關(guān)于dna提取的原理、步驟、結(jié)果。
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- 我是開學(xué)高三的學(xué)生.這個(gè)問題是作業(yè). - 我想要很簡練、很專業(yè)、很有條理性的總結(jié). 植物和動(dòng)物的都要.別給我復(fù)制一堆過來. - 回答的很好追加50分.
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- yuzmzz 2009-08-31 00:00:00
- 你們書上應(yīng)該有的，自己看來得快。
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- 真真切切ii 2009-08-27 00:00:00
- 原理： 1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。 2.用冷酒精提取出含雜質(zhì)較少的DNA。 3.DNA在沸水浴時(shí)被二苯胺染成藍(lán)色。 方法步驟： 1．提取細(xì)胞核物質(zhì)：順時(shí)針方向攪拌，稍快，稍重。 5 min 2．溶解DNA： 3．析出含DNA的黏稠物：蒸餾水300mL，逆時(shí)針方向攪拌，緩慢 4．過濾：取黏稠物 5．再溶解：順時(shí)針方向攪拌，較慢。3 min 6．過濾：取濾液。 7．提取出含雜質(zhì)較少的DNA，逆時(shí)針方向攪拌，稍慢。5 min 8．DNA的鑒定：沸水浴5min 大學(xué)： DNA提取分為三個(gè)基本步驟，每個(gè)步驟的具體方法可根據(jù)樣品種類、影響提取的物質(zhì)以及后續(xù)步驟的不同而有區(qū)別。 利用研磨或者超聲破碎細(xì)胞，并通過加入去污劑以除掉膜脂。 加入蛋白酶，醋酸鹽沉淀，或者酚/氯仿抽提，以除掉細(xì)胞內(nèi)的蛋白，如與DNA結(jié)合的組蛋白。 將DNA在冷乙醇或異丙醇中沉淀，因?yàn)镈NA在醇中不可溶而黏在一起，這一步也能除掉鹽分。 另外，目前也有利用吸附過柱的方法提取DNA的商業(yè)化試劑盒。 2.細(xì)胞的破碎 細(xì)菌有堅(jiān)硬的細(xì)胞壁，首先要破碎經(jīng)胞。方法有三種;①機(jī)械方法：超聲波處理法、研磨法、勻漿法;②化學(xué)試劑法：用SDS處理細(xì)胞;③酶解法：加入溶菌酶或蝸牛酶，都可使細(xì)胞壁破碎。 3.DNA提取的幾種方法 (1).濃鹽法 A. 利用RNA和DNA在電解溶液中溶解度不同，將二者分離，常用的方法是用1M 氯 納提取化鈉抽提，得到的DNP粘液與含有少量辛醇的 氯仿一起搖蕩，使乳化，再離心除去蛋白質(zhì)，此時(shí)蛋白質(zhì)凝膠停留在水相及氯仿相中間，而DNA位于上層水相中，用2倍體積95%乙醇可將DNA 鈉鹽沉淀出來. B. 也可用0.15 MNaCL液反復(fù)洗滌細(xì)胞破碎液除去RNP，再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白，再按氯仿---異醇法除去蛋白. 兩種方法比較，后種方法使核酸降解可能少一些. C.以稀鹽酸溶液提取DNA 時(shí)，加入適量去污劑，如SDS可有助于蛋白質(zhì)與DNA 的分離。在提取過程中為YZ組織中的DNase對(duì)DNA 的降解作用，在氯化鈉溶液中加入檸檬酸鈉作為金屬離子的烙合劑.通常用.15MNaCL，0.015M檸檬鈉，并稱SSC溶液，提取DNA. （2）.陰離子去污劑法; 用SDS或二甲苯酸鈉等去污劑使蛋白質(zhì)變性，可以直接從生物材料中提取DNA .由于細(xì)胞中DNA與蛋白質(zhì)之間常借靜電引力或配位鍵結(jié)合，因?yàn)殛庪x子去污劑能夠破壞這種價(jià)鍵，所以常用陰離子去污劑提取DNA （3）.苯酚抽提法：苯酚作為蛋白變性劑，同時(shí)YZ了DNase的降解作用.用苯酚處理勻漿液時(shí)，由于蛋白與DNA 聯(lián)結(jié)鍵已斷，蛋白分子表面又含有很多極性基團(tuán)與苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。離心分層后取出水層，多次重復(fù)操作，再合并含DNA 的水相，利用核酸不溶于醇的性質(zhì)，用乙醇沉淀DNA 。此時(shí)DNA是十分粘稠的物質(zhì)，可用玻璃漫漫繞成一團(tuán)，取出。此法的特點(diǎn)是使提取的DNA保持天然狀態(tài) （4）.水抽提法:利用核酸溶解于水的性質(zhì)，將組織細(xì)胞破碎后，用低鹽溶液除去RNA，然后將沉淀溶于水中，使DNA充分溶解于水中，離心后收集上清液.在上清中加入固體氯化鈉調(diào)節(jié)至2.6M.加入2倍體積95%乙醇，立即用攪拌法攪出.然后分別用66% ，80%和95%乙醇以及丙銅洗滌，Z后在空氣中干燥，既得DNA樣品.此法提取的DNA中蛋白質(zhì)含量較高，故一般不用.為除蛋白可將此法加以改良，在提取過程中加入SDS. 結(jié)果就是得到DNA 我是學(xué)分子生物學(xué)的！分子生物學(xué)是生命科學(xué)Z重要的科目！如果你都對(duì)這些感興趣，加油考個(gè)好大學(xué)！祝你好運(yùn)！
