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用PBS配0.1%TritonX-100時(shí)TritonX-100不溶解,怎么辦

Q2431_79765僑 2017-08-08 04:46:18 1092  瀏覽
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全部評(píng)論(1條)

  • scnud19 2017-08-09 00:00:00
    Triton X-100是一種非離子型去垢劑分子式:C14H22O(C2H4O)n 用途:Triton X-100是一種比較溫和的去垢劑(表面活性劑或稱界面活性劑),常作為添加劑使蛋白保持穩(wěn)定,尤其是膜蛋白. 性質(zhì): 1.Triton X-100對(duì)細(xì)菌等微生物沒有殺傷作用. 2.Triton X-100在紫外波段下有光吸收(lambda max = 275 nm and 283 nm in methanol),因此,當(dāng)緩沖液中存在Triton X-100時(shí)不能通過測(cè)定280nm光吸收來進(jìn)行蛋白定量. 3.Triton X-100常與CHAPS等zwitterionic 去垢劑一起使用來純化膜蛋白,使膜蛋白保持其天然構(gòu)象. 4.Triton X-100可以提高真核細(xì)胞細(xì)胞膜的通透性,因此在Immunostaining時(shí)常使用含 0.1%-0.5%Triton X-100的PBS或TBS. 5.Triton X-100非常穩(wěn)定,密封避光 +2 to +8℃條件下可以長期保存. 6.Triton X-100是透明,略顯粘稠,稍微發(fā)黃的液體. 7.Triton X-100的密度為1.07 g/ml,pH6.0-8.0(5%的溶液). 8.Triton X-100可以高壓滅菌. 9.用Triton X-100來裂解細(xì)胞時(shí),0.1% Triton X-100就足夠了,不過,達(dá)到0.5%時(shí)也沒問題. 10.蛋白酶K在含1% Triton X-100的溶液中依然保持活性. 11.可以使用Amberlite hydrophobic XAD resins and Rezorian A161 cartridges 來去除Triton X-100 . 去垢劑(又稱表面活性劑)是一類即具有親水基又具有疏水基的物質(zhì),一般具有乳化、分散、和增溶作用,可分陰離子、陽離子和中性去垢劑等多種類型,中性去垢劑在蛋白提取中應(yīng)用的較多. 中性去垢劑又稱非離子表面活性劑,對(duì)蛋白質(zhì)的變性作用影響較少,宜于蛋白質(zhì)或酶提取之用.一般市售中性去垢劑有聚乙二醇類,如PEG200;多元醇類表面活性劑,如山梨醇、司盤類和吐溫類;聚氧乙烯醇醚,如芐澤類、平平加類;聚氧乙烯烷基苯酚醚,如Igepal CO、乳化劑OP、Triton、Pluronic(用作消泡劑、潤濕劑、增溶劑)、泡敵.中性去垢劑作用后可通過Sephadex LH-50柱除去;也可直接上DEAE-Sephadex柱層析分離目的蛋白,不必先除去去垢劑.

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