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給出一種酶,如何設計其純化方案?

nice夢總 2008-01-21 05:19:17 462  瀏覽
  • 1、這是哈爾濱工業(yè)大學威海校區(qū)《生化分離工程》的; 2、酶不知道是胞內產物還是胞外產物; 3、要考慮不同性質的酶; 4、純化方案從粗分級到細分級應詳細說明。

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全部評論(1條)

  • 小啦啦gg 2008-01-22 00:00:00
    如果是蛋白質酶,可以考慮 1、沉淀, 2、電泳:蛋白質在高于或低于其等電點的溶液中是帶電的,在電場中能向電場的正極或負極移動。根據支撐物不同,有薄膜電泳、SDS-PAGE、凝膠分離電泳,HPLC等。 3、透析:利用透析袋把大分子蛋白質與小分子化合物分開的方法。 4、層析: a.離子交換層析,利用蛋白質的兩性游離性質,在某一特定PH時,各蛋白質的電荷量及性質不同,故可以通過離子交換層析得以分離。如陰離子交換層析,含負電量小的蛋白質首先被洗脫下來。 b.分子篩,又稱凝膠過濾。小分子蛋白質進入孔內,滯留時間長,大分子蛋白質不能時入孔內而徑直流出。 5、超速離心:既可以用來分離純化蛋白質也可以用作測定蛋白質的分子量。不同蛋白質其密度與形態(tài)各不相同而分開。

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