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用哪些方法可以測定微量元素在植物體內(nèi)的分布與吸收

aiqiyitb 2006-12-09 00:38:31 362  瀏覽
  • 哪位高人能總結(jié)一下,多謝了!!!

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全部評論(2條)

  • jll_8002 2006-12-10 00:00:00
    1.原子吸分光度收法. 2.原子發(fā)射法. 3.紫外可見分光光度法. 4.熒光分析法. 5.色譜法(氣相,液相,毛細(xì)管). 6.電分析法. 7.化學(xué)發(fā)光分析法. 8.質(zhì)譜法. 9.核磁共振法. 10.紅外分析法. 12.X射線分析法.

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  • hdbdmxJicnsnZn 2006-12-12 00:00:00
    如果是植物的,還要看吸收分布的話,shou選方法就是"放射性同位素示蹤法" 同位素示蹤法基本原理和特點(diǎn) 同位素示蹤所利用的放射性核素(或穩(wěn)定性核素)及它們的化合物,與自然界存在的相應(yīng)普通元素及其化合物之間的化學(xué)性質(zhì)和生物學(xué)性質(zhì)是相同的,只是具有不同的核物理性質(zhì)。因此,就可以用同位素作為一種標(biāo)記,制成含有同位素的標(biāo)記化合物(如標(biāo)記食物,藥物和代謝物質(zhì)等)代替相應(yīng)的非標(biāo)記化合物。利用放射性同位素不斷地放出特征射線的核物理性質(zhì),就可以用核探測器隨時追蹤它在體內(nèi)或體外的位置、數(shù)量及其轉(zhuǎn)變等,穩(wěn)定性同位素雖然不釋放射線,但可以利用它與普通相應(yīng)同位素的質(zhì)量之差,通過質(zhì)譜儀,氣相層析儀,核磁共振等質(zhì)量分析儀器來測定。放射性同位素和穩(wěn)定性同位素都可作為示蹤劑(tracer),但是,穩(wěn)定性同位素作為示蹤劑其靈敏度較低,可獲得的種類少,價格較昂貴,其應(yīng)用范圍受到限制;而用放射性同位素作為示蹤劑不僅靈敏度,測量方法簡便易行,能準(zhǔn)確地定量,準(zhǔn)確地定位及符合所研究對象的生理條件等特點(diǎn): 1.靈敏度高 放射性示蹤法可測到10-14-10-18克水平,即可以從1015個非放射性原子中檢出一個放射性原子。它比目前較敏感的重量分析天平要敏感108-107倍,而迄今Z準(zhǔn)確的化學(xué)分析法很難測定到10-12克水平。 2.方法簡便 放射性測定不受其它非放射性物質(zhì)的干擾,可以省略許多復(fù)雜的物質(zhì)分離步驟,體內(nèi)示蹤時,可以利用某些放射性同位素釋放出穿透力強(qiáng)的r射線,在體外測量而獲得結(jié)果,這就大大簡化了實(shí)驗(yàn)過程,做到非破壞性分析,隨著液體閃爍計數(shù)的發(fā)展,14C和3H等發(fā)射軟β射線的放射性同位素在醫(yī)學(xué)及生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中得到越來越廣泛的應(yīng)用。 3.定位定量準(zhǔn)確 放射性同位素示蹤法能準(zhǔn)確定量地測定代謝物質(zhì)的轉(zhuǎn)移和轉(zhuǎn)變,與某些形態(tài)學(xué)技術(shù)相結(jié)合(如病理組織切片技術(shù),電子顯微鏡技術(shù)等),可以確定放射性示蹤劑在組織器官中的定量分布,并且對組織器官的定位準(zhǔn)確度可達(dá)細(xì)胞水平、亞細(xì)胞水平乃至分子水平。 4.符合生理條件 在放射性同位素實(shí)驗(yàn)中,所引用的放射性標(biāo)記化合物的化學(xué)量是極微量的,它對體內(nèi)原有的相應(yīng)物質(zhì)的重量改變是微不足道的,體內(nèi)生理過程仍保持正常的平衡狀態(tài),獲得的分析結(jié)果符合生理條件,更能反映客觀存在的事物本質(zhì)。 