備的scFv,其可以直接表達用于篩選,在噬菌體上展示用于選擇,并且用于譜系表征的深度測序。



在40分鐘內(nèi)可以常規(guī)封裝100萬個B細胞。滴定B細胞懸浮液以使每10個液滴達到~1個細胞,基于泊松統(tǒng)計,將導(dǎo)致單細胞包覆的概率>95%。



在此,包覆液滴的細胞收集到μ-Slide通道載玻片(Ibidi)中并以200×放大率成像。將細胞用CellTracker Red和Green染料染色,混合,并以有利于單細胞包覆的密度包覆到液滴里面。每個液滴形成一個獨立的反應(yīng)器,其中細胞的同源V基因可以被擴增和配對。

結(jié)論
用于單細胞包覆的液滴微流控允許從數(shù)百萬初級B細胞快速捕獲天然庫,因此能夠?qū)崿F(xiàn)功能強大且靈敏的篩選平臺,對ZL性抗體開發(fā)、免疫譜表征具有重要意義,并且可在合理的疫苗設(shè)計中具有廣泛的應(yīng)用。

這里概述的過程是從自然庫中發(fā)現(xiàn)抗體Z快的過程之一。一名研究人員可在4周內(nèi)從數(shù)百萬初級B細胞迅速發(fā)展為特異性單克隆抗體。

這一過程可能是對抗新出現(xiàn)的傳染定的寶貴工具,例如Z近爆發(fā)的埃博拉病毒和寨卡病毒。

法國Elveflow微流控OB1壓力控制器進行液滴微流控包覆單細胞的優(yōu)勢
(1)<1% CV單分散性
        確保wan美控制的液滴尺寸

(2)較低的試劑成本和分析時間
        40ms建立時間:在啟動系統(tǒng)時,短的建立時間可以降低昂對樣品的損失。

(3)高通量包覆
       篩選適用于數(shù)據(jù)收集的大范圍的理想數(shù)據(jù)集合的變量

(4)工作流程自動化
      創(chuàng)建自己的控制序列并讓其自動流動

該類液滴包覆細胞的參考論文

Saravanan Rajan, Michael R. Kierny, Partha S. Chowdhury, et al.,  Recombinant human B cell repertoires enable screening for rare, specific, and natively paired antibodies, 2018, Nature Communication Biology, DOI: 10.1038/s42003-017-0006-2.


更加詳細的內(nèi)容介紹,請查看如下鏈接:http://blog.sina.com.cn/fangdzxx

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2019-08-19 17:22:12 647 0
做高通量基因測序篩查多少錢?
做高通量基因測序篩查多少錢?
2016-04-10 05:24:09 1741 1
高內(nèi)涵應(yīng)用案例——線粒體動力學(xué)檢測和表型分析

引言

新陳代謝是生物體內(nèi)進行的化學(xué)變化的總稱,是生物最基本的生命活動過程。細胞從環(huán)境汲取能量、物質(zhì),在內(nèi)部進行各種化學(xué)變化,維持自身高度復(fù)雜的有序結(jié)構(gòu),保證生命活動的正常進行。作為細胞的“能量工廠”,線粒體在維持能量穩(wěn)態(tài)方面發(fā)揮重要作用,可以調(diào)控蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、溶質(zhì)和代謝物產(chǎn)物的進出,并保護細胞質(zhì)免受有害線粒體產(chǎn)物的影響。線粒體通過不斷的分裂和融合,維持線粒體形態(tài)、分布和數(shù)量,維持細胞穩(wěn)態(tài),該過程被稱為線粒體動力學(xué)。線粒體自噬是機體清除細胞內(nèi)功能異常的線粒體的過程,是線粒體質(zhì)量控制的主要機制。線粒體動力學(xué)的病理改變可導(dǎo)致生物能量功能受損和線粒體介導(dǎo)的細胞死亡,并與多種病理機制相關(guān),包括缺血性心肌病,糖尿病,肺動脈高壓,帕金森氏病,亨廷頓氏病,骨骼肌萎縮癥、阿爾茨海默病等。


線粒體大小和形狀取決于它們在細胞內(nèi)的位置以及不同細胞對能量的需求。當(dāng)線粒體發(fā)生損傷時,它的形態(tài)和完整性會發(fā)生改變,如線粒體的數(shù)量、大小、長度和形狀等。線粒體形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的檢測對于了解線粒體的穩(wěn)態(tài)以及功能狀態(tài)有重要意義。