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- 關(guān)于DNA提取的重新處理 謝謝！
- 具體的情況是：我用CTAB法提取DNA 在用異丙醇沉淀過夜后，然后離心，發(fā)現(xiàn)有個(gè)管子的離心產(chǎn)物（DNA）雜質(zhì)非常的多，請(qǐng)問如何進(jìn)一步處理，使得雜質(zhì)減少？謝謝！主要是想問如何處理后，在加入苯酚氯仿異戊醇。。謝謝。。
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玻璃瓶耐內(nèi)壓力測(cè)試儀SCK-Y
眾所周知，抗生素類藥品主要用于YL方面。人熟知的青霉素、頭孢等抗生素類藥物L(fēng)X確實(shí)，作用可靠，是臨床上常用的抗感染藥物之一。由于它們的化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，一般多制成粉針劑供臨床使用。所以藥瓶的耐耐內(nèi)壓力測(cè)試至關(guān)重要，制藥的企業(yè)也越來越了解到抗生素瓶耐內(nèi)壓力測(cè)試儀的重要性。那么應(yīng)該用什么儀器檢測(cè)呢？其檢測(cè)試驗(yàn)步驟具體是怎么操作的呢？廣州標(biāo)際包裝設(shè)備有限公司就這方面為大家做個(gè)簡單介紹。
SCK-Y玻璃瓶耐內(nèi)壓力測(cè)試儀，該儀器適用于各種啤酒瓶、酒瓶、飲料瓶、輸液瓶、抗生素西林瓶等各類玻璃瓶耐內(nèi)壓力測(cè)試，產(chǎn)品依據(jù)GB/T4546-2008（玻璃容器 耐內(nèi)壓力試驗(yàn)方法）標(biāo)準(zhǔn)中實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目規(guī)定，全自動(dòng)顯示整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程壓力變化，能夠滿足各容量玻璃保壓試驗(yàn)和爆破壓力試驗(yàn)要求，玻璃瓶耐內(nèi)壓力測(cè)試機(jī)是各啤酒廠、玻璃瓶廠家、質(zhì)檢機(jī)構(gòu)、制藥生產(chǎn)企業(yè)必備檢測(cè)儀器。
其測(cè)試原理為：
通過設(shè)備由伺服電機(jī)帶動(dòng)的液壓泵產(chǎn)生的壓力經(jīng)管道以等值方式分別傳遞到壓力傳感器和被測(cè)試的玻璃樣品瓶內(nèi)，設(shè)備控制器從壓力傳感器實(shí)時(shí)采集壓力信號(hào)并根據(jù)壓力信號(hào)值控制伺服電機(jī)帶動(dòng)液壓泵使系統(tǒng)內(nèi)壓力變化按照標(biāo)準(zhǔn)以及ISO標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的要求進(jìn)行線性增加直至達(dá)到預(yù)先設(shè)定值，在加壓或保壓過程中，如被測(cè)試樣品瓶破裂，即為不合格，如測(cè)試結(jié)束系統(tǒng)自動(dòng)泄壓后，被測(cè)試樣品瓶仍完好，既為合格。
其檢測(cè)試驗(yàn)方法為：
玻璃瓶耐內(nèi)壓測(cè)試儀實(shí)驗(yàn)方法有A通過性試驗(yàn)、B通過性試驗(yàn)和C破壞性試驗(yàn)三種方法，下面，廣州標(biāo)際的工程師簡單的介紹玻璃瓶耐內(nèi)壓力測(cè)試儀通過性試驗(yàn)方法：
?。?） 按【設(shè)定】鍵進(jìn)入?yún)?shù)設(shè)定界面；
?。?）將試驗(yàn)?zāi)Ｊ皆O(shè)定為“A通過性”， 按【確定】鍵保存；
?。?）將定點(diǎn)值設(shè)定為試樣試驗(yàn)要求值，按【確定】鍵保存；
?。?）將保壓時(shí)間設(shè)定為60s，按【確定】鍵保存；
?。?） 按【設(shè)定】鍵返回試驗(yàn)界面；
?。?）打開箱門，左手持瓶，將其平行推入夾板中(夾板在非試驗(yàn)時(shí)應(yīng)處于常開狀態(tài))，右手搬動(dòng)球形手柄將瓶口密封（此時(shí)夾板前面應(yīng)平行），然后關(guān)閉箱門；不同瓶型的瓶口高度可能不同，可以旋轉(zhuǎn)壓頭來調(diào)節(jié)壓頭與瓶口的距離，以達(dá)到更好的密封效果，壓緊度以手轉(zhuǎn)不動(dòng)樣瓶為宜）
?。?）按【下降】鍵，開始自動(dòng)加壓；當(dāng)壓力達(dá)到設(shè)定目標(biāo)值時(shí)，開始保壓；到達(dá)保壓時(shí)間后，壓桿自動(dòng)返回到初始位置；
?。?）按【打印】鍵，打印試驗(yàn)結(jié)果；
?。?）試驗(yàn)結(jié)束，打開箱門，若樣瓶完好則樣瓶合格，然后左手持瓶，右手搬開球形手柄，取出樣瓶；若樣瓶破裂則樣瓶不合格，用手扶住夾板，直接搬開球形手柄，使碎瓶子直接落入箱中，小心劃手。
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