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三聚氰胺檢測 為什么加離子對試劑

狽八0gq8 2016-09-04 17:34:43 343  瀏覽
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  • haifeng_tstv 2016-09-05 00:00:00
    SB色譜柱分離三聚氰胺的譜圖 (a)色譜柱:VenusilASBC84.6×250mm;標準:FDA方法;流動相:緩沖液:乙腈=85:15;緩沖液:10mM檸檬酸,10mM辛烷磺酸鈉,調pH為3.0;流速:1.0mL/min;柱溫:40oC;波長:240nm (b)色譜柱:VenusilAZG農(nóng)業(yè)部頒標準方法;緩沖液:10mM檸檬酸,10mM庚烷磺酸鈉;流動相:緩沖溶液:乙腈=85:15;流速:1.0mL/min;柱溫:40℃;波長:240nm 空白加水平(mg/L)回收率0.01116%0.1108%0.592%296% 3.2.2三聚氰胺LC-MS檢測方法 由于FDA公布的HPLC-UV方法中,流動相添加了離子對試劑,因此限制了液質聯(lián)用方法的使用;但不用離子對試劑色譜方法,三聚氰胺在傳統(tǒng)的C18柱上保留很差,不能得到較好的分離定量〔3〕。 基于此問題,艾杰爾科技公司自主開發(fā)了新的方法,采用艾杰爾(Agela)ASB系列親水色譜柱,不用離子對試劑也能得到有效的保留與分離。因此方法中流動相不含離子對試劑,可以用于質譜檢測。 與FDA2007年4月公布的《UpdatedFCCDevelopmentalMelamineQuantitation(HPLC-UV)》相比較,該方法大大降低了Z低檢測限(MSD:0.5ppm;UV:2ppm),提高了檢測靈敏度。 以該方法分別在ASB-C84.6×250mmASB-C184.6×250mm得到的譜圖如下: 圖3LC-MS方法檢測三聚氰胺的譜圖 緩沖液:10mM的NH4AC; 流動相:Buffer::ACN=95:5;流速:1.0mL/min;進樣量:樣品先用70%ACN溶解成約1mg/mL,用ACN稀釋成0.1mg/mL,進10uL;柱溫:40℃;波長:240nm 4結果與討論 4.1陽離子交換柱(PCX) 三聚氰胺呈弱堿性(弱陽離子化合物),凈化過程一般應選擇陽離子交換柱?;旌闲偷年栯x子交換柱(PCX)通過將磺酸基團(-SO3H)鍵合在極性高聚物聚苯乙烯/二乙烯苯(PEP)吸附劑上,具有陽離子交換和反相吸附兩種機理,并具有以下優(yōu)點: a)可通過兩種不同溶液的洗滌(水/一定pH值的緩沖溶液和有機溶劑),使樣品更干凈,提高檢測的靈敏度。 b)批次重復性好,具體的可以去藥智網(wǎng)查詢,回答滿意請您采納,謝謝。

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一、試劑準備及存儲

在進行試劑加試操作前,首先應確保所有試劑的質量及儲存條件符合要求。通常,試劑應存放在陰涼、干燥、避光的環(huán)境中,遵循制造商的存放指南。使用前,應仔細檢查試劑的有效期及包裝完整性。取出試劑時,應使用專用的移液工具,避免交叉污染。應按照說明書中推薦的稀釋比例預先準備好所需的試劑,確保每次加試劑的濃度一致。

二、加試劑的流程步驟

  1. 準備工作:在操作前,應先進行儀器的自檢和清潔,確保樣品杯和試劑架的清潔無污染。

  2. 啟動儀器:打開生化分析儀,按照操作流程進入試劑加注模塊,確認儀器處于正常工作狀態(tài)。

  3. 加載試劑杯或試劑管:根據(jù)儀器型號不同,將預先準備好的試劑瓶或試劑管放入指定的位置。需要確保試劑標識清晰、正確無誤。

  4. 選擇加試劑程序:在儀器操作界面中選擇對應的試劑加注程序,確認配方參數(shù)和加試步驟的正確性。

  5. 自動加試劑:啟動加試劑程序,儀器將自動完成試劑的加注過程。操作者應在此環(huán)節(jié)密切監(jiān)控,確保加注正常進行。

  6. 人工加試劑:對于部分需要手工加試劑的操作,要確保使用的移液器或吸頭干凈,無污染,在指定的位置緩慢、均勻地添加試劑。

三、注意事項

  • 操作環(huán)境:保持操作臺及儀器周圍的清潔,避免灰塵或液體污染試劑。

  • 試劑用量:嚴格按照標準操作規(guī)程,掌握正確的加試劑量,避免不足或過量。

  • 試劑混合:添加后,有些試劑需要輕輕混勻,確保反應充分。

  • 安全防護:在操作過程中佩戴手套和護目鏡,避免試劑接觸皮膚或眼睛。

四、常見問題與解決方案

  • 試劑未充滿或液面過低:檢查試劑瓶的連接和泵浦是否正常工作,必要時更換或修理泵浦組件。

  • 試劑泄漏或污染:確保所有連接緊密無泄漏,操作完畢后及時清潔試劑瓶口和周圍環(huán)境。

  • 系統(tǒng)提示錯誤:核實試劑標簽與程序設置是否一致,重啟儀器或咨詢廠商技術支持。

五、總結

生化分析儀的試劑加試過程是確保檢測質量和效率的關鍵環(huán)節(jié)。掌握科學、規(guī)范的加試劑操作流程,不僅能提升工作效率,還能確保每一次檢測的準確性和可靠性。在實際操作中,應嚴格遵循廠商指導,及時維護校準設備,以應對可能出現(xiàn)的各種技術難題。未來,隨著自動化與智能化的發(fā)展,試劑加注的自動化水平將不斷提高,為臨床檢驗提供更為穩(wěn)固的技術保障。

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