掃描透射電子顯微鏡（STEM）作為現(xiàn)代材料科學(xué)、納米技術(shù)以及生物學(xué)研究中的關(guān)鍵工具，其性能與成像質(zhì)量在很大程度上依賴于參數(shù)的合理選擇。本文將探討科學(xué)合理設(shè)置掃描透射電子顯微鏡的關(guān)鍵參數(shù)，幫助用戶在精確成像和樣品保護(hù)之間找到平衡點(diǎn)，從而提升實(shí)驗(yàn)效率與數(shù)據(jù)質(zhì)量。通過系統(tǒng)了解不同參數(shù)的作用與調(diào)節(jié)策略，研究人員可以優(yōu)化儀器設(shè)置，獲得更清晰、更可靠的微觀圖像。

在選用掃描透射電子顯微鏡的參數(shù)時(shí)，首先需要關(guān)注的核心參數(shù)包括加速電壓、掃描速率、暗場(chǎng)與亮場(chǎng)成像條件以及像差校正等。這些參數(shù)不僅影響成像分辨率，還關(guān)系到樣品的安全與數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。合理的參數(shù)調(diào)節(jié)能有效減少樣品損傷，提升成像效率，同時(shí)確保獲得高質(zhì)量的圖像信息。

加速電壓是STEM操作中的要素，通常在80 kV到300 kV之間選擇。較低的加速電壓適合觀察輕元素或脆性材料，減少樣品輻照損傷；而高電壓則能夠達(dá)到更高的分辨率和穿透能力，適合厚樣品的細(xì)節(jié)觀察。選擇合適的電壓應(yīng)根據(jù)樣品性質(zhì)和研究目的綜合考慮，確保既能實(shí)現(xiàn)所需的分辨率，又不對(duì)樣品造成過度損傷。

掃描速率也是至關(guān)重要的參數(shù)，過快的掃描可能導(dǎo)致像素信噪比降低，使圖像模糊；而過慢或過細(xì)的掃描則會(huì)增加曝光時(shí)間，增加樣品受到的輻射劑量。通常采用中等掃描速度，以平衡成像質(zhì)量與樣品保護(hù)。在高分辨率觀察時(shí)，可以使用逐像素激發(fā)方式，提高圖像的細(xì)節(jié)表現(xiàn)。

亮場(chǎng)與暗場(chǎng)成像方式的選擇，取決于樣品的特點(diǎn)和研究需求。亮場(chǎng)成像適合觀察具有高對(duì)比度的整體結(jié)構(gòu)，而暗場(chǎng)則能突出微細(xì)結(jié)構(gòu)或缺陷，對(duì)于分析晶格畸變、缺陷區(qū)域具有優(yōu)勢(shì)。正確選擇成像模式，有助于突出樣品的關(guān)鍵特征，提升分析的針對(duì)性和深度。

像差校正技術(shù)的應(yīng)用，近年來極大提升了STEM的成像能力。通過精確校正球差、像差等參數(shù)，可以獲得近乎的像素級(jí)別的成像效果，極大增強(qiáng)了微觀結(jié)構(gòu)的可辨認(rèn)度。在實(shí)際操作中，應(yīng)根據(jù)儀器的像差補(bǔ)償系統(tǒng)合理調(diào)節(jié)參數(shù)，確保成像的清晰度與穩(wěn)定性。

設(shè)備的調(diào)試還包括樣品的準(zhǔn)備與定位，細(xì)節(jié)操作關(guān)系到參數(shù)設(shè)置的效果。樣品的均勻性、厚度以及載物臺(tái)的穩(wěn)定性會(huì)影響成像結(jié)果。在樣品的前處理環(huán)節(jié)，減少雜質(zhì)和裂紋，有助于獲得更純凈的成像效果。調(diào)節(jié)焦距、調(diào)節(jié)偏置值等，也需依據(jù)實(shí)際情況細(xì)心調(diào)整，以保證圖像的高質(zhì)量。

現(xiàn)代STEM配備了多種先進(jìn)的檢測(cè)器和成像技術(shù)，比如高角環(huán)形暗場(chǎng)（HAADF）等，這些都需要在參數(shù)設(shè)置中合理配置。選擇合適的檢測(cè)器、調(diào)節(jié)其偏置和采集參數(shù)，能夠顯著增強(qiáng)樣品的對(duì)比度和細(xì)節(jié)表現(xiàn)，提升分析的深度和度。

總結(jié)而言，掃描透射電子顯微鏡參數(shù)的科學(xué)選擇不僅關(guān)乎成像的清晰度和可靠性，更關(guān)系到樣品的健康和研究的效率。從加速電壓、掃描速度到成像方式、像差校正，每個(gè)參數(shù)都需結(jié)合樣品特性和研究目標(biāo)靈活調(diào)整。這需要操作者具備豐富的經(jīng)驗(yàn)與理論知識(shí)，才能在實(shí)際操作中做出優(yōu)的參數(shù)配置，從而大限度地發(fā)揮STEM的潛能，為科學(xué)研究提供堅(jiān)實(shí)的技術(shù)支撐。

