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- lyebganr71 2015-10-24 00:00:00
- 如何確定混合樣品中的氨基酸組分答：首先，氨基酸組成分析工作量不小，而且要求操作者有較高的操作水平，如果你只是為了檢測(cè)一下的話，不如花點(diǎn)錢寄出去測(cè)測(cè)，自己做有時(shí)徒勞無(wú)功啊。液相色譜是可以做，但是檢測(cè)機(jī)構(gòu)都有專門的氨基酸分析儀（雖然核心也是一個(gè)HPLC）。如果樓主堅(jiān)持自己做，那么我說(shuō)說(shuō)以前我所了解的一些東西，也就是一個(gè)大概，因?yàn)橐策^(guò)去兩年多了。希望能幫到你。氨基酸組成分析的實(shí)驗(yàn)過(guò)程（色譜法）主要分為：水解、衍生和色譜三步。先說(shuō)說(shuō)水解，主要就是酸法和酶法，酸法會(huì)對(duì)某些氨基酸有破壞作用，而酶法雖然溫和，但有時(shí)水解不完全。還是采用酸法的多一些。酸法時(shí)可以加入2%的苯酚作為保護(hù)劑，防止Met和Cys被氧化；對(duì)于Ser可以加入秋季乙醇保護(hù)，具體濃度記不清了。對(duì)了，CysZ好要保護(hù)起來(lái)，否則定量不準(zhǔn)，保護(hù)的方法可以烷基化，具體的過(guò)程可以查查文獻(xiàn)。整個(gè)過(guò)程Z好能抽真空并充氮。衍生化的方法有很多，用得多的有OPA（用熒光檢測(cè)器）和PTC（用254nm紫外檢測(cè)）兩種，都是柱前衍生，就是在上HPLC前進(jìn)行衍生化。這個(gè)樓主可以查查文獻(xiàn)，俺記不太清具體的操作了。基本上那些檢測(cè)機(jī)構(gòu)也就是這兩種衍生用得多。
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