放射性同位素示蹤法的優(yōu)點(diǎn)如上所述,但也存在一些缺陷,如從事放射性同位素工作的人員要受一定的專門訓(xùn)練,要具備相應(yīng)的安全防護(hù)措施和條件,在目前個別元素(如氧、氮等)還沒有合適的放射性同位素等等。在作示蹤實(shí)驗(yàn)時,還必須注意到示蹤劑的同位素效應(yīng)和放射效應(yīng)問題。所謂同位素效應(yīng)是指放射性同位素(或是穩(wěn)定性同位素)與相應(yīng)的普通元素之間存在著化學(xué)性質(zhì)上的微小差異所引起的個別性質(zhì)上的明顯區(qū)別,對于輕元素而言,同位素效應(yīng)比較嚴(yán)重。因?yàn)橥凰刂g的質(zhì)量判別是倍增的,如3H質(zhì)量是1H的三倍,2H是1H的兩倍,當(dāng)用氚水(3H2O)作示蹤劑時,它在普通H2O中的含量不能過大,否則會使水的物理常數(shù)、對細(xì)胞膜的滲透及細(xì)胞質(zhì)粘性等都會發(fā)生改變。但在一般的示蹤實(shí)驗(yàn)中,由同位素效應(yīng)引起的誤差,常在實(shí)驗(yàn)誤差內(nèi),可忽略不計。放射性同位素釋放的射線利于追蹤測量,但射線對生物體的作用達(dá)到一定劑量時,會改變機(jī)體的生理狀態(tài),這就是放射性同位素的輻射效應(yīng),因此放射性同位素的用量應(yīng)小于安全劑量,嚴(yán)格控制在生物機(jī)體所能允許的范圍之內(nèi),以免實(shí)驗(yàn)對象受輻射損傷,而得錯誤的結(jié)果。 ================================================== 另外,作為微量元素,如果是植物含有的,那很有可能是以蛋白質(zhì)輔基的形式存在: 可以先提取各部樣本,根據(jù)理論的元素化合態(tài)選擇合適的提純分離辦法進(jìn)行提純和分離,此方法可以具體的分析某微量元素是作為具體某個蛋白質(zhì)分子的輔基存在(當(dāng)然,要用適當(dāng)?shù)姆椒▽Υ嗽鼗蚧衔镞M(jìn)行標(biāo)記)這里推薦生化實(shí)驗(yàn)中很有用的SDS-聚丙烯酰氨凝膠電泳(SDS-PAGE)的雙向電泳:在去污劑十二烷基硫酸鈉存在下的聚丙烯酰氨凝膠電泳。SDS-PAGE只是按照分子的大小,而不是根據(jù)分子所帶的電荷大小分離的。 從兩個方向先進(jìn)行等電聚膠電泳(按照pI)分離,然后再進(jìn)行SDS-PAGE(按照分子大小分離)。經(jīng)染色得到的電泳圖是二維分布的蛋白質(zhì)圖。 (Alex解釋:單向電泳得到的是條帶,而雙向的由于有兩個方向的電極存在,結(jié)束后將得到塊狀的蛋白質(zhì)圖) =================================================== 根據(jù)蛋白質(zhì)圖上的各個蛋白質(zhì)塊分別進(jìn)行放射性實(shí)驗(yàn),測定得到需要的蛋白質(zhì),并進(jìn)行提純. =================================================== 下面就可利用此提純物進(jìn)一步研究此微量元素的生理作用了 =================================================== 這時,就可利用含有此元素的蛋白質(zhì)分子的分子特性,而不再麻煩的利用放射性,利用蛋白分子含量來逐步檢測植物各部含量以及吸收的問題了,推薦使用測定蛋白含量Z普遍的"分光光度法" 1.概述 人們在實(shí)踐中早已總結(jié)出不同顏色的物質(zhì)具有不同的物理和化學(xué)性質(zhì)。 根據(jù)物質(zhì)的這些特性可對它進(jìn)行有效的分析和判別。由于顏色本就惹人注意,根據(jù)物質(zhì)的顏色深淺程度來對物質(zhì)的含量進(jìn)行估計,可追溯到古代及中世紀(jì)。1852年,比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所發(fā)表的文章,提出了分光光度的基本定律,即液層厚度相等時,顏色的強(qiáng)度與呈色溶液的濃度成比例,從而奠定了分光光度法的理論基礎(chǔ),這就是的比爾朗伯定律。