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  瑣吶虛擬 2016-11-25 00:00:00

  教學(xué)目的和要求：通過本章的課堂教學(xué)，使學(xué)生了解微生物生長繁殖的規(guī)律，掌握微生物生長的測定方法，及各種物理、化學(xué)因素對(duì)微生物生長的影響。 教學(xué)ZD、難點(diǎn)：ZD：各種物理、化學(xué)因素對(duì)微生物生長的影響 難點(diǎn)：生長曲線、連續(xù)培養(yǎng) 微生物在適宜的條件下，不斷地吸收營養(yǎng)物質(zhì)并按照自己的代謝方式進(jìn)行代謝活動(dòng)，如同化作用大于異化作用，則細(xì)胞質(zhì)的量不斷增加，體積得以加大，于是表現(xiàn)為生長。所謂生長就是指生物個(gè)體由小到大的增長，即表現(xiàn)為細(xì)胞組分與結(jié)構(gòu)在量方面的增加；繁殖是指生物個(gè)體數(shù)目的增加。但是在單細(xì)胞微生物中，生長繁殖的速度很快，而且兩者始終交替進(jìn)行，個(gè)體生長與繁殖的界限難以劃清，因此實(shí)際上常以群體生長作為衡量微生物生長的指標(biāo)。群體生長的實(shí)質(zhì)是包含著個(gè)體細(xì)胞生長與繁殖交替進(jìn)行的過程。 diyi節(jié) 微生物純培養(yǎng)的獲得 微生物在自然界中不僅分布很廣，而且都是混雜地生活在一起。要想研究或利用某一種微生物，必須把它眾混雜的微生物類群分離出來，以得到只含有一種微生物的培養(yǎng)。微生物學(xué)中將在實(shí)驗(yàn)條件下，從一個(gè)細(xì)胞或同種細(xì)胞群繁殖得到的后代稱為純培養(yǎng)。純培養(yǎng)的獲得有下列幾種方法。 一、平板劃線分離法 由接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。 二、稀釋倒平板法 先將待分離的材料用無菌水作一系列的稀釋（如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …），然后分別取不同稀釋液少許，與已溶化并冷卻至 45 ℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后，傾入滅過菌的培養(yǎng)皿中，待瓊脂凝固后，制成可能含菌的瓊脂平板，保溫培養(yǎng)一定時(shí)間即可出出菌落。如果稀釋得當(dāng)，在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個(gè)菌落，這個(gè)菌落可能就是由一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞繁殖形成的。隨后挑取該單個(gè)菌落，或重復(fù)以上操作數(shù)次，便可得到純培養(yǎng)。 三、單孢子或單細(xì)胞分離法 采取顯微分離法從混雜群體中直接分離單個(gè)細(xì)胞或單個(gè)個(gè)體進(jìn)行培養(yǎng)以獲得純培養(yǎng)，稱為單細(xì)胞（單孢子）分離法。單細(xì)胞他離法的難度與細(xì)胞或個(gè)體的大小成反比，較大的微生物如藻類、原生動(dòng)物較容易，個(gè)體較小的細(xì)菌則較難。在顯微鏡下使用單孢子分離器進(jìn)行機(jī)械操作，挑取單孢子或單細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。也可以采用特制的毛細(xì)管在載玻片的瓊脂涂層上選取單孢子并切割下來，然后移到合適的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。單細(xì)胞分離法對(duì)操作技術(shù)有比較高的要求，多限于高度專業(yè)化的科學(xué)研究中采用。 四、利用選擇性培養(yǎng)基分離法 各種微生物對(duì)不同的化學(xué)試劑、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力，利用這些特性可配制合適某種微生物而限制其它微生物生長的選擇培養(yǎng)基，用它來培養(yǎng)微生物以獲得純培養(yǎng)。 另外，還可以將樣品預(yù)處理，消除不希望分離到的微生物。如加溫殺死營養(yǎng)菌體而保留芽孢，過濾去除絲狀菌體而保留單孢子。

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