全部評(píng)論(1條)
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- 小啦啦gg 2017-09-22 12:56:03
- Sanger法是根據(jù)核苷酸在某一固定的點(diǎn)開(kāi)始，隨機(jī)在某一個(gè)特定的堿基處終止，并且在每個(gè)堿基后面進(jìn)行熒光標(biāo)記，產(chǎn)生以A、T、C、G結(jié)束的四組不同長(zhǎng)度的一系列核苷酸，然后在尿素變性的PAGE膠上電泳進(jìn)行檢測(cè)，從而獲得可見(jiàn)的DNA堿基序列。 其實(shí)就是在四個(gè)不同的反應(yīng)體系中加入不同的終止劑，讓DNA互補(bǔ)鏈的合成分別隨機(jī)的停止在A、C、G、T處，然后去跑個(gè)高分辨率的膠，跑的Z遠(yuǎn)的就是diyi個(gè)堿基，然后依次類(lèi)推，分別可以讀出其堿基的排序
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- 測(cè)序過(guò)程到底是如何進(jìn)行的？我知道每有一個(gè)堿基匹配正確就會(huì)發(fā)出熒光，但我的問(wèn)題如下：每個(gè)磁珠上的單克隆是同個(gè)目的基因的不同片段還是不同的目的基因，即該測(cè)序方法是能同時(shí)測(cè)序多個(gè)不同基因序列還是快速測(cè)出一個(gè)基因的序列？如果是將一個(gè)基因序列打斷到不... 測(cè)序過(guò)程到底是如何進(jìn)行的？我知道每有一個(gè)堿基匹配正確就會(huì)發(fā)出熒光，但我的問(wèn)題如下：每個(gè)磁珠上的單克隆是同個(gè)目的基因的不同片段還是不同的目的基因，即該測(cè)序方法是能同時(shí)測(cè)序多個(gè)不同基因序列還是快速測(cè)出一個(gè)基因的序列？如果是將一個(gè)基因序列打斷到不同的磁珠里，那怎樣保證分別測(cè)序后各片段序列按照原基因序列順序重新整合？該方法是否可以控制一次只結(jié)合一個(gè)堿基（如果目的序列是AAA，在T核苷酸進(jìn)入時(shí)會(huì)不會(huì)一下合出3個(gè)連續(xù)堿基）？還有就是假設(shè)目的片段長(zhǎng)為a，一個(gè)堿基進(jìn)入的時(shí)間為t，那么測(cè)量整段目的片段的用時(shí)是不是就應(yīng)該是4at？這真的很快嗎？希望強(qiáng)人幫忙解釋下，以上問(wèn)題能答多少就答多少，不勝感激！ 展開(kāi)
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