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- 狂想XXOO的歲月 2011-04-04 00:00:00
- 博凌科為生物科技-為你解答：養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子，甚至比養(yǎng)孩子還難。忘記是誰這么說了。上次一次性死了14瓶細(xì)胞，前后分析都是培養(yǎng)基污染了。然后換了新培養(yǎng)基，換了新的種子， 開始長得不錯，但今天看了一下，又污染了，培養(yǎng)基變渾濁。我養(yǎng)的是HUVEC，8月4日從一個老師處取種子（8月3日復(fù)蘇），他原先是用高糖DMEM培養(yǎng) 的，而我用的是1640。在倒置顯微鏡下，細(xì)胞形態(tài)不是太好，而且有小黑點(diǎn)。我用1640換掉原先的DMEM培養(yǎng)基，5，6日兩天還可以，只是細(xì)胞長得 慢。但今天就污染了。養(yǎng)細(xì)胞真是不知道什么時候就污染掉了。決定把血清和培養(yǎng)基檢測一下，看看是不是在這個環(huán)節(jié)上出問題了。可能還有別的問題，戰(zhàn)友們多多 指教。應(yīng)該是細(xì)菌污染，如果是霉菌的話，一般不會這么快，你前后用的是不是同一種培養(yǎng)液？如果是的話，立即停用。首先要排除培養(yǎng)液的問題，因為同時有14 瓶細(xì)胞污染，培養(yǎng)液的問題比較大。因此配制培養(yǎng)液后一定要做無菌試驗，過濾時要注意濾膜本身及其安裝是否有問題；其次，要排除培養(yǎng)液保存問題，比如，瓶蓋 有裂隙或者是蓋子與瓶口不合，密閉性差，容易細(xì)菌污染。還有就是操作過程中出了問題，不注意無菌操作，消毒不嚴(yán)格，造成培養(yǎng)液的污染。超凈工作臺、手的消 毒，拿培養(yǎng)瓶時不要拿蓋子及其周圍，培養(yǎng)液開蓋后要斜著放，瓶蓋橫放，蓋口不要向上或向下，培養(yǎng)瓶等盡量放在工作臺的中間等等?？傊?，關(guān)鍵是無菌及無菌操 作，做到這兩點(diǎn)應(yīng)該不會出什么差錯了。
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