導(dǎo)讀

經(jīng)過前面的幾期學(xué)習(xí)，相信大家對(duì)顯微鏡的基礎(chǔ)知識(shí)已經(jīng)有了足夠的了解，自信心提的滿滿的吆！接下來就可以根據(jù)實(shí)際需求來選擇對(duì)應(yīng)的顯微鏡了。

讓我們一起走進(jìn)ECHO顯微鏡的世界，挑選一臺(tái)屬于你的顯微鏡吧。

熒光電動(dòng)顯微鏡—Revolve

ECHO顯微鏡顛覆了大家對(duì)顯微鏡的認(rèn)知，是對(duì)傳統(tǒng)顯微鏡設(shè)計(jì)的重新思考，是真正意義上的設(shè)計(jì)一體化和操控顯示一體化，易學(xué)易用，使枯燥的實(shí)驗(yàn)變得簡(jiǎn)單有趣。

高分辨率3D成像，獲得最佳成像效果

Revolve顯微鏡采用實(shí)時(shí)反卷積(DHR)，增加寬場(chǎng)熒光顯微鏡圖像銳度，抑制噪聲減少模糊，提高熒光檢測(cè)分辨率。自動(dòng)Z軸配合實(shí)時(shí)反卷積(DHR)功能，在保持高分辨率的同時(shí)，對(duì)較厚樣本進(jìn)行全景深掃描合成，實(shí)現(xiàn)3D高分辨成像。

正倒置一體，一機(jī)兩用

Revolve顯微鏡既可以正置觀察，也可以倒置觀察，在正置和倒置之間自由轉(zhuǎn)換。使用戶不再因?yàn)闃悠返牟煌謩e購(gòu)置正置和倒置兩類顯微鏡，一機(jī)實(shí)現(xiàn)切片、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶和多孔板等多種樣本類型的觀察需求。在降低設(shè)備成本的同時(shí)，也節(jié)約了空間。試問：我還需要糾結(jié)選擇買正置還是倒置嗎，當(dāng)然是都要嘍。

智能化操作，高效便捷

Revolve顯微鏡采用自動(dòng)熒光的方式，可以快速捕捉熒光信號(hào)，避免熒光淬滅。自動(dòng)雙相機(jī)系統(tǒng)保證了明場(chǎng)和熒光條件下都可以獲得好的觀察效果。智能化的軟件使操作變得更加簡(jiǎn)單。

明場(chǎng)顯微鏡—Rebel

隨著Revolve的問世，ECHO顯微鏡的設(shè)計(jì)理念深受用戶的喜歡，但是對(duì)于沒有熒光需求的用戶，一款正倒置兼?zhèn)涞腞ebel足矣。

自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)軟件，無需特殊耗材

Rebel為滿足更多的用戶需求，特別開發(fā)了自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)軟件。區(qū)別于市場(chǎng)上的細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀，Rebel兼具顯微鏡與計(jì)數(shù)功能于一身。不再需要特殊的觀察耗材，可使用玻片、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶等耗材進(jìn)行細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)。

高效便捷的網(wǎng)絡(luò)共享方式

Rebel還具有非常高效便捷的網(wǎng)絡(luò)共享方式，通過WIFI、Internet等多種通訊方式，可以實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)、病例分享和多人會(huì)診。

全電動(dòng)顯微鏡—Revolution

針對(duì)更高級(jí)別用戶需求，ECHO又推出了Revolve進(jìn)階版Revolution，正倒置一體化設(shè)計(jì)，帶來更多應(yīng)用場(chǎng)景；雙相機(jī)系統(tǒng)保證了確保效果最優(yōu)；實(shí)時(shí)反卷積功能配合高速Z-Stacking功能，提高熒光檢測(cè)的分辨率。獨(dú)特的觸屏控制XY自動(dòng)載物臺(tái)功能，便于觀察樣品的定位；對(duì)于大樣品掃描成像，電動(dòng)載物臺(tái)和Hyperscan功能結(jié)合,使掃描速度提升了一倍。對(duì)于活細(xì)胞的觀察，活細(xì)胞工作站和多功能智能化聯(lián)動(dòng)，保證了活細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間的觀察。

