液相色譜儀除了日常維護(hù)保養(yǎng)外，使用高純度溶劑不僅能保護(hù)液相系統(tǒng)，也能增加結(jié)果的可靠性。HPLC級(jí)表示化學(xué)試劑的純度，是可在GX液相色譜中使用的試劑的純度，制備色譜法、平行分析或梯度分析需要使用到不同的HPLC級(jí)試劑。

         樣品在注入液相系統(tǒng)前，必須選擇一種合適的HPLC溶劑。在反相GX液相色譜中，當(dāng)樣品溶劑與流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度有差異,尤其是前者的洗脫強(qiáng)度較強(qiáng)時(shí),就會(huì)產(chǎn)生峰的變形及柱效的降低。解決該問題最有效的方法是使用流動(dòng)相作為溶劑溶解樣品,這樣既可以避免樣品溶劑和流動(dòng)相之間任何強(qiáng)度或粘度的不匹配，也可以減少樣品分析時(shí)基線的漂移。溶劑在流動(dòng)相中起著重要的作用，并有助于將進(jìn)樣品通過分離柱后輸送到檢測(cè)器。為了滿足不同的分析要求，可以購買不同純度等級(jí)的溶劑來使用，HPLC分析需要使用高純度的溶劑，但是同時(shí)也要考慮成本和實(shí)用性等方面。

         HPLC級(jí)溶劑的純度通常超過99.9％，并且瓶身標(biāo)簽上還會(huì)標(biāo)明其他雜質(zhì)的含量。但是雜質(zhì)會(huì)導(dǎo)致多余的峰，從而干擾色譜圖中的主峰，對(duì)我們的分析結(jié)果產(chǎn)生干擾。雜質(zhì)產(chǎn)生的原因有很多，可能溶劑純度不夠，可能是瓶身不干凈或者軟管不干凈，還可能是溶劑吸濾頭的過濾雜質(zhì)效果不好。恒譜生不銹鋼流動(dòng)相進(jìn)樣口過濾器能安全有效地保護(hù)泵和止回閥，尺寸小，適用于各種品牌的HPLC系統(tǒng)和多種小瓶口的存儲(chǔ)池容器。吸濾阻力較小，幾乎沒有背壓和形成空化，兼容多種流動(dòng)相管路，無需換吸濾頭即可配不同規(guī)格的吸管，過濾微粒污染物效果好，無氣泡，溶劑利用率高。

        在整個(gè)紫外線可見波長(zhǎng)范圍內(nèi)，沒有溶劑是100％透明的，常用的HPLC溶劑在一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)顯示出透明性。大多數(shù)應(yīng)用中會(huì)使用紫外線檢測(cè)器，因此所選的溶劑應(yīng)該盡可能具有低的紫外線截止波長(zhǎng)，讓大多數(shù)的樣品組分在高于截止值的波長(zhǎng)處顯示出可測(cè)量的吸收度。除此之外，溶劑的粘度越高，填充柱中固定相的阻力將導(dǎo)致背壓越高，因此所選溶劑也應(yīng)具有低粘度才是比較理想的。

        大多數(shù)的溶劑在密封瓶中才能維持它的穩(wěn)定性，但某些溶劑的保存期限有限。使用時(shí)要注意查看使用期，注意在有效期內(nèi)使用，不要購買過多的溶劑避免ZH用不完產(chǎn)生了浪費(fèi)行為。

      作為ZH的建議，所有溶劑在使用前通過進(jìn)樣口過濾器過濾并脫氣，這樣的預(yù)防措施將提高HPLC系統(tǒng)的使用壽命，也有助于增加分析結(jié)果的可靠性。

        HPLC系統(tǒng)能否有效運(yùn)行取決于流動(dòng)相和樣品不受化學(xué)雜質(zhì)或固體懸浮液的影響。對(duì)于HPLC流動(dòng)相的處理和使用注意事項(xiàng)討論主要圍繞在流動(dòng)相的制備和使用中應(yīng)采取的措施。對(duì)于樣品過濾的重要性討論主要圍繞在進(jìn)樣時(shí)清潔樣品的好處。

