目的 

       建議的美國藥典USP23要求，對于純化水（PW） 和注射用水（WFI），應(yīng)使用總有機碳含量（TOC） 測定替代當前的易氧化物測試。為支持使用自動進 樣器在實驗室測量TOC的建議要求，Z小化并去除 來自試管及樣品準備過程的背景碳，是非常關(guān)鍵的。 

適用范圍 

       本文設(shè)計用于協(xié)助制藥公司遵循水質(zhì)量的建議規(guī)格。 本文檢驗了幾種不同的試管和玻璃器皿清洗方法。 

       在試管中進行總碳分析時，背景污染可有多種不同 的來源。Z大的潛在背景碳含量來源之一，可以直 接來自用于試管漂洗和樣品制備的水源。為了進行 此測定，可使用諸如本研究所用的Sievers* 800型 等在線TOC分析儀直接測量水源中的總有機碳 （TOC）含量。如果水源是商品瓶裝水，則應(yīng)從容 器直接取樣進行該分析。如果水源為實驗室水系統(tǒng)， 充注1升干凈的玻璃燒瓶并從該燒瓶取樣進行分析。 表1顯示了使用這些技術(shù)在Sievers分析儀得到的結(jié)果。

表1 不同低TOC水及取樣方法比較

**Sievers分析儀

       當水轉(zhuǎn)移到燒瓶和試管內(nèi)時很容易被污染，正如以 上所示，Sievers分析儀的水轉(zhuǎn)移到燒瓶中的TOC含 量更高。如果可能的話，檢驗所選水源類型，以顯示其具有穩(wěn)定的低TOC。 

       污染的第二個主要來源可來自試管和清洗步驟。為了測定TOC背景污染的初始程度，請使用強烈的清 洗步驟。在科學(xué)界廣泛使用的清洗實驗室玻璃器皿的方法是鉻酸溶液（Sievers分析儀技術(shù)方案914- 80005），已經(jīng)被從美國藥典的實驗室玻璃器皿清 洗<1051>章中去除。使用該步驟清洗的試管和其他 玻璃器皿將獲得較低的TOC背景污染。在獲得較低 的背景污染之后，需要慎重檢驗更溫和的清洗步驟 以獲得同樣的結(jié)果。這里所檢驗的腐蝕性Z小的化 學(xué)清洗步驟是CIP-100洗滌劑。作為清洗劑的替代 方案，可使用馬弗爐清洗玻璃器皿。馬弗爐工藝需 要的人工更少，但初始設(shè)備成本巨大。如表2所示， 硫酸清洗、馬弗爐和CIP-100洗滌劑清洗過程與鉻 酸清洗過程的結(jié)果相當。CIP-100洗滌劑的一個優(yōu) 點是只需要10次漂洗，而與之相比，其他清洗劑需 要15或20次漂洗。Alconox實驗室洗滌劑不建議作為低TOC工作的清洗劑。

       當表 2 中所使用的試管 ， 加入足夠的苯醇醚 （Octoxynol）（Triton X-100），形成當充滿去離 子水時50 ppm（以碳計）的溶液，這時的清洗是有 挑戰(zhàn)性的。使這些標準添加溶液在各試管中干燥， 然后進行各種清洗步驟。

       當細菌污染成為問題時，微生物群落存在類似的情 況。在這里開發(fā)了無菌化技術(shù)，以應(yīng)對微生物工作 中遇到的交叉污染問題。 此概念可部分適用于碳樣品的制備。

例如，適合碳 樣品制備的無菌化概念為：

1) 避免直接觸摸墊片、移液管、自動取樣器針和其 他與樣品直接接觸的設(shè)備， 

2) 制備樣品時時避免對著它們呼吸， 

3) 避免采集前幾毫升的樣品流，采集樣品前等待， 直到一些體積經(jīng)過并凈化管道后，并且 

4) 當將試管載入自動取樣器時避免接觸覆蓋試管的隔膜。

       第二種意見是僅使用新試管進行 TOC 分析。這種做 法費錢費力，因為這些新試管需要進行 15 次漂洗 的準備步驟。使用此方法獲得的 TOC 值列在表 3 中。

       而另一種方法是購買制造商預(yù)清洗的試管。然而此 處列出的試管，供應(yīng)商沒有直接測試其 TOC，而是 測試其揮發(fā)性有機化合物。因此，沒有保證其Z大 TOC 含量。這些預(yù)清洗的試管充注 Sievers 低有機 物去離子水，并在儀器上進行分析。結(jié)果如圖 4 所 示。   

       減小背景碳污染的第三步是遵守嚴格的制備技術(shù)。 特別小心地處理與樣品接觸的試劑和設(shè)備，因為碳 污染無處不在。 

     例如，儲存在塑料袋中的墊片，如果手伸入內(nèi)部時， 可能受到殘留的手紋油的污染。表 5 顯示了使用故意被手紋直接污染的隔膜時更高的 TOC 含量。右列 顯示了在樣品制備時上下表面皆有觸摸的隔膜。碳污染量是樣品制備時與臟手或表面接觸程度的反映。

結(jié)論 

在樣品制備的三個方面敘述了背景碳的潛在原 因。要在低碳背景污染下獲得穩(wěn)定的 TOC 結(jié)果， 水、試管和樣品制備方法都必須仔細地監(jiān)控。

表2 試管清洗的不同清洗方案比較

表3 新試管的漂洗與測試

表4 預(yù)清潔試管充滿并測試

表5 樣品制備時無菌相對非無菌化墊片觸摸