高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)非常適合進行線粒體表型和結(jié)構(gòu)的研究。共聚焦成像和水鏡可以提高成像質(zhì)量并更好地顯示線粒體結(jié)構(gòu),高內(nèi)涵的圖像分析工具可以幫助科研工作者獲得不同表型的數(shù)字特征,線粒體表型和結(jié)構(gòu)重排的分析模塊可用于線粒體動力學(xué)為基礎(chǔ)的細胞研究。

 

結(jié)果展示

使用不同濃度的化合物,包括氯喹(抑 制線粒體循環(huán)),魚藤酮(氧化磷酸化抑 制劑)和纈氨霉素(鉀離子載體)處理 PC12(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)。將活細胞用線粒體染料 MitoTracker Orange  和 Hoechst 進行染色,利用 ImageXpress Micro Confocal 系統(tǒng)(Molecular Devices)進行成像,使用共聚焦模式和 40X 水鏡拍攝活細胞的圖像,分辨單個線粒體并檢測線粒體形態(tài)變化。使用 MetaXpress 高內(nèi)涵圖像采集和分析軟件中的 Custom Module Editor(自定義模塊編輯器)分析圖像,使用“Granularity”模塊和“Find Fibers”模塊識別圓形顆粒和細長的線粒體(圖 1)。


圖 1 .線粒體形狀的表型分析。


Molecular Devices 高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)適用于各種細胞模型中化合物的藥物開發(fā)或毒性評估。不同化合物處理會導(dǎo)致線粒體形態(tài)變化,膜電位的損失、以及細胞的程序性死亡等。MetaXpress 軟件非常適合進行線粒體形態(tài)的測定,可以定義每個對象的數(shù)量、面積、強度、長度和形狀(表1,2)。使用具有共聚焦模式的 40X 水鏡對細胞進行成像,MetaXpress 自定義模塊編輯器分析圖像(圖 2)。這些檢測結(jié)果可以計算劑量反應(yīng)和各種化合物的有效濃度,以及用數(shù)字來表征線粒體結(jié)構(gòu)動力學(xué)(圖 3)。


圖 2 .化合物對線粒體的作用。使用MitoTracker Orange對線粒體進行染色( 黃色 ),對照組(A)、纈霉素(B)、魚藤酮(C)。


使用特定濃度的化合物(氯喹,魚藤酮和纈氨霉素)處理 PC12 細胞,對細胞進行染色和成像。通過圖像分析將線粒體結(jié)構(gòu)確定為“纖維”(頂部)或“顆?!保ㄖ胁浚?,底部為線粒體染色后熒光強度的變化。EC50的值取決于四個濃度依賴性復(fù)本和參數(shù)曲線的擬合(圖 3)。


圖 3 .使用氯喹(綠色),魚藤酮(紅色)和纈氨霉素(藍色)處理 PC12 細胞。EC50的值取決于四個濃度依賴性復(fù)本和參數(shù)曲線的擬合。


在分析過程中,我們比較了水鏡和空氣鏡對圖像質(zhì)量和分析的影響。結(jié)果顯示,使用水鏡可以提高圖像質(zhì)量,并且通常會導(dǎo)致 Z' 值增加( 表 3 )。圖 4 顯示了使用自定義模塊編輯對線粒體表型進行計數(shù)和分析,以評估線粒體的健康、代謝、循環(huán)、復(fù)合效應(yīng)和疾病狀態(tài)等。并且,自定義模塊編輯可以針對特定的細胞類型或疾病模型進行進一步的調(diào)整和修改。


表 1 .用圖 3 所示的曲線定量 EC50。


表 2 .不同的對照和化合物處理方法的比較。上面四列數(shù)據(jù)分別是對照,10 um 的氯喹,300 nm 的魚藤酮,和 10 nm 的纈氨酸霉素。


表 3 .與空氣鏡相比,水鏡可以提高圖像質(zhì)量,獲得更高的Z’值。

 

圖 4 .自定義模塊編輯器(CME)。

 

總結(jié)

Molecular Devices 高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)適用于各種細胞模型中化合物的藥物開發(fā)或毒性評估。使用高內(nèi)涵成像和高級圖像分析的線粒體動力學(xué)分析方法不僅可以量化線粒體的表型變化,而且這種多參數(shù)方法也可用于研究正常和病理結(jié)構(gòu)變化以表征疾病模型或復(fù)合效應(yīng)


 主要特點 

  • 獲得高質(zhì)量的圖像,更好地顯示線粒體形狀和結(jié)構(gòu)的變化

  • 以更有效、更精確的方式量化和測量線粒體的表型變化

  • 了解疾病的機制并評估各種細胞模型中的化合物毒性


參考文獻:

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2022-12-04 19:40:01 439 0
【會議預(yù)告】誠邀您參加上海站高內(nèi)涵成像技術(shù)與應(yīng)用研討會


