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請教大家用的核酸及蛋白定量的儀器是什么

筱寧丶雨 2016-12-29 05:46:57 317  瀏覽
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全部評論(3條)

  • 自行車i5 2016-12-30 00:00:00
    核酸蛋白定量儀也就是分光光度計。

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  • 宏站 2016-12-30 00:00:00
    1、紫外吸收: 波長不同:蛋白在280 nm,核酸在260 nm.這取決于生色團(tuán),即分子結(jié)構(gòu). 均一性不同:核酸的每種堿基都有吸收,而且相差不多,因而定量時線性很好;蛋白的20種構(gòu)件中只有三種有吸收,相互差異也較大,所以蛋白用紫外吸收定量比較困難. 2、帶電機(jī)理: 核酸和核苷酸既有磷酸基,又有堿性基團(tuán),所以在溶液中為兩性電解質(zhì),因磷酸的酸性強(qiáng),通常表現(xiàn)為酸性。RNA在室溫條件下被稀堿水解成核苷酸而DNA對堿較穩(wěn)定,常利用該性質(zhì)測定RNA的堿基組成或除去溶液中的RNA雜質(zhì)。 氨基酸由于含有氨基和羧基,因此在化學(xué)性質(zhì)上表現(xiàn)為是的一種兼有弱堿和弱酸的兩性化合物。氨基酸在溶液中的帶電狀態(tài),會隨著溶液的pH值而變化,如果氨基酸的凈電荷等于零,在外加電場中不發(fā)生向正極或負(fù)極移動的現(xiàn)象,在這種狀態(tài)下溶液的pH值稱為其等電點(diǎn),常用pI表示。在等電點(diǎn)是,氨基酸的溶解度Z小,容易沉淀析出。

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  • applepearbiscu 2017-09-23 16:53:12
    1、紫外吸收:波長不同:蛋白在280nm,核酸在260nm.這取決于生色團(tuán),即分子結(jié)構(gòu).均一性不同:核酸的每種堿基都有吸收,而且相差不多,因而定量時線性很好;蛋白的20種構(gòu)件中只有三種有吸收,相互差異也較大,所以蛋白用紫外吸收定量比較困難.2、帶電機(jī)理:核酸和核苷酸既有磷酸基,又有堿性基團(tuán),所以在溶液中為兩性電解質(zhì),因磷酸的酸性強(qiáng),通常表現(xiàn)為酸性。RNA在室溫條件下被稀堿水解成核苷酸而DNA對堿較穩(wěn)定,常利用該性質(zhì)測定RNA的堿基組成或除去溶液中的RNA雜質(zhì)。氨基酸由于含有氨基和羧基,因此在化學(xué)性質(zhì)上表現(xiàn)為是的一種兼有弱堿和弱酸的兩性化合物。氨基酸在溶液中的帶電狀態(tài),會隨著溶液的pH值而變化,如果氨基酸的凈電荷等于零,在外加電場中不發(fā)生向正極或負(fù)極移動的現(xiàn)象,在這種狀態(tài)下溶液的pH值稱為其等電點(diǎn),常用pI表示。在等電點(diǎn)是,氨基酸的溶解度Z小,容易沉淀析出。

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瓊脂糖凝膠電泳檢測核酸的原理及產(chǎn)品優(yōu)勢

瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作為介質(zhì)的一種電泳方法,其兼具“分子篩”和“電泳的雙重作用。

瓊脂糖(Agarose)是一種線性多糖聚合物,是從紅色海藻產(chǎn)物瓊脂中提取而來的,當(dāng)瓊脂糖溶液加熱到沸點(diǎn)后冷卻凝固便會形成良好的電泳介質(zhì),其密度是由瓊脂糖的濃度決定的。

經(jīng)過化學(xué)修飾的低熔點(diǎn)的瓊脂糖,在結(jié)構(gòu)上比較脆弱,因此在較低的溫度下便會熔化,可用于核酸片段的電泳檢測。

瓊脂糖凝膠電泳檢測的主要是核酸的完整性和大小,只要核酸不是太小或者太大(超出電泳分離范圍),該方法的可信度非常高。

核酸會根據(jù)pH不同帶有不同電荷,在電場中受力大小不同,因此跑的速度不同,瓊脂糖凝膠電泳即根據(jù)這個原理對核酸進(jìn)行區(qū)分。

核酸分子在pH高于其等電點(diǎn)的溶液中帶負(fù)電荷,在電場中向正極移動。由于核酸的戊糖-磷酸骨架在結(jié)構(gòu)上具有重復(fù)性,長度相同的核酸鏈幾乎具有等量的凈電荷,因此它們能以同樣的速率向正極方向移動。

此外,含有瓊脂糖的凝膠具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),物質(zhì)分子通過時會受到阻力,大分子物質(zhì)在涌動時受到的阻力大,因此在瓊脂糖凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質(zhì)和數(shù)量,而且還取決于分子大小,這就大大提高了分辨能力。

在同樣電場的強(qiáng)度下,核酸分子的遷移速度取決于核酸分子本身的大小和構(gòu)型以及瓊脂糖凝膠的濃度,簡而言之,分子量較大的核酸遷移速度較慢,分子量較小的核酸遷移速度較快,這就是應(yīng)用凝膠電泳技術(shù)分離核酸片段的基本原理。

德晟公司產(chǎn)品特點(diǎn)及優(yōu)勢:

您不用再四處采購瓊脂糖、核酸染料、電泳液和loading buffer等試劑,一個試劑盒全部解決。

本試劑盒可以給您節(jié)省一個小時左右的實驗時間。

a. 省去了您制膠的繁瑣,并且預(yù)制膠是核酸染料預(yù)染的,無需電泳液染色或后染色。簡捷方便,即開即用。

b. 本試劑盒專門配備了高壓快速電泳液,如果您的核酸樣品片段在2000bp以下,電泳的快慢您可以隨時掌控,調(diào)整電壓即可,一般的mini膠最快可以5-10分鐘完成;如果您在實驗中使用的Marker或者核酸樣品條帶多、片段長(核酸樣品片段大于2000bp),您就需要根據(jù)實際情況,調(diào)節(jié)到合適的低壓,或仍使用您原來的低壓電泳條件。

3. 用本產(chǎn)品電泳得到的DNA片段進(jìn)行膠回收,不影響后續(xù)的DNA連接等反應(yīng)。

運(yùn)輸及保存:4°C保存和運(yùn)輸,有效期3個月,切勿放置于0°C以下或者常溫以上,這樣試劑盒內(nèi)的預(yù)制膠就會凍裂或變形,影響您的使用。


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