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植物dna提取的原理和方法?其中乙醇和氯仿一異成醇各起什么作用

ARMY3野pD33 2017-11-21 17:11:46 1514  瀏覽
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全部評論(1條)

  • jmbmbmbmbm 2017-11-22 00:00:00
    植物DNA提取方法是采用CTAB法。 CTAB,是一種陽離子去污劑,能與核酸形成復合物,此復合物在高鹽(>0.7mol/L) 濃度下可溶,并穩(wěn)定存在,但在低鹽濃度(0.1~0.5mol/L NaCl)下CTAB-核酸復合物就因溶解度降低而沉淀,而大部分的蛋白質及多糖等仍溶解于溶液中。通過有機溶劑抽提,去除蛋白、多糖、酚類等雜質后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來。經離心棄上清后,CTAB-核酸復合物再用70%酒精浸泡可洗脫掉CTAB。 無水乙醇:沉淀DNA。乙醇的優(yōu)點是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學反應,對DNA很安全,因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在,當加入乙醇時,乙醇會奪去DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合。 氯仿:克服酚的缺點;加速有機相與液相分層。 異戊醇:減少蛋白質變性操作過程中產生的氣泡。異戊醇可以降低表面張力,從而減少氣泡產生。另外,異戊醇有助于分相,使離心后的上層含DNA的水相、中間的變性蛋白相及下層有機溶劑相維持穩(wěn)定。

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