液相色譜儀除了日常維護保養(yǎng)外，使用高純度溶劑不僅能保護液相系統(tǒng)，也能增加結(jié)果的可靠性。HPLC級表示化學(xué)試劑的純度，是可在GX液相色譜中使用的試劑的純度，制備色譜法、平行分析或梯度分析需要使用到不同的HPLC級試劑。

         樣品在注入液相系統(tǒng)前，必須選擇一種合適的HPLC溶劑。在反相GX液相色譜中，當(dāng)樣品溶劑與流動相的洗脫強度有差異,尤其是前者的洗脫強度較強時,就會產(chǎn)生峰的變形及柱效的降低。解決該問題最有效的方法是使用流動相作為溶劑溶解樣品,這樣既可以避免樣品溶劑和流動相之間任何強度或粘度的不匹配，也可以減少樣品分析時基線的漂移。溶劑在流動相中起著重要的作用，并有助于將進樣品通過分離柱后輸送到檢測器。為了滿足不同的分析要求，可以購買不同純度等級的溶劑來使用，HPLC分析需要使用高純度的溶劑，但是同時也要考慮成本和實用性等方面。

         HPLC級溶劑的純度通常超過99.9％，并且瓶身標(biāo)簽上還會標(biāo)明其他雜質(zhì)的含量。但是雜質(zhì)會導(dǎo)致多余的峰，從而干擾色譜圖中的主峰，對我們的分析結(jié)果產(chǎn)生干擾。雜質(zhì)產(chǎn)生的原因有很多，可能溶劑純度不夠，可能是瓶身不干凈或者軟管不干凈，還可能是溶劑吸濾頭的過濾雜質(zhì)效果不好。恒譜生不銹鋼流動相進樣口過濾器能安全有效地保護泵和止回閥，尺寸小，適用于各種品牌的HPLC系統(tǒng)和多種小瓶口的存儲池容器。吸濾阻力較小，幾乎沒有背壓和形成空化，兼容多種流動相管路，無需換吸濾頭即可配不同規(guī)格的吸管，過濾微粒污染物效果好，無氣泡，溶劑利用率高。

        在整個紫外線可見波長范圍內(nèi)，沒有溶劑是100％透明的，常用的HPLC溶劑在一定波長范圍內(nèi)顯示出透明性。大多數(shù)應(yīng)用中會使用紫外線檢測器，因此所選的溶劑應(yīng)該盡可能具有低的紫外線截止波長，讓大多數(shù)的樣品組分在高于截止值的波長處顯示出可測量的吸收度。除此之外，溶劑的粘度越高，填充柱中固定相的阻力將導(dǎo)致背壓越高，因此所選溶劑也應(yīng)具有低粘度才是比較理想的。

        大多數(shù)的溶劑在密封瓶中才能維持它的穩(wěn)定性，但某些溶劑的保存期限有限。使用時要注意查看使用期，注意在有效期內(nèi)使用，不要購買過多的溶劑避免ZH用不完產(chǎn)生了浪費行為。

      作為ZH的建議，所有溶劑在使用前通過進樣口過濾器過濾并脫氣，這樣的預(yù)防措施將提高HPLC系統(tǒng)的使用壽命，也有助于增加分析結(jié)果的可靠性。

       每個實驗室的色譜分析工作者都很清楚，HPLC 分析使用液體作為載體，它將注入的樣品溶液輸送到色譜柱然后輸送到檢測器。這種載體可以是緩沖液與有機溶劑的水-有機混合物、有機-有機混合物。HPLC 系統(tǒng)的管道和閥門通道非常狹窄，使用未經(jīng)適當(dāng)過濾的溶液可能會導(dǎo)致堵塞。通過液相色譜儀運行清潔、無顆粒的 HPLC 級溶劑是一項基本維護方案。

一、對HPLC 系統(tǒng)的影響：

       使用過濾流動相以去除顆粒物質(zhì)能夠防止導(dǎo)致色譜柱堵塞，色譜柱不僅很昂貴而且被顆粒物堵塞會導(dǎo)致背壓增加或保留時間發(fā)生變化；還能大限度地減少由于 LCMS、UPLC 和 HPLC 等靈敏度高的儀器設(shè)備中的精密閥門和管路堵塞而導(dǎo)致的系統(tǒng)停機時間。高級色譜溶劑/超純水通常通過 0.2 微米過濾器進行預(yù)過濾，以滿足其在色譜系統(tǒng)中使用的等級。但是，有時您也使用這些溶劑（含或不含化學(xué)試劑和添加劑）制備（混合）自己的流動相。當(dāng)您使用這些試劑級化學(xué)品或添加劑制備流動相時，還應(yīng)該在使用前通過 0.2 微米玻璃或鋼過濾器過濾混合物，這可以確保您的流動相儲液瓶在使用過程中是沒有污垢和灰塵等雜質(zhì)。

二、溶劑過濾器的重要性：

       過濾和過濾器（又稱溶劑吸濾頭、流動相吸濾頭等）在 LC 系統(tǒng)中是非常重要的，因為流動相流路中如果存在微粒，LC 系統(tǒng)中的許多組件都容易過早失效。例如，從溶劑瓶中抽出的流動相中的灰塵或其他微粒會導(dǎo)致泵止回閥部分失效或完全失效（泵根本不產(chǎn)生流量）。所以在選擇流動相溶劑進行任何分析之前檢查流動相溶劑的完全混溶性很重要，同樣重要的是檢查它們在混合時不會相互反應(yīng)。否則懸浮顆粒物會導(dǎo)致柱內(nèi)積聚并產(chǎn)生背壓，從而影響流速和損壞泵的組件。最壞的情況還可以是接頭處可能會出現(xiàn)流動相泄漏并伴隨著分析運行停止的情況發(fā)生。還有最明顯的故障模式涉及進樣樣品或儀器組件中的微粒積聚在色譜柱入口處，從而導(dǎo)致色譜柱堵塞。

三、選擇溶劑過濾器的選擇：

       選擇合適的過濾器需要了解過濾器/溶劑相容性以及過濾器的化學(xué)/物理特性。這些特性包括孔徑、孔分布、過濾器厚度、可提取物、疏水/親水特性、結(jié)合特性、熱原性、氣體和液體流速、爆破強度、高壓滅菌性、孔徑和標(biāo)稱顆粒保留。選擇不正確的過濾器可能會導(dǎo)致可提取材料危及分析結(jié)果。對于色譜分析，可萃取材料產(chǎn)生的情況包括樣品吸收、共流出和外來峰。在液相色譜的應(yīng)用中通常選擇孔徑為 0.45μm的在線過濾器，而對于細菌去除或超高液相色譜應(yīng)用中則適宜選擇 0.2μm 的在線過濾器。

       今天恒譜生分享的知識先到這啦，希望對您的工作有所幫助！

什么是色譜儀？