哪里有用放免法測定性激素的試劑盒

zongabyingl 2014-10-07 01:08:07 520 瀏覽

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2014-10-08 00:00:00

沒有一支溫度計，是不安寧的時間心臟跳動，不要讓她清晰，美麗的容顏啊把我們從沉睡中喚醒，而陳腐的碼頭的氣息，如一座馬廄，他把時間挪的挪哈哈

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哪里有用放免法測定性激素的試劑盒:

人血漿內(nèi)皮素放免法測定試劑盒多少錢:

性腺激素放免試劑盒在哪里可以買到？價格大約多少？: 液相平衡競爭放射免疫分析法，檢測促卵泡生成素(FSH) 、促黃體生成素(LH) 、雌二醇（E2）、孕酮（P）、睪酮（T）激素水平．本人急需放免試劑盒，請問在那里能買到？價格大約多少？

pac固體放水里多久有用:

性激素的生理功能:

性激素的代謝過程:

性激素療法的臨床:

人α干擾素(IFN-α)ELISA酶免試劑盒技術使用說明書

試驗原理：

IFN-Α試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知IFN-Α濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將IFN-Α和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IFN-Α的濃度呈比例關系。

試劑盒內(nèi)容及其配制：

試劑盒成份	96孔配置	48孔配置
96/48人份酶標板	1塊板（96T）	半塊板（48T）
塑料膜板蓋	1塊	半塊
標準品：1000pg/ml	1瓶（1.0ml）	1瓶（0.5ml）
空白對照	1瓶（1.0ml）	1瓶（0.5ml）
標準品稀釋緩沖液	1瓶（8.0ml）	1瓶（4.0ml）
生物素標記的抗IFN-Α抗體	1瓶（8.0ml）	1瓶（4.0ml）
親和鏈酶素-HRP	1瓶（12ml）	1瓶（5ml）
洗滌緩沖液	1瓶（20ml）	1瓶（10ml）
底物A	1瓶（6.0ml）	1瓶（3.0ml）
底物B	1瓶（6.0ml）	1瓶（3.0ml）
終止液	1瓶（6.0ml）	1瓶（3.0ml）

自備材料：

1. 蒸餾水。

2. 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

樣品收集、處理及保存方法：

1、血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅

細胞迅速小心地分離。

2、血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、細胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。

5、保存……如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

人α干擾素（IFN-α）elisa試劑盒操作注意事項

● 試劑應按標簽說明書儲存，使用恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

● 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

● 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)使用。

● 使用次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

● 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

● 底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

● 加入試劑的順序應致，以保證所有反應板孔溫育的時間樣。

● 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

安全性：

1. 避免直接接觸終止液和底物A、B，旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2. 實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

試劑的準備：

1. 標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：

1000 pg/ml	（6號標準品）	原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
500 pg/ml	（5號標準品）	100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液
250 pg/ml	（4號標準品）	100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液
125 pg/ml	（3號標準品）	100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液
62.5 pg/ml	（2號標準品）	100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液
31.2 pg/ml	（1號標準品）	100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液
0 pg/ml	（空白對照）	原倍濃度不用稀釋直接加入50ul

2. 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。

試劑盒性能：

1. 靈敏度：*小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。

2. 特異性：不與其它細胞因子反應。

3. 重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

人α干擾素（IFN-α）ELISA試劑盒操作步驟：

1. 使用，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。

2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。

3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。

4. 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加次。

5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。

6. 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加次。

7. 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。

8. 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結(jié)果。

9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。

結(jié) 果判斷與分析：

1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的IFN-Α標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的IFN-Α含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度，再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

3、檢測值范圍： 0-1000pg/ml

4、敏感度:3.9pg/ml

2021-04-20 10:40:52 450 0

性激素生化是什么: 性激素生化是什么

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