1854年,杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將此理論應(yīng)用于定量分析化學(xué)領(lǐng)域,并且設(shè)計了diyi臺比色計。到1918年,美國國家標(biāo)準(zhǔn)局制成了diyi臺紫外可見分光光度計。此后,紫外可見分光光度計經(jīng)不斷改進(jìn),又出現(xiàn)自動記錄、自動打印、數(shù)字顯示、微機(jī)控制等各種類型的儀器,使光度法的靈敏度和準(zhǔn)確度也不斷 提高,其應(yīng)用范圍也不斷擴(kuò)大。 紫外可見分光光度法從問世以來,在應(yīng)用方面有了很大的發(fā)展,尤其是在相關(guān)學(xué)科發(fā)展的基礎(chǔ)上,促使分光光度計儀器的不斷創(chuàng)新,功能更加齊全,使得光度法的應(yīng)用更拓寬了范圍。 2 應(yīng)用 2.1 檢定物質(zhì) 根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是Z大吸收波長雖ax和摩爾吸收系數(shù)是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的Z大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。 2.2 與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照 將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì),則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標(biāo)樣,也可以和現(xiàn)成的標(biāo) 準(zhǔn)譜圖對照進(jìn)行比較。這種方法要求儀器準(zhǔn)確,精密度高,且測定條件要相同。 2.3 比較Z大吸收波長吸收系數(shù)的一致性 2.4 純度檢驗(yàn) 2.5 推測化合物的分子結(jié)構(gòu) 2.6 氫鍵強(qiáng)度的測定 實(shí)驗(yàn)證明,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不 同溶劑中氫鍵強(qiáng)度,以確定選擇哪一種溶劑 。 2.7 絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定 2.8 反應(yīng)動力學(xué)研究 2.9 在有機(jī)分析中的應(yīng)用 有機(jī)分析是一門研究有機(jī)化合物的分離、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測定的科學(xué),它是在有機(jī)化學(xué)和分析化學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的綜合性學(xué)科。在國民經(jīng)濟(jì)的許多領(lǐng)域都用有機(jī)分析! 結(jié)語 1.同位素示蹤:是Z基本,在高中就會學(xué)到的辦法,而其實(shí)Z基本的也就是Z適用的,當(dāng)今科技飛速發(fā)展,卻有很多科學(xué)技能恒久適用,要學(xué)的不是一種操作手段,而是一種思維的方式. 2.電泳在技術(shù)操作上的要求很高,可以達(dá)到科研的水平 3.分光光度:所述紫外可見分光光度法具有儀器價格低廉適用性廣泛,尤其是采用微機(jī)控制以來,該技術(shù)得到了突飛猛進(jìn)的發(fā)展。近年來我國儀器制造廠可以生產(chǎn)出與 國外等同水平的紫外分光光度計,成為分析者的Z佳選擇。 參考文獻(xiàn) 〔1〕 編委會 水和廢水監(jiān)測分析方法指南(上冊) ZG環(huán)境科學(xué)出版社1990 〔2〕 朱良漪 分析儀器手冊 北京工業(yè)出版社1997 〔3〕 陳耀祖 有機(jī)分要 高等教育出版社北京1981

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