2019年11月26日，刊登在Nature communication上的研究報告指出，一種與T淋巴細胞結(jié)合的抗體衍生物，重新定向T淋巴細胞以溶解腫瘤細胞。

T細胞的免疫療法正在改變當(dāng)前癌癥ZL的前景。但是，缺乏合適的靶抗原，將這些策略限制在極少的腫瘤類型上。在這里，本文報道了一種T細胞結(jié)合抗體衍生物，該衍生物分為兩個互補的半部分，并針對抗原組合而不是單個分子?，F(xiàn)在，每半個部分都是半抗體，包含與抗CD3抗體的可變輕鏈(VL)或可變重鏈(VH)融合的抗原特異性單鏈可變片段(scFv)。當(dāng)兩個半抗體同時在單個細胞上結(jié)合各自的抗原時，它們會對齊并重組原始CD3結(jié)合位點以與T 細胞結(jié)合。本文表明，通過這種方法，T淋巴細胞可專門消除雙重抗原陽性細胞，同時保留單個陽性癌旁細胞。這使不適合當(dāng)前免疫療法的精確靶向ZL成為可能。

單克隆抗體代表了現(xiàn)代藥物ZL中增長Z快的領(lǐng)域之一。在臨床前和臨床研究中目前列出的數(shù)百種ZL性抗體和抗體衍生物中，有一些脫穎而出，其ZD是將細胞毒性T淋巴細胞重新靶向惡性細胞。其中，Z先進的是將嵌合抗原受體(CARs)轉(zhuǎn)染到T細胞和雙特異性T細胞結(jié)合抗體(BiTE)，兩者均使用單特異性單鏈可變片段(scFv)作為靶向裝置?？偟膩碚f，這些抗體衍生物所針對的靶分子是存在于惡性細胞及其未轉(zhuǎn)化的對應(yīng)物上的分化抗原，它們的結(jié)合常常引起嚴重的，甚至致命的不良事件。由于適用于基于抗體療法的真正的腫瘤特異性抗原很少見，因此本文在這里研究一種組合方法，該方法可以解決由某些類型的白血病或淋巴瘤，實體癌和其他來源的癌干細胞異常表達的抗原組合。此外，鑒于結(jié)合T細胞療法的臨床有效性，本文以雙重抗原限制的方式重定向T淋巴細胞以裂解腫瘤細胞。

半抗體消除體內(nèi)已建立的腫瘤

為了測試半抗體的潛在ZL適用性，對免疫缺陷的NOD/SCIDγ(NSG)小鼠進行了體內(nèi)免疫接種。在第1天接種螢光素酶基因標記的THP-1腫瘤細胞。在第1、22和28天，尾靜脈接種HLA-A2陰性的CD4和CD8供體T淋巴細胞。在第7天植入腫瘤細胞后，每天皮下分別注射：鹽水、單個半抗體、兩個半抗體的組合及這是雙特異性T細胞結(jié)合抗體(BiTE)對照。直到第39天。為了研究半抗體是否可以相互發(fā)現(xiàn)以實現(xiàn)靶標功能互補，將構(gòu)建體彼此分開注射在較遠的位置，一個在頸部，另一個在后肢上。盡管所有接受鹽水或單個半抗體的小鼠疾病發(fā)展迅速，并在53天內(nèi)達到了安樂死的標準，但用兩個半抗體對或BiTE對照ZL的小鼠卻排斥了已建立的腫瘤（下圖a）。接受半抗體對或BiTE對照的小鼠的總生存期顯著延長。

上圖：體內(nèi)高精度靶向癌細胞

a.通過IVIS Lumina XR實時生物發(fā)光成像，每周評估一次熒光素酶基因標記的THP-1腫瘤細胞的生長

b.每天監(jiān)測生存期，直到第110天

半體技術(shù)的組合性質(zhì)為特異性ZL開辟了新的領(lǐng)域。它可能選擇性消除不適合當(dāng)前免疫療法的人類癌癥，并且與旨在增強對靶標親和力的其他雙重或三重抗原特異性策略大不相同。

尚不清楚半抗體是否會誘導(dǎo)細胞因子釋放綜合征，這是雙特異性T細胞結(jié)合抗體(BiTEs)或針對抗原（例如CD19）的CAR-T細胞的主要缺陷。在這種情況下，甚至用半抗體處理單個靶分子也是合理的，以便將T細胞活化專門限制在腫瘤部位，同時減少血管內(nèi)T細胞活化和全身細胞因子分泌。 綜上所述，本文研究的半體技術(shù)將成為用于組合高精度免疫靶向以消除惡性細胞及其他惡性腫瘤的通用平臺。

【網(wǎng)絡(luò)研討會】dPCR在量化常用于診斷和選擇靶向ZL的基因CNVs方面的應(yīng)用
2月27日北京時間24:00（巴黎時間：17:00），來自LGC國家計量實驗室的Dr. Alexandra Whale將于Genomeweb平臺在線分享“dPCR在量化常用于診斷和選擇靶向ZL的基因CNVs方面的應(yīng)用。”

 本次網(wǎng)絡(luò)研討會將ZD討論dPCR在量化常用于診斷和選擇靶向ZL的基因CNVs方面的應(yīng)用。利用乳腺癌中的HER2基因的模型，研究dPCR測量基因拷貝數(shù)的微小變化的能力，并進一步研究以開發(fā)方法來抵消可能由樣品中連鎖的目標拷貝數(shù)引起的測量偏差。此外，還將ZD介紹dMIQE指南更新版本中的關(guān)鍵dPCR性能參數(shù)，從而促進dPCRZ佳實踐以及將dPCR作為金標準方法。

Alexandra Whale是位于LGC的國家計量實驗室(NML)的分子和細胞生物學(xué)團隊中核酸創(chuàng)新的科學(xué)帶頭人。NML是英國化學(xué)和生物分析測量的指定機構(gòu)。自2009年加入以來，她的研究集中在數(shù)字PCR的廣泛應(yīng)用，包括與微生物和KJ素耐藥性相關(guān)的DNA的定量和檢測，以及癌癥中拷貝數(shù)變異和罕見序列的檢測。
內(nèi)容簡介
自2013年數(shù)字MIQE指南:數(shù)字定量PCR實驗發(fā)表的Z低信息(the Digital MIQE Guidelines: Minimum Information for publication of Quantitative Digital PCR Experiments, dMIQE)發(fā)布以來，dPCR的應(yīng)用范圍大幅擴大，如與疾病診斷相關(guān)的單核苷酸變異(single nucleotide variance, SNVs)和拷貝數(shù)變異(copy number variance, CNVs)的檢測。與此同時，國際計量組織，如LGC的國家計量實驗室(NML)，一直致力于開發(fā)SI可追溯的分子方法，以支持將這些應(yīng)用轉(zhuǎn)化為臨床。數(shù)字PCR有可能成為一種可追溯的方法，因為靶標的濃度是根據(jù)目標陽性分區(qū)的比例和泊松統(tǒng)計的應(yīng)用來計算的。
利用乳腺癌中的HER2基因的模型，我們將研究dPCR測量基因拷貝數(shù)的微小變化的能力，并進一步研究以開發(fā)方法來抵消可能由樣品中連鎖的目標拷貝數(shù)引起的測量偏差。此外，還將ZD介紹dMIQE指南更新版本中的關(guān)鍵dPCR性能參數(shù)，從而促進dPCRZ佳實踐以及將dPCR作為金標準方法。