尊敬的老師:


您好!我們誠摯地邀請您參加 5 月 26 日在上海舉辦的高內(nèi)涵成像技術(shù)與應(yīng)用研討會。本次應(yīng)用研討會旨在與科學(xué)家面對面的交流,分享使用高內(nèi)涵成像和分析技術(shù)的經(jīng)驗,期望為相關(guān)研究領(lǐng)域提供有用的信息,拓展思路。


高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)是一種集高分辨率、自動化、智能化、高通量于一體的通用檢測技術(shù)平臺,其為細胞水平的研究分析提供了高效的解決方案,是創(chuàng)新藥物研究、中藥藥效、腫瘤研究、神經(jīng)生物學(xué)、免疫學(xué)、干細胞研究等領(lǐng)域的重要研究工具。此次會議我們邀請企業(yè)、科研等專家學(xué)者共聚一堂,帶來 ImageXpress 高內(nèi)涵成像分析系統(tǒng)在各研究領(lǐng)域最 新進展和應(yīng)用。


我們期待您的參與,并再次感謝您的關(guān)注和支持!


美谷分子儀器(上海)有限公司


時間

2023 年 5 月 26 日

地點:

上海浦東由由喜來登大酒店(上海市浦東新區(qū)浦建路 38 號)

推薦到達方式:

地鐵 4 號線塘橋站 3 號口右轉(zhuǎn) 20 米

報名方式:

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2023-05-23 12:34:04 182 0
高通量測序篩選出的基因用什么酶來擴增比較好
 
2012-11-14 17:17:25 435 3
PerkinElmer為新藥開發(fā)和生物研究中的高內(nèi)涵篩選應(yīng)用增添3D分析功能

  2010年5月28日 馬薩諸塞沃爾瑟姆 - 專注于提高人類健康及其生存環(huán)境安全的lingxian公司PerkinElmer, Inc., 今天宣布為新藥開發(fā)和生物研究中的高含量篩選應(yīng)用增添 3D 圖像分析功能,該功能集成了本公司Z新版本的旗艦成像軟件套件 Columbus 2.1 和 Volocity 5.3.2。

  科研人員首次嘗試將這兩款功能強大的平臺集成到一起,滿足他們在高含量篩選應(yīng)用中對 3D 成像分析日益增長的需求。先進的 3D 功能可以更清晰和更準確地觀察細胞,及其與病原體或ZL化合物的相互作用,從而促進新藥開發(fā),幫助科研人員更好地了解細胞生物學(xué)。

  Columbus 平臺是一個可聯(lián)網(wǎng)的開源式高容量圖像數(shù)據(jù)管理和分析系統(tǒng),它可以導(dǎo)入、導(dǎo)出、存儲和管理各種不同格式、不同來源的圖像元數(shù)據(jù)。Volocity 系統(tǒng)是 PerkinElmer 的高性能 3D 成像軟件,它可以對圖像執(zhí)行采集、顯示、定量和恢復(fù)等操作。

  面臨的問題:科學(xué)家們在科學(xué)研究中不斷生成大量圖像數(shù)據(jù),如何對這些數(shù)據(jù)進行有效的管理和分析,是他們當(dāng)今面臨的巨大難題。

  解決方案:新版本的 Columbus 和 Volocity 軟件在這兩款強大的軟件工具之間架起一座橋梁。

  具體方法:Z新版本的 Volocity 支持 Columbus 服務(wù)器,通過簡便的拖放界面將 Columbus 中高含量篩選試驗結(jié)果傳輸?shù)?Volocity,進行強大的 3D 分析。

  優(yōu)點:研究人員現(xiàn)在可以將圖像從 Columbus 傳輸?shù)?Volocity 進行 3D 分析,然后再次返回到 Columbus 進行圖像數(shù)據(jù)的存儲和管理。

  Columbus 2.1:速度提高 10 倍,因此能夠處理 Volocity 分析過的海量圖像文件

  Volocity 5.3.2:目前支持 Columbus 服務(wù)器,能夠在 Columbus 和 Volocity 之間進行方便的拖放鏈接操作。

  關(guān)于 PerkinElmer, Inc.

  PerkinElmer, Inc. 是一家專注于提高人類健康及其生存環(huán)境安全的lingxian公司。據(jù)報道,該公司 2009 年收入為 18 億美元,擁有約 8,800 名員工,為超過 150 個國家/地區(qū)的客戶提供服務(wù),同時該公司也是標準普爾 500 指數(shù)的成員。

  有關(guān)其它信息,請致電800-820-5046 或 +86(0)21-38769510 或 訪問www.perkinelmer.com.cn。

2019-06-10 13:43:55 345 0

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