        HPLC色譜柱是HPLC系統(tǒng)中的重要組成部分，使用時(shí)需要細(xì)心使用，用完后要維護(hù)避免下次使用發(fā)生問題。經(jīng)常更換色譜柱是很昂貴的，因此為了節(jié)約成本，需要zui大程度地延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。同時(shí)也要細(xì)心維護(hù)色譜柱，以便每次獲得結(jié)果保持準(zhǔn)確性和一致性。

        由于經(jīng)常使用色譜柱，化學(xué)雜質(zhì)和固體懸浮液顆粒等會(huì)逐漸積累，色譜性能在使用過程中開始下降。流動(dòng)相或樣品中存在的大顆粒雜質(zhì)開始沉積在色譜柱的入口上，從而干擾流動(dòng)的均勻性。較小的顆粒會(huì)導(dǎo)致背壓增加，導(dǎo)致阻塞固定相中的流路。

        污染物有哪些？

        1、反相分離中高度保留的化合物，例如脂肪酸。

        2、不可逆地保留的化合物，如殘留的蛋白物質(zhì)，在樣品提取時(shí)并未完全去除。解決這個(gè)問題可以在HPLC分析之前對(duì)樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行去蛋白化。

        3、顆粒雜質(zhì)，可能是樣品未過濾，系統(tǒng)組件（例如泵或進(jìn)樣器中的密封件）的磨損導(dǎo)致產(chǎn)生顆粒雜質(zhì)。又或者是進(jìn)樣時(shí)溶劑中本身還有顆粒物雜質(zhì)，沒有過濾導(dǎo)致顆粒物質(zhì)進(jìn)入系統(tǒng)。建議使用溶劑進(jìn)樣口過濾器，過濾掉微小顆粒物質(zhì)，避免進(jìn)入到HPLC系統(tǒng)中。

        恒譜生2μ,5μ,10μ,20μm液相色譜儀流動(dòng)相入口溶劑過濾器，保護(hù)泵、單向止回閥 、進(jìn)樣器 、色譜柱免受有害顆粒污染物的損壞；吸濾阻力較小，較大的圓柱形篩板表面積，幾乎沒有背壓；吸濾頭尺寸較小，可用于多種小瓶口的存儲(chǔ)池容器；不會(huì)將空氣引入系統(tǒng)，無氣泡進(jìn)入流動(dòng)相管路，儲(chǔ)液瓶溶劑抽取利用率可達(dá)99%以上，大大減少瓶底溶劑因無法凈真空吸取而造成的浪費(fèi)；設(shè)有多階管路接頭，兼容多種內(nèi)徑溶劑流動(dòng)相管路，不需要更換吸濾頭即可匹配不同規(guī)格的吸管；產(chǎn)品兼 容性高，適用于各種品牌的HPLC系統(tǒng)。

        4、柱內(nèi)殘留緩沖液，干燥后導(dǎo)致結(jié)晶沉淀。使用色譜柱后用HPLC級(jí)純水或緩沖溶液洗滌色譜柱可防止此類鹽沉淀的形成。

        什么是保護(hù)柱？

        保護(hù)柱是安裝在進(jìn)樣器和分析柱之間的，截留導(dǎo)致色譜柱篩板堵塞、柱頭塌陷和柱效下降的化學(xué)物質(zhì)和顆粒物?；瘜W(xué)物質(zhì)和顆粒物會(huì)污染、堵塞色譜柱，給分析帶來不良影響等。這時(shí)通過在色譜柱前安裝分析保護(hù)柱可以防止其產(chǎn)生，能起保護(hù)色譜柱的作用。保護(hù)柱zui好與分析柱具有相同的填料，以消除分離的復(fù)雜性。保護(hù)柱的內(nèi)部ID應(yīng)與分析柱相當(dāng) ，以最小化背壓。保護(hù)柱需要定期更換，可根據(jù)例如背壓增加，峰展寬和峰保留時(shí)間的變化來決定更換的周期。

        恒譜生建議您可以有效地利用、定期更換色譜保護(hù)柱，以延長(zhǎng)色譜柱的壽命。