最后，我們一起來看一下ECHO顯微鏡下的微觀世界吧。

看到這樣一臺(tái)成像質(zhì)量好，操作簡(jiǎn)單，適用范圍廣的顯微鏡，有沒有心動(dòng)呀，想不想體驗(yàn)一下操作極簡(jiǎn)，體驗(yàn)極佳的顯微鏡呀，想不想讓我們珍貴的實(shí)驗(yàn)樣本也有一個(gè)如此美輪美奐的瞬間，那就趕緊聯(lián)系我們，申請(qǐng)?jiān)囉冒?，三款產(chǎn)品，總有一個(gè)適合你的吆！

小伙伴們，我又來了~

本期給大家?guī)盹@微鏡物鏡的知識(shí)。

啥是物鏡，我想地球人都知道~

物鏡是顯微鏡的靈魂所在，物鏡是影響清晰度的最重要部件，先來了解下物鏡的重要參數(shù)。

在選擇物鏡時(shí)需要考慮以下幾個(gè)問題：

1、需要多大的放大倍數(shù)？

● 物鏡可以根據(jù)其放大倍率分為三大類。其中包括：低倍物鏡(2x、4x/5x和10x)，中倍物鏡(20x、40x)和高倍物鏡(60x/63x、100x)。除了物鏡的放大倍率不同外，物鏡使用的介質(zhì)也不同。例如，對(duì)于高倍鏡頭(60x和100x)，經(jīng)常使用浸油來獲得高分辨率。放大倍率較低的鏡頭則采用空氣作為介質(zhì)。

2、選擇哪種觀察方式？

● 顯微物鏡有很多類型，應(yīng)用場(chǎng)景也各有不同，根據(jù)觀察方式的不同，也有不同種類。一般在物鏡的外殼上會(huì)標(biāo)注物鏡的觀察方式。

● BF：明場(chǎng)；DF：暗場(chǎng)；PH：相差；PO：偏光；DIC：微分干涉；FL：熒光觀察(藍(lán)、綠、紫等)；UVFL：紫外熒光觀察。

3、如何選擇一個(gè)成像效果好的物鏡？

● ①要選擇有平場(chǎng)矯正功能的物鏡，即標(biāo)有Plan。 ②主要根據(jù)色差校正的能力來判斷成像效果：消色差物鏡（Achromatic）：僅能校正紅藍(lán)光的色差。半復(fù)消色差物鏡（FL）：能校正紅綠藍(lán)三色光的色差。全復(fù)消色差物鏡（Apo）：能對(duì)紅綠藍(lán)三色光的色差校正兩次，同時(shí)能校正紅、藍(lán)兩色光的球差。

● 看透明切片可選擇平場(chǎng)消色差物鏡（Ach）?？礋晒饪蛇x擇半復(fù)消色差物鏡（FL），而且有長(zhǎng)工作距離可選，既可以看玻片也可以看培養(yǎng)皿。若需要更好的成像效果可選擇全復(fù)消色差物鏡（Apo），但Apo物鏡沒有長(zhǎng)工作距離的，只適用于看玻片，不適合看培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶等厚的樣品。

4、對(duì)分辨率的要求是什么？

● 顯微鏡的分辨率是能分辨兩點(diǎn)間的最小距離，能分辨的距離越小分辨率越高。數(shù)值孔徑（NA值）與分辨率成正比，NA = n * sin α。與放大率成正比，與景深成反比。同樣的放大倍數(shù)下，NA值越高越好。在工作距離都滿足的情況下選擇NA值高的物鏡。

5、需要多長(zhǎng)的工作距離（WD）

● 根據(jù)工作距離的不同，可以分為：①普通工作距離物鏡：工作距離小，可以觀察切片，但不能觀察培養(yǎng)皿。②長(zhǎng)工作距離物鏡：用于倒置顯微鏡，可以滿足組織、懸浮液等材料的鏡檢。

6、所使用的玻片或培養(yǎng)板的厚度是多少？

● 在標(biāo)注物鏡的光學(xué)類型的后面（∞/0）(210/0)，也就是斜杠后面這個(gè)數(shù)字代表的是適用玻片厚度，（∞/0.17）(210/0.17)，適用玻片厚度就是0.17毫米。如果用了不合適的蓋玻片，則會(huì)出現(xiàn)很明顯的球差（不同角度的光線沒有會(huì)聚在同一高度）從而降低成像的對(duì)比度和分辨率。NA值越高的物鏡對(duì)蓋玻片厚度越敏感，所以要選擇正規(guī)的蓋玻片。有些高NA值的物鏡以及長(zhǎng)工作距離的物鏡有可調(diào)的蓋玻片厚度調(diào)節(jié)環(huán)可以對(duì)不同厚度的玻璃進(jìn)行矯正，可用于培養(yǎng)皿的觀察，觀察時(shí)調(diào)節(jié)到相應(yīng)的培養(yǎng)皿的厚度，或使用共聚焦培養(yǎng)皿，中間厚度也為0.17。

各位大神，請(qǐng)問如何有效采購(gòu)顯微鏡呀？急急急~~~